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糜子干旱复水的基因表达谱分析及相关基因克隆

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 文献综述第11-32页
   ·干旱胁迫的信号传导第11-15页
     ·主要信号传导物质第11-13页
     ·信号传导途径第13-15页
   ·植物干旱胁迫下诱导的基因表达第15-21页
     ·参与干旱胁迫下基因表达的转录因子第15-16页
     ·干旱胁迫下诱导的基因表达途径第16-17页
     ·干旱胁迫下诱导的功能蛋白第17-21页
   ·植物干旱后复水机制的研究进展第21-24页
     ·植物胁迫后的补偿效应第21页
     ·干旱后复水补偿效应产生的机制第21-22页
     ·干旱后复水补偿效应的类型第22-23页
     ·作物补偿效应的影响因素第23页
     ·作物补偿效应分子机理研究第23-24页
   ·功能基因组学及其在植物抗逆性研究中的应用第24-29页
     ·基因差异表达的主要研究方法第24-28页
     ·基因功能验证的主要方法第28-29页
   ·糜子抗旱性研究现状第29-30页
   ·本研究的目的与意义第30-31页
   ·技术路线与预期成果第31-32页
第二章 糜子干旱及复水相关基因cDNA-AFLP 差异显示第32-42页
   ·材料与方法第32-36页
     ·材料第32页
     ·总RNA的提取与DNaseⅠ处理第32-33页
     ·双链cDNA 的合成及纯化第33-34页
     ·cDNA-AFLP反应与程序第34-35页
     ·差异片段的聚丙烯酰胺凝胶回收与再扩增第35页
     ·再扩增产物琼脂糖凝胶回收第35页
     ·差异片段的克隆、转化与测序第35-36页
   ·结果与分析第36-40页
     ·糜子叶片对照及干旱胁迫下基因差异表达谱第36-39页
     ·部分差异条带的序列分析第39-40页
   ·讨论第40-42页
第三章 糜子干旱后复水抑制消减杂交文库的构建及文库质量检测第42-51页
   ·材料和方法第42-46页
     ·材料第42-43页
     ·总RNA提取及DNase I 处理第43页
     ·cDNA 文库的构建第43-45页
     ·消减杂交效率检测第45页
     ·PCR产物的克隆、转化与鉴定第45-46页
     ·质粒提取第46页
     ·质粒的 EcoRⅠ酶切鉴定第46页
   ·结果与分析第46-49页
     ·总 RNA 质量检测第46-47页
     ·cDNA 消减杂交和抑制性PCR 效果检测第47-48页
     ·消减杂交效率检测第48页
     ·阳性克隆的筛选与鉴定第48-49页
     ·阳性克隆的质粒及酶切检测第49页
   ·讨论第49-51页
第四章 糜子复水相关基因片段的生物信息学分析及表达谱的初步建立第51-67页
   ·材料和方法第51-52页
     ·材料第51页
     ·SSH 文库的构建与差异片段的获得第51页
     ·差异片段的序列测定第51-52页
     ·差异表达序列的生物信息学分析第52页
   ·结果与分析第52-64页
     ·序列测定第52-53页
     ·序列的重叠群分析及比对结果统计第53-54页
     ·RC 文库的序列比对结果分析第54-58页
     ·RS 文库的序列比对结果分析第58-62页
     ·两个复水相关文库的比较分析第62-64页
   ·讨论第64-67页
     ·关于复水文库的构建第64-65页
     ·干旱后复水的信号传导第65页
     ·功能基因在复水中的作用第65-66页
     ·细胞的防卫与保护机制第66页
     ·植物对环境胁迫的交叉适应第66-67页
第五章 部分差异片段的半定量 RT-PCR 验证第67-73页
   ·材料与方法第67-68页
     ·材料第67页
     ·糜子总RNA 的提取及痕量DNA 的去除第67页
     ·cDNA 第一链的合成第67页
     ·RT-PCR 所用引物、反应体系及程序第67-68页
   ·结果与分析第68-71页
     ·模板浓度的确定第68-69页
     ·不同基因的表达模式分析第69-71页
   ·讨论第71-73页
第六章 糜子抗逆相关基因全长cDNA 序列的克隆与结构分析第73-93页
   ·材料和方法第73-75页
     ·材料第73页
     ·糜子叶片 DNA 的提取第73-74页
     ·糜子叶片总 RNA 的提取第74页
     ·cDNA 第一链的合成第74页
     ·基因组PCR 或RT-PCR 引物序列及反应温度第74页
     ·基因组PCR 或RT-PCR 反应体系及程序第74页
     ·目的片段的克隆与测序第74-75页
     ·序列生物信息学分析软件及网站第75页
   ·结果与分析第75-90页
     ·糜子GTP 结合蛋白基因的克隆与分析第75-79页
     ·糜子 MYB 家族转录因子基因的克隆与分析第79-82页
     ·糜子 S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的克隆与分析第82-86页
     ·糜子 Suil 蛋白翻译因子的克隆与分析第86-88页
     ·糜子泛素家族蛋白基因的克隆与分析第88-90页
   ·讨论第90-93页
     ·GTP 结合蛋白在信号传导中的作用第90页
     ·MYB 家族转录因子第90-91页
     ·S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因第91页
     ·SUI1 翻译起始因子第91-92页
     ·泛素家族基因第92-93页
第七章 结论第93-95页
参考文献第95-107页
附录第107-108页
缩略词与英汉对照第108-110页
致谢第110-111页
作者简介第111页

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