摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-14页 |
综述部分 | 第14-36页 |
第一章 哺乳动物胚胎干细胞研究进展 | 第14-24页 |
·胚胎干细胞研究历史 | 第14-16页 |
·胚胎干细胞建系的方法 | 第16-19页 |
·以胚胎干细胞为基础的基因功能研究 | 第19-21页 |
·各种技术简介 | 第19-20页 |
·各种技术优缺点比较 | 第20-21页 |
·胚胎干细胞的分子生物学研究 | 第21-24页 |
·胚胎干细胞中高表达的基因 | 第21-22页 |
·胚胎干细胞多能性维持和自我更新的分子机制 | 第22-24页 |
第二章 胚胎干细胞本质与起源的探讨 | 第24-31页 |
·胚胎干细胞概念及发展 | 第24-25页 |
·胚胎多能性细胞和早期生殖细胞发育的研究现状 | 第25-26页 |
·早期胚胎细胞(ICM 和上胚层)、生殖细胞与胚胎干细胞的关系 | 第26-28页 |
·胚胎多能性细胞、早期生殖细胞与胚胎干细胞特性的比较 | 第26页 |
·胚胎多能性细胞和早期生殖细胞向胚胎干细胞的转化 | 第26-28页 |
·胚胎干细胞与其他类型干细胞间关系的假说 | 第28-29页 |
·存在的问题与思考 | 第29-30页 |
·结论 | 第30-31页 |
第三章 家畜胚胎干细胞建系的研究进展 | 第31-36页 |
·牛胚胎干细胞的研究概况 | 第31-32页 |
·牛ESCs 的研究进展 | 第31-32页 |
·牛EGCs 的研究进展 | 第32页 |
·猪胚胎干细胞的研究概况 | 第32-33页 |
·猪ESCs 的研究进展 | 第32页 |
·猪EGCs 的研究进展 | 第32-33页 |
·山羊和绵羊胚胎干细胞的研究概况 | 第33-35页 |
·山羊和绵羊ESCs 的研究进展 | 第33页 |
·山羊和绵羊EGCs 的研究进展 | 第33-35页 |
·家畜胚胎干细胞研究进展缓慢的原因探讨 | 第35-36页 |
实验部分 | 第36-82页 |
第四章 山羊早期胚胎材料的获取 | 第36-46页 |
·材料与方法 | 第37页 |
·材料 | 第37页 |
·方法 | 第37页 |
·结果与分析 | 第37-42页 |
·超排处理后山羊的采胚状况 | 第37-39页 |
·自然配种山羊的采胚状况 | 第39-40页 |
·取自屠宰场胎儿的状况 | 第40页 |
·超排处理山羊采胚状况与黄体形态关系的统计 | 第40页 |
·正常黄体与早期退化黄体的组织学特征 | 第40-42页 |
·讨论 | 第42-45页 |
·山羊早期胚胎和原始生殖细胞发育的特点 | 第42-44页 |
·超排处理对山羊发生早期黄体退化的影响 | 第44页 |
·山羊胚胎工程及相关技术的发展 | 第44-45页 |
·小结 | 第45-46页 |
第五章 源于山羊囊胚和孵化胚阶段ESCS 的分离、培养与鉴定 | 第46-65页 |
·材料 | 第47页 |
·山羊胚胎、小鼠、大鼠和家兔 | 第47页 |
·主要试剂 | 第47页 |
·胚胎和ESCs 集落分割工具 | 第47页 |
·方法 | 第47-51页 |
·兔抗山羊血清的制备与检测 | 第47-49页 |
·山羊囊胚ICM 的分离 | 第49页 |
·MEF、GEF、大鼠胎肝成纤维细胞和fbLF 细胞饲养层的制备 | 第49-50页 |
·MEF、STO 和大鼠心肌条件培养液的制备 | 第50页 |
·山羊囊胚全胚、ICM、裸胚和胚盘细胞的体外培养 | 第50-51页 |
·山羊ICM 和类ESCs 集落的鉴定 | 第51页 |
·结果与分析 | 第51-61页 |
·兔抗山羊血清效价的测定 | 第51-53页 |
·不同方法分离ICM 的效果 | 第53-54页 |
·山羊囊胚全胚、ICM、裸胚和胚盘细胞的体外培养结果 | 第54-57页 |
·山羊ICM 与类ESCs 集落的鉴定 | 第57-61页 |
·讨论 | 第61-64页 |
·抗血清 50%溶红细胞率可以为免疫外科法分离山羊 ICM 提供参考 | 第61页 |
·山羊ICM 和胚盘细胞均为混合细胞群体 | 第61页 |
·影响山羊类ESCs 建系的主要因素 | 第61-64页 |
·小结 | 第64-65页 |
第六章 山羊原始生殖细胞的分离、培养与鉴定 | 第65-77页 |
·材料 | 第65-66页 |
·山羊胎儿 | 第65页 |
·主要试剂和干细胞集落分割工具 | 第65-66页 |
·方法 | 第66-68页 |
·山羊胎儿的处理 | 第66页 |
·MEF 和GEF 饲养层的制作 | 第66页 |
·山羊PGCs 的分离和培养 | 第66页 |
·山羊EGCs 的传代和培养 | 第66-67页 |
·山羊PGCs 和EGCs 的鉴定 | 第67-68页 |
·结果与分析 | 第68-73页 |
·山羊PGCs 的分离和培养 | 第68-69页 |
·山羊EGCs 的传代和培养 | 第69-70页 |
·山羊PGCs 和EGCs 的鉴定 | 第70-73页 |
·讨论 | 第73-75页 |
·分离山羊PGCs 适宜的胎龄 | 第73-74页 |
·山羊PGCs 的分离与纯化 | 第74页 |
·山羊PGCs 和EGCs 的培养 | 第74-75页 |
·小结 | 第75-77页 |
第七章 源于山羊桑椹胚阶段ESCS 的分离、培养与鉴定 | 第77-82页 |
·材料 | 第77页 |
·山羊胚胎 | 第77页 |
·主要试剂和ESCs 传代工具 | 第77页 |
·方法 | 第77-78页 |
·桑椹胚和早期卵裂期阶段的胚胎卵裂球的分离 | 第77-78页 |
·山羊桑椹胚卵裂球的体外培养 | 第78页 |
·山羊类ESCs 集落的鉴定 | 第78页 |
·结果与分析 | 第78-81页 |
·不同处理方式和接种方法对山羊桑椹胚卵裂球体外培养的影响 | 第78-80页 |
·山羊桑椹胚全胚和卵裂球的体外培养 | 第80-81页 |
·讨论 | 第81页 |
·小结 | 第81-82页 |
结论 | 第82-83页 |
本论文创新之处 | 第83-84页 |
进一步研究的课题 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-95页 |
致谢 | 第95-96页 |
作者简介 | 第96页 |