| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 缩写词表 | 第13-14页 |
| 第一章:利用酵母双杂交鉴定拟南芥IKU2互作蛋白 | 第14-83页 |
| 1 前言 | 第14-39页 |
| ·种子的构成及发育 | 第14-26页 |
| ·胚乳发育 | 第14-17页 |
| ·种胚发育 | 第17-21页 |
| ·种皮发育 | 第21-24页 |
| ·胚乳,胚和种皮之间的关系 | 第24-26页 |
| ·种子大小的遗传控制 | 第26-32页 |
| ·胚发育途径调控种子大小 | 第26页 |
| ·胚乳发育途径调控种子大小 | 第26-28页 |
| ·种皮发育途径调控种子大小 | 第28页 |
| ·植物激素和激素类似物调控种子大小 | 第28-30页 |
| ·IKU2基因调节种子发育途径的研究进展 | 第30-32页 |
| ·酵母双杂交技术以及应用 | 第32-36页 |
| ·酵母双杂交的原理 | 第32页 |
| ·酵母双杂交系统的类型及其衍生系统 | 第32-34页 |
| ·酵母双杂交在植物生长发育调节中的应用 | 第34-36页 |
| ·Receptor-like kinase(RLK)受体蛋白激酶家族 | 第36-38页 |
| ·RLK受体蛋白激酶的分类和结构特点 | 第36-37页 |
| ·RLK受体蛋白激酶的功能 | 第37-38页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第38-39页 |
| 2 材料与方法 | 第39-58页 |
| ·实验材料 | 第39-41页 |
| ·植物材料 | 第39页 |
| ·质粒与菌株 | 第39-40页 |
| ·酶类 | 第40页 |
| ·试剂与耗材 | 第40页 |
| ·引物与测序分析 | 第40页 |
| ·软件与数据分析的方法 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-58页 |
| ·构建cDNA文库 | 第41-45页 |
| ·构建诱饵载体 | 第45-50页 |
| ·互作蛋白的筛选与验证 | 第50-52页 |
| ·候选基因突变体筛选 | 第52-53页 |
| ·过表达载体的构建以及转化植株的获得 | 第53-58页 |
| 3 结果与分析 | 第58-78页 |
| ·文库菌种检测 | 第58-59页 |
| ·全长cDNA文库构建及评估 | 第59-61页 |
| ·RNA提取和质量检测 | 第59页 |
| ·反转录以及LD-PCR | 第59-60页 |
| ·文库转化及效率统计 | 第60页 |
| ·文库滴度的测定与收集保存 | 第60-61页 |
| ·酵母表达载体的构建以及自激活、细胞毒检测 | 第61-62页 |
| ·酵母表达载体的构建 | 第61-62页 |
| ·检验自激活 | 第62页 |
| ·检验细胞毒性 | 第62页 |
| ·互作蛋白的筛选 | 第62-65页 |
| ·筛选到候选基因的GO分析 | 第65-67页 |
| ·候选基因与诱饵互作验证 | 第67-69页 |
| ·候选基因突变体分析 | 第69-71页 |
| ·候选基因ORG4的生物信息学分析 | 第71-73页 |
| ·IKU2与ORG4的载体构建及转基因材料的表型分析 | 第73-77页 |
| ·转基因材料的荧光检测 | 第77-78页 |
| ·小结 | 第78页 |
| 4 讨论 | 第78-83页 |
| ·种子发育的复杂性 | 第78-79页 |
| ·IKU2基因在种子发育调节网络的地位 | 第79-80页 |
| ·酵母文库的构建和筛选 | 第80-82页 |
| ·进一步的设想与展望 | 第82-83页 |
| 第二章:拟南芥同源四倍体分析 | 第83-139页 |
| 1 前言 | 第83-93页 |
| ·多倍体的普遍性以及在植物进化中的重要地位 | 第83-85页 |
| ·多倍体植物形态和生长发育进程的变异 | 第85-86页 |
| ·多倍体生理方面的变化 | 第86-88页 |
| ·多倍体基因表达分析研究进展 | 第88-91页 |
| ·多倍体基因表达差异机制分析的研究进展 | 第91-93页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第93页 |
| 2 材料与方法 | 第93-99页 |
| ·实验材料 | 第93-94页 |
| ·植物材料 | 第93页 |
| ·试剂与耗材 | 第93-94页 |
| ·软件与数据分析的方法 | 第94页 |
| ·实验方法 | 第94-99页 |
| ·材料的种植与性状考察 | 第94页 |
| ·胚胎发育观察 | 第94页 |
| ·蛋白质、油脂以及糖分等组分分析 | 第94-95页 |
| ·电镜分析 | 第95页 |
| ·细胞学分析 | 第95-96页 |
| ·葡萄糖处理 | 第96页 |
| ·倍性分析 | 第96页 |
| ·基因表达分析 | 第96-99页 |
| 3 结果与分析 | 第99-131页 |
| ·BS是同源四倍体拟南芥 | 第99-100页 |
| ·BS与WT杂交部分可育 | 第100-103页 |
| ·BS生长发育延缓以及器官增大 | 第103-105页 |
| ·BS胚胎发育延缓 | 第105页 |
| ·BS种子中组分的测定 | 第105-106页 |
| ·BS器官增大是由于细胞变大而不是由于细胞数目增多 | 第106-108页 |
| ·细胞周期基因以及种子大小相关基因的表达分析 | 第108-115页 |
| ·四倍体对葡萄糖敏感 | 第115-120页 |
| ·葡萄糖处理后四倍体细胞数目和细胞大小都受到抑制 | 第120-126页 |
| ·葡萄糖处理后四倍体细胞核内复制受到抑制 | 第126-128页 |
| ·葡萄糖处理后的基因表达 | 第128-131页 |
| 4 讨论 | 第131-139页 |
| ·同源四倍体的稳定性 | 第131-132页 |
| ·四倍体的细胞学变化机制 | 第132-133页 |
| ·四倍体基因表达变化与生长发育之间的关系 | 第133-134页 |
| ·四倍体对非生物逆境的反应 | 第134-135页 |
| ·四倍体对葡萄糖敏感的机制分析 | 第135-138页 |
| ·进一步设想与展望 | 第138-139页 |
| 参考文献 | 第139-161页 |
| 附录 | 第161-162页 |
| 附录1 酵母双杂交所用的培养基 | 第161页 |
| 附录2 作者简介和在读期间发表的论文 | 第161-162页 |
| 致谢 | 第162页 |