家蚕尿酸氧化酶基因的克隆及其原核表达研究
| 第一章 文献综述 | 第1-20页 |
| ·尿酸氧化酶研究进展 | 第8-14页 |
| ·尿酸代谢与尿酸氧化酶 | 第8-10页 |
| ·尿酸氧化酶的研究 | 第10-11页 |
| ·尿酸氧化酶基因的研究 | 第11-13页 |
| ·尿酸氧化酶在临床治疗上的应用 | 第13-14页 |
| ·家蚕尿酸代谢 | 第14-16页 |
| ·昆虫体内的尿酸代谢 | 第14-15页 |
| ·家蚕体内的尿酸代谢 | 第15-16页 |
| ·pET原核表达系统概述 | 第16-20页 |
| ·概述 | 第16-18页 |
| ·原核表达优点 | 第18-20页 |
| 第二章 引言 | 第20-22页 |
| ·研究背景及研究意义 | 第20-21页 |
| ·技术路线 | 第21-22页 |
| 第三章 家蚕尿酸氧化酶基因的基因组预测 | 第22-26页 |
| ·材料和方法 | 第22页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·方法 | 第22页 |
| ·结果与分析 | 第22-24页 |
| ·家蚕尿酸氧化酶基因的预测 | 第22-23页 |
| ·功能域预测 | 第23-24页 |
| ·EST序列的检索和分析 | 第24页 |
| ·讨论 | 第24-26页 |
| 第四章 家蚕尿酸氧化酶基因的克隆及表达研究 | 第26-46页 |
| ·实验材料 | 第26-28页 |
| ·家蚕品种、菌株 | 第26页 |
| ·载体、工具酶与试剂盒 | 第26页 |
| ·寡核苷酸引物 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26页 |
| ·试剂的配制 | 第26-28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·方法和步骤 | 第28-38页 |
| ·cDNA的克隆和表达载体的构建 | 第28-35页 |
| ·引物设计 | 第28页 |
| ·家蚕脂肪体RNA的提取 | 第28-29页 |
| ·RNA的检测 | 第29-30页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第30页 |
| ·PCR反应 | 第30-31页 |
| ·PCR产物的电泳回收 | 第31-32页 |
| ·核酸定量 | 第32页 |
| ·重组克隆载体的构建 | 第32页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
| ·连接产物的转化 | 第33页 |
| ·阳性克隆的筛选和验证 | 第33-34页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第34-35页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第35-36页 |
| ·在大肠杆菌中诱导目的蛋白表达的基本方法 | 第36页 |
| ·细胞的裂解-超声波破碎 | 第36页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第36-37页 |
| ·尿酸氧化酶活性测定方法 | 第37-38页 |
| ·RT-PCR分析该基因在各组织器官的表达 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-43页 |
| ·家蚕尿酸氧化酶基因的cDNA克隆 | 第38-41页 |
| ·尿酸氧化酶原核表达载体的构建 | 第41-42页 |
| ·尿酸氧化酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第42-43页 |
| ·克隆的尿酸氧化酶基因在组织和器官的表达模式 | 第43页 |
| ·讨论 | 第43-46页 |
| 第五章 家蚕尿酸氧化酶基因的序列分析 | 第46-51页 |
| ·材料和方法 | 第46页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·方法 | 第46页 |
| ·结果和分析 | 第46-50页 |
| ·克隆的尿酸氧化酶基因序列分析 | 第46-48页 |
| ·尿酸氧化酶同源性分析 | 第48-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| 第六章 小结 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 附录1：缩略语表 | 第58-59页 |
| 附录2：图5.3中物种名称及NCBI登录号 | 第59页 |
| 附录3：硕士期间发表的文章 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
