河北省犊牛轮状病毒的分离鉴定及特性研究
| 1 引言 | 第1-13页 |
| ·牛轮状病毒的基本特性 | 第8-9页 |
| ·轮状病毒的分子生物学特性 | 第9-11页 |
| ·RV基因组的结构特征 | 第9页 |
| ·RV蛋白及其作用 | 第9-11页 |
| ·RV疫苗的研究进展及存在问题 | 第11-12页 |
| ·牛轮状病毒的检测方法 | 第12页 |
| ·本课题研究的目的意义 | 第12-13页 |
| 2 材料与方法 | 第13-23页 |
| ·病料、毒株与细胞 | 第13页 |
| ·所需主要试剂 | 第13-14页 |
| ·主要仪器 | 第14页 |
| ·试剂盒与细胞培养板 | 第14-15页 |
| ·轮状病毒的检测 | 第15页 |
| ·轮状病毒检测主要试剂的配制 | 第15页 |
| ·轮状病毒酶标诊断试剂盒对粪便中RV的检测 | 第15页 |
| ·轮状病毒酶标诊断试剂盒检测RV结果的计算方法 | 第15页 |
| ·病料、标准毒的处理 | 第15-16页 |
| ·病料的处理 | 第15页 |
| ·标准毒的处理 | 第15-16页 |
| ·细胞培养 | 第16-17页 |
| ·细胞培养所需主要试剂的配制 | 第16页 |
| ·细胞的传代 | 第16-17页 |
| ·病毒的接种 | 第17页 |
| ·病毒粒子的电镜观察 | 第17页 |
| ·病毒液的处理 | 第17页 |
| ·病毒粒子的电镜观察 | 第17页 |
| ·分离病毒的TCID_(50)测定 | 第17页 |
| ·双层法病毒蚀斑试验 | 第17-18页 |
| ·分离病毒的理化特性 | 第18页 |
| ·氯仿敏感性试验 | 第18页 |
| ·乙醚敏感性试验 | 第18页 |
| ·pH稳定性试验 | 第18页 |
| ·耐热性试验 | 第18页 |
| ·病毒基因组的聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第18-20页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳所需主要试剂的配制 | 第18-19页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第19-20页 |
| ·样品处理 | 第20页 |
| ·病毒RNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第20页 |
| ·RT-PCR检测 | 第20-23页 |
| ·RT-PCR检测所需主要试剂的配制 | 第20-21页 |
| ·引物的选择 | 第21页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第21页 |
| ·逆转录合成cDNA | 第21页 |
| ·PCR反应体系 | 第21-22页 |
| ·PCR反应条件 | 第22页 |
| ·RT-PCR产物鉴定 | 第22页 |
| ·RT-PCR鉴别轮状病毒的特异性 | 第22-23页 |
| 3 结果与分析 | 第23-29页 |
| ·轮状病毒酶标诊断试剂盒检测结果 | 第23页 |
| ·细胞培养结果 | 第23-25页 |
| ·病毒粒子的电镜观察结果 | 第25页 |
| ·病毒的TCID_(50)测定结果 | 第25-26页 |
| ·双层法病毒蚀斑试验结果 | 第26页 |
| ·分离病毒的理化特性结果 | 第26-27页 |
| ·病毒基因组的聚丙烯酰胺凝胶电泳结果 | 第27页 |
| ·RT-PCR检测结果 | 第27-28页 |
| ·RT-PCR鉴别轮状病毒特异性结果 | 第28-29页 |
| 4 讨论 | 第29-33页 |
| ·河北省犊牛轮状病毒感染情况调查分析 | 第29页 |
| ·病毒分离培养与传代 | 第29-30页 |
| ·病毒特性研究 | 第30-31页 |
| ·病毒基因组的聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第31页 |
| ·病毒基因组的提取与RT-PCR技术 | 第31-33页 |
| 5 结论 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-40页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第40-41页 |
| 作者简历 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42页 |
