| 符号说明 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第14-32页 |
| ·植物多聚半乳糖醛酸酶（PG）研究进展 | 第15-16页 |
| ·PG 的种类和作用方式 | 第15页 |
| ·PG 功能多样性 | 第15-16页 |
| ·植物病原菌多聚半乳糖醛酸酶（PG）研究进展 | 第16-17页 |
| ·PG 的形成 | 第16页 |
| ·PG 的表达调控 | 第16页 |
| ·PG 与致病性的关系 | 第16-17页 |
| ·PG 活性测定方法与分析 | 第17页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白（PGIP）研究进展 | 第17-25页 |
| ·PGIP 的发现及其作用机理 | 第18页 |
| ·PGIP 的结构特征及生化性质 | 第18-20页 |
| ·PGIP 的诱导表达调控 | 第20-21页 |
| ·PGIP 与PG 结合的特异性 | 第21-23页 |
| ·PGIP 的含量、分布的差异与抗病性的关系 | 第23-25页 |
| ·PGIP 在抗病育种中的应用 | 第25-28页 |
| ·植物抗病机制 | 第25-26页 |
| ·植物抗病基因的分类 | 第26-27页 |
| ·PGIP 基因在抗病育种中的应用 | 第27-28页 |
| ·病毒诱导的基因沉默(Virus Induced Gene Silencing, VIGS) 在植物中的应用 | 第28-31页 |
| ·VIGS 作用机理 | 第29页 |
| ·影响VIGS 沉默效率的因子 | 第29-31页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第31-32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-61页 |
| ·材料 | 第32-35页 |
| ·供试植物 | 第32页 |
| ·菌株与载体 | 第32页 |
| ·酶及生化试剂 | 第32-33页 |
| ·仪器 | 第33页 |
| ·常用培养基 | 第33页 |
| ·溶液配制 | 第33-35页 |
| ·实验方法 | 第35-61页 |
| ·辣椒多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白（CaPGIP）基因克隆及系统进化分析 | 第35-41页 |
| ·引物设计 | 第35-36页 |
| ·辣椒基因组DNA 提取 | 第36页 |
| ·PCR 获取目的基因片段 | 第36-38页 |
| ·Tail-PCR 获得目的基因全长序列 | 第38-40页 |
| ·基因序列的生物学分析及系统进化分析 | 第40-41页 |
| ·辣椒多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白（CaPGIP）基因表达差异分析 | 第41-46页 |
| ·CaPGIP 基因在不同组织器官中的表达差异分析 | 第41-46页 |
| ·CaPGIP 基因在受到不同胁迫因子刺激后的表达差异分析 | 第46页 |
| ·CaPGIP 基因原核表达、纯化，不同病原菌PGs 的诱导及PGs-CaPGIP 活性分析 | 第46-61页 |
| ·CaPGIP 基因原核表达及纯化 | 第46-51页 |
| ·CaPGIP 蛋白浓度测定 | 第51-52页 |
| ·PGs 的诱导 | 第52页 |
| ·PGs-CaPGIP 活性测定 | 第52-53页 |
| ·TRV 诱导的CaPGIP 基因沉默 | 第53-57页 |
| ·CaPGIP1 基因在异源寄主烟草中的过量表达 | 第57-61页 |
| 3 结果与分析 | 第61-84页 |
| ·三个CaPGIP 基因的克隆及系统进化树的构建 | 第61-65页 |
| ·PCR 和Tail-PCR 进行基因克隆 | 第61-62页 |
| ·三个CaPGIP 基因的结构分析 | 第62-63页 |
| ·三个CaPGIP 基因在不同物种中的系统学分析 | 第63-65页 |
| ·三个CaPGIP 基因的表达情况分析 | 第65-70页 |
| ·RNA 的提取 | 第65-66页 |
| ·三个CaPGIP 基因在不同组织器官中的表达差异 | 第66页 |
| ·三个CaPGIP 基因在受到不同因子刺激后表达量的差异 | 第66-70页 |
| ·三个CaPGIP 基因在受到水杨酸（SA）刺激后表达量的差异 | 第66页 |
| ·三个CaPGIP 基因在受到茉莉酸甲酯（MJA）刺激后表达量的差异 | 第66页 |
| ·三个CaPGIP 基因在受到脱落酸（ABA）刺激后表达量的差异 | 第66-67页 |
| ·三个CaPGIP 基因在受到创伤（Wounding）刺激后表达量的差异 | 第67页 |
| ·三个CaPGIP 基因在受到冷冻（Cold）刺激后表达量的差异 | 第67-70页 |
| ·三个CaPGIP 基因原核表达、纯化及CaPGIP-PGs 活性分析 | 第70-76页 |
| ·三个CaPGIP 基因重组质粒的构建与鉴定 | 第70-71页 |
| ·三个CaPGIP 基因的表达 | 第71-72页 |
| ·三个CaPGIP 基因的纯化 | 第72页 |
| ·三个CaPGIP 纯蛋白对不同植物病原菌PGs 活性的抑制效果 | 第72-76页 |
| ·考马斯亮蓝法测定三个CaPGIP 纯蛋白的浓度 | 第73页 |
| ·分光光度法检测CaPGIP-PGs 活性 | 第73-74页 |
| ·琼脂扩散法检测CaPGIP-PGs 活性 | 第74-76页 |
| ·植物病毒诱导的基因沉默 | 第76-79页 |
| ·两个沉默表达载体的构建与鉴定 | 第76-77页 |
| ·荧光定量PCR 检测沉默后CaPGIP 基因表达量的变化 | 第77-78页 |
| ·接种检测CaPGIP 基因沉默植株发病情况变化 | 第78-79页 |
| ·转CaPGIP 基因烟草抗病性研究 | 第79-84页 |
| ·植物表达载体的构建与鉴定 | 第79-80页 |
| ·T_0 代转基因植株的抗性筛选及再生 | 第80-81页 |
| ·T_0 代转基因植株的分子检测 | 第81-82页 |
| ·T_0 代转基因植株的抗病性检测 | 第82-84页 |
| 4 讨论 | 第84-92页 |
| ·CaPGIP 基因克隆与序列分析 | 第84-86页 |
| ·植物PGIP 基因的家族组成及结构特点 | 第84页 |
| ·扩增基因侧翼序列的Tail-PCR 技术 | 第84-86页 |
| ·CaPGIP 基因的表达情况 | 第86-87页 |
| ·CaPGIP 的表达及CaPGIP-PGs 的活性分析 | 第87-88页 |
| ·表达系统的选择 | 第87页 |
| ·表达的CaPGIP 蛋白对PGs 活性抑制效果检测 | 第87-88页 |
| ·辣椒体内CaPGIP 基因的沉默 | 第88-89页 |
| ·CaPGIP 基因在烟草体内的异源转化及过量表达 | 第89-92页 |
| ·CaPGIP 基因的过量表达对烟草抗病性的影响 | 第89-90页 |
| ·农杆菌介导的外源基因转化法 | 第90-92页 |
| 5 结论 | 第92-94页 |
| ·CaPGIP 基因克隆及结构分析 | 第92页 |
| ·CaPGIP 基因表达差异分析 | 第92页 |
| ·CaPGIP 对PGs 活性的抑制效果分析 | 第92-93页 |
| ·CaPGIP 基因沉默后对辣椒寄主抗病性的影响 | 第93页 |
| ·CaPGIP 基因在烟草中的过量表达对其抗病性的影响 | 第93-94页 |
| 6 参考文献 | 第94-102页 |
| 7 附录 | 第102-103页 |
| 8 致谢 | 第103-104页 |
| 9 攻读学位期间发表论文情况 | 第104-105页 |
| 硕士学位论文内容简介及自评 | 第105页 |
