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拟南芥IKU2互作蛋白鉴定及同源四倍体分析

摘要第1-10页
Abstract第10-13页
缩写词表第13-14页
第一章:利用酵母双杂交鉴定拟南芥IKU2互作蛋白第14-83页
 1 前言第14-39页
   ·种子的构成及发育第14-26页
     ·胚乳发育第14-17页
     ·种胚发育第17-21页
     ·种皮发育第21-24页
     ·胚乳,胚和种皮之间的关系第24-26页
   ·种子大小的遗传控制第26-32页
     ·胚发育途径调控种子大小第26页
     ·胚乳发育途径调控种子大小第26-28页
     ·种皮发育途径调控种子大小第28页
     ·植物激素和激素类似物调控种子大小第28-30页
     ·IKU2基因调节种子发育途径的研究进展第30-32页
   ·酵母双杂交技术以及应用第32-36页
     ·酵母双杂交的原理第32页
     ·酵母双杂交系统的类型及其衍生系统第32-34页
     ·酵母双杂交在植物生长发育调节中的应用第34-36页
   ·Receptor-like kinase(RLK)受体蛋白激酶家族第36-38页
     ·RLK受体蛋白激酶的分类和结构特点第36-37页
     ·RLK受体蛋白激酶的功能第37-38页
   ·本研究的目的和意义第38-39页
 2 材料与方法第39-58页
   ·实验材料第39-41页
     ·植物材料第39页
     ·质粒与菌株第39-40页
     ·酶类第40页
     ·试剂与耗材第40页
     ·引物与测序分析第40页
     ·软件与数据分析的方法第40-41页
   ·实验方法第41-58页
     ·构建cDNA文库第41-45页
     ·构建诱饵载体第45-50页
     ·互作蛋白的筛选与验证第50-52页
     ·候选基因突变体筛选第52-53页
     ·过表达载体的构建以及转化植株的获得第53-58页
 3 结果与分析第58-78页
   ·文库菌种检测第58-59页
   ·全长cDNA文库构建及评估第59-61页
     ·RNA提取和质量检测第59页
     ·反转录以及LD-PCR第59-60页
     ·文库转化及效率统计第60页
     ·文库滴度的测定与收集保存第60-61页
   ·酵母表达载体的构建以及自激活、细胞毒检测第61-62页
     ·酵母表达载体的构建第61-62页
     ·检验自激活第62页
     ·检验细胞毒性第62页
   ·互作蛋白的筛选第62-65页
   ·筛选到候选基因的GO分析第65-67页
   ·候选基因与诱饵互作验证第67-69页
   ·候选基因突变体分析第69-71页
   ·候选基因ORG4的生物信息学分析第71-73页
   ·IKU2与ORG4的载体构建及转基因材料的表型分析第73-77页
   ·转基因材料的荧光检测第77-78页
   ·小结第78页
 4 讨论第78-83页
   ·种子发育的复杂性第78-79页
   ·IKU2基因在种子发育调节网络的地位第79-80页
   ·酵母文库的构建和筛选第80-82页
   ·进一步的设想与展望第82-83页
第二章:拟南芥同源四倍体分析第83-139页
 1 前言第83-93页
   ·多倍体的普遍性以及在植物进化中的重要地位第83-85页
   ·多倍体植物形态和生长发育进程的变异第85-86页
   ·多倍体生理方面的变化第86-88页
   ·多倍体基因表达分析研究进展第88-91页
   ·多倍体基因表达差异机制分析的研究进展第91-93页
   ·本研究的目的与意义第93页
 2 材料与方法第93-99页
   ·实验材料第93-94页
     ·植物材料第93页
     ·试剂与耗材第93-94页
     ·软件与数据分析的方法第94页
   ·实验方法第94-99页
     ·材料的种植与性状考察第94页
     ·胚胎发育观察第94页
     ·蛋白质、油脂以及糖分等组分分析第94-95页
     ·电镜分析第95页
     ·细胞学分析第95-96页
     ·葡萄糖处理第96页
     ·倍性分析第96页
     ·基因表达分析第96-99页
 3 结果与分析第99-131页
   ·BS是同源四倍体拟南芥第99-100页
   ·BS与WT杂交部分可育第100-103页
   ·BS生长发育延缓以及器官增大第103-105页
   ·BS胚胎发育延缓第105页
   ·BS种子中组分的测定第105-106页
   ·BS器官增大是由于细胞变大而不是由于细胞数目增多第106-108页
   ·细胞周期基因以及种子大小相关基因的表达分析第108-115页
   ·四倍体对葡萄糖敏感第115-120页
   ·葡萄糖处理后四倍体细胞数目和细胞大小都受到抑制第120-126页
   ·葡萄糖处理后四倍体细胞核内复制受到抑制第126-128页
   ·葡萄糖处理后的基因表达第128-131页
 4 讨论第131-139页
   ·同源四倍体的稳定性第131-132页
   ·四倍体的细胞学变化机制第132-133页
   ·四倍体基因表达变化与生长发育之间的关系第133-134页
   ·四倍体对非生物逆境的反应第134-135页
   ·四倍体对葡萄糖敏感的机制分析第135-138页
   ·进一步设想与展望第138-139页
参考文献第139-161页
附录第161-162页
 附录1 酵母双杂交所用的培养基第161页
 附录2 作者简介和在读期间发表的论文第161-162页
致谢第162页

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