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皖南黄肉种鸡ALV-J与REV的共感染及其分子变异分析

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-13页
1 引言第13-27页
   ·ALV-J 和REV 的基本概况第13-14页
   ·ALV-J 和REV 的分子病毒学特性第14-17页
     ·ALV-J 的分子病毒学特性第14-15页
     ·REV 的分子病毒学特性第15-17页
   ·ALV-J 和REV 的致病性第17-19页
     ·ALV-J 的致病性第17-18页
     ·REV 的致病性第18-19页
   ·ALV-J 和REV 的免疫抑制作用第19-20页
     ·ALV-J 的免疫抑制作用第19-20页
     ·REV 的免疫抑制作用第20页
   ·ALV-J 和REV 的传播方式第20-21页
     ·ALV-J 的传播方式第20页
     ·REV 的传播方式第20-21页
   ·禽类免疫抑制病与REV、ALV-J 共感染第21-22页
     ·禽类免疫系统和免疫抑制第21页
     ·禽网状内皮组织增生症引起的免疫抑制及其机理第21-22页
   ·ALV-J 和REV 的鉴别与诊断第22-25页
     ·ALV-J 的鉴别与诊断第22-23页
     ·REV 的诊断和鉴别第23-24页
     ·ALV-J 和REV 囊膜糖蛋白基因的变异第24-25页
   ·ALV-J 和REV 的预防和控制第25页
   ·REV 和ALV-J 共感染研究概况第25-26页
   ·研究的目的和意义第26-27页
2 材料与方法第27-44页
   ·材料第27-28页
     ·皖南黄肉种鸡 ALV-J 与 REV 的共感染及其分子变异分析第27-28页
       ·实验材料第27页
       ·试验所用溶液及其配制第27-28页
       ·病料来源第28页
     ·整合ALV-J 囊膜蛋白的假型HIV-1 病毒感染性的研究第28页
       ·病毒的来源第28页
   ·方法第28-44页
     ·皖南黄肉种鸡 ALV-J 与 REV 的共感染及其分子变异分析第28-36页
       ·病理组织学观察第28页
       ·病料的病理切片 HE 染色检查和石蜡切片的免疫酶第28-30页
         ·病理切片的制作方法第28-29页
         ·病理切片 HE 染色第29页
         ·石蜡切片的免疫酶染色程序第29-30页
         ·石蜡切片的免疫酶结果判定第30页
       ·病毒的细胞培养与鉴定第30-31页
         ·鸡胚成纤维细胞(CEF)的制备第30页
         ·病毒分离第30-31页
       ·IFA 检测组织切片 ALV-J 与 REV 的感染第31页
       ·env 基因和 LTR 序列的 PCR 扩增第31-36页
         ·细胞cDNA 的提取第31页
         ·病毒模板的制备第31-32页
         ·引物合成第32页
         ·env 基因的扩增、克隆与测序第32-33页
         ·env 基因 PCR 产物 DNA 电泳第33页
         ·PCR 产物的回收与定量第33-34页
         ·DNA 的连接反应第34页
         ·TG1 大肠杆菌感受态细胞的制备第34页
         ·连接产物的转化第34-35页
         ·质粒 DNA 的提取第35页
         ·重组质粒 DNA 的酶切鉴定第35-36页
         ·阳性克隆序列测定第36页
         ·序列分析第36页
     ·整合 ALV-J 囊膜蛋白的假型 HIV-1 病毒感染性的研究第36-44页
       ·前病毒 DNA 的提取第36页
       ·PCR 及产物回收第36-37页
       ·目的条带回收第37页
       ·DNA 与 Peasy-T 载体连接并转化第37页
       ·阳性克隆鉴定第37-39页
       ·Teasy-env 载体与表达载体双酶切第39-41页
         ·慢病毒载体系统图谱第39-40页
         ·双酶切体系第40-41页
       ·重组质粒的大量提取第41-42页
       ·包装病毒第42页
       ·293 FT 细胞的制备第42页
       ·Plenti7.3/env 阳性重组质粒和包装质粒共转染293FT 细胞第42-43页
       ·悬浮 IFA第43页
       ·假病毒感染 CEF 细胞第43-44页
3 结果第44-58页
   ·皖南黄肉种鸡 ALV-J 与 REV 的共感染及其分子变异分析第44-52页
     ·临床症状和剖检变化第44页
     ·病毒鉴定结果第44页
     ·病理组织学观察结果第44-45页
     ·飞片的 IFA 结果第45页
     ·IFA 检测组织切片 ALV-J 与 REV 的共感染结果第45-46页
     ·PCR 扩增结果第46-47页
     ·REV 检测第47页
     ·免疫酶染色结果第47页
     ·2 个 ALV-J 分离株gp85、gp37 基因和3’UTR 序列的分子变异分析第47-49页
     ·gp85 遗传进化树第49-50页
     ·可变区碱基序列第50-52页
   ·整合 ALV-J 囊膜蛋白的假型 HIV-1 病毒感染性的研究第52-58页
     ·组织中提取前病毒 DNA 的提取第52页
     ·ALV-env 基因的克隆及鉴定结果第52页
     ·PCR 扩增 ALV-env 及酶切鉴定结果第52-53页
     ·Teasy-env 克隆载体双酶切鉴定第53-54页
     ·Plenti7.3/env 表达载体双酶切第54页
     ·ALV-env 的测序结果第54-56页
       ·ALV-env 基因序列第54-55页
       ·ALV-env 基因序列分析第55页
       ·Env 抗原性分析第55-56页
     ·报告基因 EmGFP 在293T 细胞的表达第56-57页
     ·IFA 检测结果第57页
     ·悬浮 IFA第57页
     ·假型病毒感染 CEF 和滴度的测定第57-58页
     ·病毒滴度测定结果第58页
4 讨论第58-60页
   ·皖南黄肉种鸡 ALV-J 与 REV 的共感染及其分子变异分析第58-59页
   ·整合 ALV-J 囊膜蛋白的假型 HIV-1 病毒感染性的研究第59-60页
5 结论第60页
参考文献第60-70页
致谢第70-71页
攻读学位期间发表论文情况第71-72页
硕士学位论文内容简介及自评第72页

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