独创性声明 | 第1页 |
关于论文使用授权的说明 | 第2-6页 |
中文摘要 | 第6-7页 |
英文摘要 | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第8-18页 |
1 H-Y抗原研究现状 | 第8-12页 |
·H-Y抗原化学本质的研究 | 第8-9页 |
·H-Y抗原的应用研究 | 第9-10页 |
·H-Y抗体研究现状 | 第10-12页 |
2 噬菌体抗体库的构建策略 | 第12-18页 |
·建库策略 | 第13-16页 |
·噬菌体抗体筛选 | 第16页 |
·抗体亲和力的提高 | 第16-18页 |
第二章 鼠源性抗雄性特异性抗原噬菌体Fab抗体库的构建 | 第18-44页 |
1 材料 | 第18-20页 |
·主要试剂 | 第18-19页 |
·菌株和载体 | 第19-20页 |
·实验动物 | 第20页 |
·主要实验仪器及耗材 | 第20页 |
2 方法 | 第20-32页 |
·试剂的配制 | 第20-22页 |
·细胞悬液制备 | 第22-23页 |
·H-Y抗血清的制备及处理 | 第23页 |
·H-Y抗血清精子细胞毒实验检测 | 第23页 |
·选择高效价H-Y抗血清及特异性测定 | 第23-24页 |
·免疫雌性小鼠脾组织总RNA的提取 | 第24页 |
·cDNA第一条链的合成 | 第24-25页 |
·PCR扩增抗体Fab片段基因 | 第25-27页 |
·Fd和κ链基因克隆 | 第27-32页 |
3 结果与分析 | 第32-40页 |
·H-Y抗血清的特异性检测结果 | 第32-34页 |
·总RNA的提取 | 第34页 |
·cDNA第一条链的合成 | 第34-35页 |
·免疫球蛋白轻链和重链Fd段基因的扩增 | 第35-36页 |
·轻链基因和噬粒pComb3的酶切反应 | 第36页 |
·轻链重组噬粒的转化 | 第36-37页 |
·鉴定轻链重组质粒 | 第37-38页 |
·抗体组合文库的构建 | 第38-40页 |
·噬菌体抗体库的构建 | 第40页 |
4 讨论 | 第40-44页 |
·H-Y抗血清的制备及特异性分析 | 第40页 |
·RNA的提取 | 第40-41页 |
·抗体Fab段基因的扩增 | 第41页 |
·抗体组合文库的构建 | 第41-42页 |
·噬菌体抗体呈现库构建 | 第42-44页 |
第三章 鼠源性抗雄性特异性抗原噬菌体Fab抗体库的初步筛选 | 第44-57页 |
1 材料 | 第44页 |
·主要试剂 | 第44页 |
·主要实验仪器及耗材 | 第44页 |
·实验动物 | 第44页 |
·辅助噬菌体、噬菌体抗体库、菌株 | 第44页 |
2 方法 | 第44-47页 |
·噬菌体抗体库的筛选 | 第45-46页 |
·噬菌体抗体库的鉴定 | 第46页 |
·阳性克隆序列测定与结构分析 | 第46-47页 |
3 结果与分析 | 第47-54页 |
·噬菌体抗体库的筛选中特异性噬菌体抗体的富集 | 第47页 |
·噬菌体抗体库的鉴定 | 第47-49页 |
·基因同源性分析 | 第49-54页 |
4 讨论 | 第54-57页 |
·噬菌体抗体库的筛选 | 第54页 |
·噬菌体抗体库的特异性的鉴定与分析 | 第54-55页 |
·基因同源性分析 | 第55-57页 |
结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
主要英文缩略词表 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
作者简介 | 第67页 |