中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-8页 |
符号说明 | 第8-10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-22页 |
一、玉米遗传转化受体系统的建立 | 第10-13页 |
二、玉米遗传转化方法的研究概况 | 第13-16页 |
三、基因工程在玉米遗传育种中的应用 | 第16-20页 |
四、als突变基因在玉米遗传转化中的应用 | 第20-21页 |
五、本研究工作的目的和意义 | 第21-22页 |
第二部分 实验论文 | 第22-47页 |
一、材料与方法 | 第22-35页 |
1. 实验材料 | 第22-27页 |
·植物材料 | 第22页 |
·菌株和质粒 | 第22-23页 |
·酶及化学试剂 | 第23页 |
·培养基 | 第23-24页 |
·质粒提取液 | 第24-25页 |
·植物基因组DNA提取试剂(CTAB法) | 第25页 |
·Southern杂交所需溶液 | 第25-27页 |
·主要仪器设备 | 第27页 |
2. 实验方法 | 第27-35页 |
·TR-CAT基因植物表达载体的构建 | 第27-31页 |
·转基因玉米的获得 | 第31-32页 |
·重组质粒转化根癌农杆菌 | 第31-32页 |
·农杆菌的培养 | 第32页 |
·农杆菌转化玉米茎尖 | 第32页 |
·玉米植株对除草剂敏感性的确定 | 第32页 |
·玉米转化植株的分子检测 | 第32-34页 |
·CTAB法微量提取玉米叶片 DNA | 第32-33页 |
·转基因植株的 PCR检测 | 第33页 |
·转化植株 PCR-Southern blot检测 | 第33-34页 |
·转基因植株的抗旱性分析 | 第34-35页 |
·叶片细胞膜损伤和丙二醛含量的测定 | 第34-35页 |
·叶绿素a荧光动力学参数的测定 | 第35页 |
·玉米叶片渗透势的测定 | 第35页 |
·过氧化氢酶活性的测定 | 第35页 |
二、结果 | 第35-44页 |
1. TR-CAT基因全长片段的扩增 | 第35-36页 |
2. 构建插入 TR-CAT基因的植物表达载体 | 第36-38页 |
3. 转化植株的获得 | 第38页 |
4. 除草剂筛选浓度的确定 | 第38-39页 |
5. 转基因植株的分子生物学检测 | 第39-41页 |
6. 转基因植株生理指标的测定 | 第41-44页 |
·干旱胁迫后玉米叶片细胞膜的损伤和丙二醛含量 | 第41页 |
·光系统Ⅱ的活性 | 第41-42页 |
·干旱处理后叶片的渗透势 | 第42-43页 |
·玉米叶片中过氧化氢酶的活性 | 第43-44页 |
三、讨论 | 第44-47页 |
1. 农杆菌介导的玉米茎尖转化体系建立的意义 | 第44-45页 |
2. 转CAT基因提高了玉米的抗旱性 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-54页 |
附图 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第56页 |