目录 | 第1-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
综述部分 | 第10-45页 |
第一章 酶体外定向进化的研究进展 | 第11-25页 |
第二章 D-氨甲酰水解酶的研究进展 | 第25-45页 |
论文部分 | 第45-114页 |
前言 | 第45-46页 |
第一章 利用分子伴侣提高D-氨甲酰水解酶的可溶性表达 | 第46-64页 |
摘要 | 第46页 |
关键词 | 第46-47页 |
1. 引言 | 第47-48页 |
2. 材料与方法 | 第48-52页 |
3. 结果 | 第52-59页 |
·来源于Burkholderia pickettii D-氨甲酰水解酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第52-55页 |
·分子伴侣在大肠杆菌中的表达 | 第55-57页 |
·分子伴侣与D-氨甲酰水解酶的共表达 | 第57-59页 |
4. 讨论 | 第59-60页 |
5. 小结 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-64页 |
第二章 D-氨甲酰水解酶可溶性表达的定向进化和结构与功能研究 | 第64-97页 |
摘要 | 第64页 |
关键词 | 第64-65页 |
1. 引言 | 第65-67页 |
2. 材料与方法 | 第67-72页 |
3. 结果 | 第72-89页 |
·通过定向进化获得可溶性表达提高的DCase 突变体 | 第72-76页 |
·识别与DCase 可溶性有关的功能位点 | 第76-79页 |
·有效突变位点的叠加构建及可溶性表达分析 | 第79-81页 |
·野生型DCase 和突变体DCase-M3 的酶学性质比较 | 第81-85页 |
·三个有效位点的变换突变及分析 | 第85-87页 |
·DCase-M3 三维模建结构的分析 | 第87-89页 |
4. 讨论 | 第89-92页 |
5. 小结 | 第92-93页 |
参考文献 | 第93-97页 |
第三章 D-氨甲酰水解酶的发酵条件及改造前后的发酵活力分析 | 第97-112页 |
摘要 | 第97页 |
关键词 | 第97-98页 |
1. 引言 | 第98-99页 |
2. 材料与方法 | 第99-103页 |
3. 结果与讨论 | 第103-110页 |
·诱导温度对酶发酵单位的影响 | 第103-104页 |
·不同培养基对酶表达的影响 | 第104-106页 |
·一菌两酶(DHase/DCase)的构建和表达 | 第106-108页 |
·野生型 DCase 和突变酶DCase-M3 的放大发酵试验 | 第108-110页 |
4. 小结 | 第110-111页 |
参考文献 | 第111-112页 |
结论 | 第112-114页 |
附录:本文缩写汇编 | 第114-116页 |
在学期间发表文章、会议报告及专利 | 第116-117页 |
致谢 | 第117页 |