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山羊胚胎干细胞和胚胎生殖细胞的分离培养与鉴定

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-14页
综述部分第14-36页
 第一章 哺乳动物胚胎干细胞研究进展第14-24页
   ·胚胎干细胞研究历史第14-16页
   ·胚胎干细胞建系的方法第16-19页
   ·以胚胎干细胞为基础的基因功能研究第19-21页
     ·各种技术简介第19-20页
     ·各种技术优缺点比较第20-21页
   ·胚胎干细胞的分子生物学研究第21-24页
     ·胚胎干细胞中高表达的基因第21-22页
     ·胚胎干细胞多能性维持和自我更新的分子机制第22-24页
 第二章 胚胎干细胞本质与起源的探讨第24-31页
   ·胚胎干细胞概念及发展第24-25页
   ·胚胎多能性细胞和早期生殖细胞发育的研究现状第25-26页
   ·早期胚胎细胞(ICM 和上胚层)、生殖细胞与胚胎干细胞的关系第26-28页
     ·胚胎多能性细胞、早期生殖细胞与胚胎干细胞特性的比较第26页
     ·胚胎多能性细胞和早期生殖细胞向胚胎干细胞的转化第26-28页
   ·胚胎干细胞与其他类型干细胞间关系的假说第28-29页
   ·存在的问题与思考第29-30页
   ·结论第30-31页
 第三章 家畜胚胎干细胞建系的研究进展第31-36页
   ·牛胚胎干细胞的研究概况第31-32页
     ·牛ESCs 的研究进展第31-32页
     ·牛EGCs 的研究进展第32页
   ·猪胚胎干细胞的研究概况第32-33页
     ·猪ESCs 的研究进展第32页
     ·猪EGCs 的研究进展第32-33页
   ·山羊和绵羊胚胎干细胞的研究概况第33-35页
     ·山羊和绵羊ESCs 的研究进展第33页
     ·山羊和绵羊EGCs 的研究进展第33-35页
   ·家畜胚胎干细胞研究进展缓慢的原因探讨第35-36页
实验部分第36-82页
 第四章 山羊早期胚胎材料的获取第36-46页
   ·材料与方法第37页
     ·材料第37页
     ·方法第37页
   ·结果与分析第37-42页
     ·超排处理后山羊的采胚状况第37-39页
     ·自然配种山羊的采胚状况第39-40页
     ·取自屠宰场胎儿的状况第40页
     ·超排处理山羊采胚状况与黄体形态关系的统计第40页
     ·正常黄体与早期退化黄体的组织学特征第40-42页
   ·讨论第42-45页
     ·山羊早期胚胎和原始生殖细胞发育的特点第42-44页
     ·超排处理对山羊发生早期黄体退化的影响第44页
     ·山羊胚胎工程及相关技术的发展第44-45页
   ·小结第45-46页
 第五章 源于山羊囊胚和孵化胚阶段ESCS 的分离、培养与鉴定第46-65页
   ·材料第47页
     ·山羊胚胎、小鼠、大鼠和家兔第47页
     ·主要试剂第47页
     ·胚胎和ESCs 集落分割工具第47页
   ·方法第47-51页
     ·兔抗山羊血清的制备与检测第47-49页
     ·山羊囊胚ICM 的分离第49页
     ·MEF、GEF、大鼠胎肝成纤维细胞和fbLF 细胞饲养层的制备第49-50页
     ·MEF、STO 和大鼠心肌条件培养液的制备第50页
     ·山羊囊胚全胚、ICM、裸胚和胚盘细胞的体外培养第50-51页
     ·山羊ICM 和类ESCs 集落的鉴定第51页
   ·结果与分析第51-61页
     ·兔抗山羊血清效价的测定第51-53页
     ·不同方法分离ICM 的效果第53-54页
     ·山羊囊胚全胚、ICM、裸胚和胚盘细胞的体外培养结果第54-57页
     ·山羊ICM 与类ESCs 集落的鉴定第57-61页
   ·讨论第61-64页
     ·抗血清 50%溶红细胞率可以为免疫外科法分离山羊 ICM 提供参考第61页
     ·山羊ICM 和胚盘细胞均为混合细胞群体第61页
     ·影响山羊类ESCs 建系的主要因素第61-64页
   ·小结第64-65页
 第六章 山羊原始生殖细胞的分离、培养与鉴定第65-77页
   ·材料第65-66页
     ·山羊胎儿第65页
     ·主要试剂和干细胞集落分割工具第65-66页
   ·方法第66-68页
     ·山羊胎儿的处理第66页
     ·MEF 和GEF 饲养层的制作第66页
     ·山羊PGCs 的分离和培养第66页
     ·山羊EGCs 的传代和培养第66-67页
     ·山羊PGCs 和EGCs 的鉴定第67-68页
   ·结果与分析第68-73页
     ·山羊PGCs 的分离和培养第68-69页
     ·山羊EGCs 的传代和培养第69-70页
     ·山羊PGCs 和EGCs 的鉴定第70-73页
   ·讨论第73-75页
     ·分离山羊PGCs 适宜的胎龄第73-74页
     ·山羊PGCs 的分离与纯化第74页
     ·山羊PGCs 和EGCs 的培养第74-75页
   ·小结第75-77页
 第七章 源于山羊桑椹胚阶段ESCS 的分离、培养与鉴定第77-82页
   ·材料第77页
     ·山羊胚胎第77页
     ·主要试剂和ESCs 传代工具第77页
   ·方法第77-78页
     ·桑椹胚和早期卵裂期阶段的胚胎卵裂球的分离第77-78页
     ·山羊桑椹胚卵裂球的体外培养第78页
     ·山羊类ESCs 集落的鉴定第78页
   ·结果与分析第78-81页
     ·不同处理方式和接种方法对山羊桑椹胚卵裂球体外培养的影响第78-80页
     ·山羊桑椹胚全胚和卵裂球的体外培养第80-81页
   ·讨论第81页
   ·小结第81-82页
结论第82-83页
本论文创新之处第83-84页
进一步研究的课题第84-85页
参考文献第85-95页
致谢第95-96页
作者简介第96页

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