| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-27页 |
| ·人血清白蛋白的结构、性质与应用 | 第9-11页 |
| ·HSA的结构 | 第9-10页 |
| ·理化性质 | 第10页 |
| ·人血清白蛋白的体内合成 | 第10-11页 |
| ·人血清白蛋白的药理作用 | 第11页 |
| ·表达重组人血清白蛋白的研究进展 | 第11-15页 |
| ·rHSA在原核表达系统中的表达 | 第11-12页 |
| ·rHSA在酵母真核细胞表达系统中的表达 | 第12-14页 |
| ·rHSA在动、植物表达系统中的表达 | 第14-15页 |
| ·重组人血清白蛋白在药学中的应用研究进展 | 第15-16页 |
| ·人造血液替代品 | 第15页 |
| ·通过微球体化和化学修饰促进药物的靶向作用 | 第15页 |
| ·与治疗剂直接结合 | 第15页 |
| ·白蛋白融合蛋白 | 第15-16页 |
| ·血脑屏障运输和非入侵性基因转运载体 | 第16页 |
| ·汉逊酵母(Hansenula polymorpha)表达系统 | 第16-20页 |
| ·汉逊酵母的基本特征 | 第16-19页 |
| ·汉逊酵母作为表达宿主的菌株 | 第19页 |
| ·表达载体的主要元件 | 第19-20页 |
| ·汉逊酵母和巴斯德毕赤酵母表达系统的比较 | 第20页 |
| ·高密度发酵生产重组人血清白蛋白 | 第20-22页 |
| ·提升高密度发酵生产重组人血清白蛋白的策略 | 第20-21页 |
| ·高密度发酵生产重组人血清白蛋白碳源供给方式的研究 | 第21页 |
| ·高密度发酵生产重组人血清白蛋白过程中降低蛋白酶活性的策略 | 第21-22页 |
| ·重组人血清白蛋白的分离纯化 | 第22-24页 |
| ·课题的内容和意义 | 第24页 |
| 参考文献 | 第24-27页 |
| 2 rHSA表达质粒的构建与重组菌株的筛选 | 第27-47页 |
| ·前言 | 第27页 |
| ·实验材料 | 第27-28页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·材料、培养基 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-38页 |
| ·设计重组人血清白蛋白的基因序列 | 第28-30页 |
| ·重组质粒的构建 | 第30-32页 |
| ·表达质粒的转化 | 第32-33页 |
| ·表达菌株的筛选 | 第33-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-46页 |
| ·HSA基因序列优化 | 第38-40页 |
| ·重组质粒的获得及目的基因的检测 | 第40-42页 |
| ·重组质粒转化汉逊酵母及阳性克隆的筛选 | 第42-46页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| 3. 发酵 | 第47-52页 |
| ·前言 | 第47页 |
| ·实验材料 | 第47-48页 |
| ·主要仪器 | 第47页 |
| ·主要试剂 | 第47页 |
| ·菌种 | 第47-48页 |
| ·培养基 | 第48页 |
| ·试验操作及方法 | 第48页 |
| ·培养一、二级种子 | 第48页 |
| ·发酵罐培养 | 第48页 |
| ·结果与讨论 | 第48-51页 |
| ·发酵过程曲线 | 第49页 |
| ·SDS-PAGE分析发酵液上清蛋白质 | 第49-50页 |
| ·ELISA法检测发酵液上清中rHSA的表达量 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-52页 |
| 4 重组人血清白蛋白的分离纯化与免疫原性分析 | 第52-61页 |
| ·前言 | 第52页 |
| ·实验材料 | 第52-53页 |
| ·试验仪器 | 第52页 |
| ·试验试剂 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第53-55页 |
| ·蛋白组分的制备 | 第53页 |
| ·Streamline SP离子交换层析 | 第53页 |
| ·疏水层析 | 第53页 |
| ·阴离子交换层析 | 第53-54页 |
| ·蛋白浓度的确定 | 第54页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第54页 |
| ·小鼠免疫原性初步实验 | 第54-55页 |
| ·结果与分析 | 第55-60页 |
| ·Streamline SP离子交换层析 | 第55-56页 |
| ·疏水层析 | 第56-57页 |
| ·DEAE离子交换层析 | 第57-58页 |
| ·酶联免疫分析 | 第58-59页 |
| ·抗原性分析 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 附录 I 缩略语表 | 第62-63页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第63-65页 |
| 大连理工大学学位论文版权使用授权书 | 第65页 |
