| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-11页 |
| 2 文献综述 | 第11-30页 |
| 2．1 水稻穗颈伸长基因的相关研究及其发展 | 第11-14页 |
| 2．1．1 水稻长穗颈种质的发现 | 第11页 |
| 2．1．2 长穗颈基因eui的研究 | 第11-13页 |
| 2．1．3 长穗颈基因eui突变体生理研究 | 第13-14页 |
| 2．1．4 长穗颈基因eui种质的育种应用 | 第14页 |
| 2．2 水稻茎伸长与赤霉素的关系及伸长相关基因的研究 | 第14-17页 |
| 2．2．1 水稻颈伸长与赤霉素的关系 | 第14-15页 |
| 2．2．2 水稻茎伸长相关基因的克隆与研究 | 第15-17页 |
| 2．3 水稻转基因技术研究进展 | 第17-25页 |
| 2．3．1 水稻遗传转化方法的研究 | 第17-21页 |
| 2．3．2 水稻中农杆菌介导转化方法的应用 | 第21-22页 |
| 2．3．3 影响根癌农杆菌介导水稻转化的因素 | 第22-23页 |
| 2．3．4 选择标记和报告基因的研究 | 第23-25页 |
| 2．4 RNA干扰技术研究 | 第25-30页 |
| 2．4．1 RNA干扰技术及其应用 | 第25-27页 |
| 2．4．2 RNA干扰的作用机制 | 第27-30页 |
| 3 材料和方法 | 第30-38页 |
| 3．1 材料 | 第30-32页 |
| 3．2 方法 | 第32-38页 |
| 3．2．1 水稻穗颈伸长基因EUI2的克隆及cDNA序列分析 | 第32-33页 |
| 3．2．1．1 水稻穗颈总RNA的抽提和m RNA的纯化 | 第32页 |
| 3．2．1．2 cDNA第一链的合成 | 第32页 |
| 3．2．1．3 反转录样品之间cDNA量的比例确定 | 第32-33页 |
| 3．2．1．4 PCR扩增 | 第33页 |
| 3．2．1．5 PCR产物的回收酶切鉴定与克隆 | 第33页 |
| 3．2．1．6 DNA序列测定 | 第33页 |
| 3．2．2 水稻的遗传转化 | 第33-38页 |
| 3．2．2．1 质粒DNA的抽提 | 第33-34页 |
| 3．2．2．2 EUI2-ihpRNAi中间载体的构建 | 第34-35页 |
| 3．2．2．3 pCAMBIA1301-EUI2-ihpRNAi植物表达载体的构建 | 第35页 |
| 3．2．2．4 愈伤组织的诱导和继代 | 第35页 |
| 3．2．2．5 根癌农杆菌介导的水稻转化 | 第35-36页 |
| 3．2．2．6 抗性愈伤组织的筛选及植株再生 | 第36页 |
| 3．2．2．7 转基因植株的种植 | 第36页 |
| 3．2．2．8 转基因植株的GUS检测 | 第36页 |
| 3．2．2．9 水稻转化植株的分子鉴定 | 第36-38页 |
| 4 结果与分析 | 第38-46页 |
| 4．1 水稻穗颈伸长基因EUI2的克隆 | 第38-39页 |
| 4．2 水稻的遗传转化 | 第39-46页 |
| 4．2．1 EUI2-ihpRNAi中间载体的构建 | 第39-40页 |
| 4．2．2 pCAMBIA1301-EUI2-ihpRNAi植物表达载体的构建 | 第40-41页 |
| 4．2．3 双元载体系统的获得 | 第41页 |
| 4．2．4 转基因水稻的获得 | 第41-43页 |
| 4．2．5 转基因植株的潮霉素抗性基因(HPT)的PCR检测分析 | 第43页 |
| 4．2．6 转基因植株的GUS检测 | 第43-44页 |
| 4．2．7 T_0代转基因水稻的表型分析 | 第44-46页 |
| 5 讨论 | 第46-49页 |
| 5．1 RNA干扰的效率问题 | 第46页 |
| 5．2 水稻穗颈伸长基因EUI2的作用机理 | 第46-48页 |
| 5．3 EUI2基因的应用 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 附录A PCR产物的回收与克隆 | 第56-59页 |
| 附录B 水稻总RNA的提取与纯化 | 第59-61页 |
| 附录C 中花11号叶片基因组DNA的提取 | 第61-63页 |
| 个人简历 | 第63页 |
