中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
引言 | 第9-10页 |
1 文献综述 | 第10-19页 |
·淀粉合成 | 第10-11页 |
·淀粉分支酶 | 第11-15页 |
·SBE分类 | 第11-12页 |
·同工酶家族A与同工酶家族B特性对比 | 第12-14页 |
·结构特性 | 第12页 |
·免疫反应 | 第12页 |
·编码基因 | 第12-13页 |
·基因表达与淀粉合成的关系 | 第13页 |
·动力学性质 | 第13-14页 |
·基因工程改良淀粉品质研究进展 | 第14-15页 |
·转基因育种方法概述 | 第15-16页 |
·农杆菌介导转化法 | 第16-17页 |
·农杆菌 | 第16-17页 |
·影响农杆菌介导水稻转化的重要因素 | 第17页 |
·本研究目的及意义 | 第17-19页 |
2 材料与方法 | 第19-32页 |
·实验材料 | 第19-21页 |
·供试水稻品种 | 第19页 |
·菌株 | 第19页 |
·质粒 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19页 |
·主要仪器设备 | 第19-20页 |
·培养基 | 第20-21页 |
·实验方法 | 第21-31页 |
·抗蚊青占再生体系的建立与优化 | 第21页 |
·培养基筛选 | 第21页 |
·分化培养基的优化 | 第21页 |
·植物表达载体构建 | 第21-27页 |
·构建策略 | 第21-22页 |
·载体构建实验方法 | 第22-26页 |
·重组质粒对农杆菌的转化 | 第26-27页 |
·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第27-29页 |
·不同抗生素对农杆菌的敏感性实验 | 第27-28页 |
·抗蚊青占愈伤组织对潮霉素耐受性实验 | 第28页 |
·共培养菌液浓度对转化率的影响 | 第28页 |
·农杆菌转化水稻 | 第28-29页 |
·转化材料的分子检测 | 第29-31页 |
·GUS活性的组织化学染色分析 | 第29页 |
·PCR扩增检测 | 第29-31页 |
·实验数据处理 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-42页 |
·抗蚊青占再生体系的建立 | 第32-34页 |
·适合抗蚊青占愈伤诱导的培养基筛选 | 第32页 |
·适合抗蚊青占继代培养的培养基筛选 | 第32-33页 |
·适合抗蚊青占愈伤组织分化的培养基筛选 | 第33-34页 |
·植物表达载体构建 | 第34-37页 |
·质粒pBS-pLf8、pBS-PA2-4、pBS-pMA Ⅱ基因酶切 | 第34-36页 |
·农杆菌阳性克隆酶切鉴定 | 第36-37页 |
·农杆菌介导水稻遗传转化 | 第37-39页 |
·抗蚊青占愈伤组织对潮霉素的耐受性 | 第37页 |
·共培养菌液浓度对愈伤转化率的影响 | 第37-38页 |
·羧苄青霉素(Cb)、提门叮(Tm)对农杆菌抑制效果 | 第38-39页 |
·转化材料的分子检测 | 第39-42页 |
·GUS检测三种基因转化频率 | 第39-40页 |
·SBE基因的PCR检测 | 第40页 |
·潮霉素基因的PCR检测 | 第40-42页 |
4 讨论 | 第42-45页 |
·抗蚊青占再生体系的建立 | 第42-43页 |
·抗蚊青占遗传转化体系的优化 | 第43-44页 |
·植物表达载体的构建 | 第44-45页 |
5 小结 | 第45-46页 |
6 后续研究 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
附件一 本研究所采用的培养基配方 | 第51-54页 |
附件二 抗蚊青占再生体系建立及抗性愈伤获得 | 第54-55页 |
致谢 | 第55页 |