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五个突变位点对大片段Taq DNA聚合酶聚合功能影响的研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-12页
1 前言第12-32页
   ·Taq DNA聚合酶结构和功能的研究进展第12-21页
     ·Taq DNA聚合酶的结构和作用机制第12-19页
     ·Taq DNA聚合酶性能的改进的研究进展第19-21页
   ·大片段DNA聚合酶的研究进展第21-26页
   ·Taq DNA聚合酶在遗传育种方面的研究进展第26-30页
     ·随机扩增多态性DNA技术(RAPD)第26-27页
     ·已标记序列扩增带技术(SCAR)第27页
     ·扩增片段长度多态性技术(AFLP)第27-29页
     ·简单序列重复技术(SSR)第29-30页
   ·本研究的目的和意义第30-32页
     ·选题背景和目的第30页
     ·研究的意义第30-32页
2 材料和方法第32-54页
   ·材料第32-33页
     ·携带大片段Taq DNA聚合酶的质粒第32页
     ·菌株和质粒第32页
     ·酶第32页
     ·主要反应试剂和试剂盒第32-33页
     ·实验仪器和分析软件第33页
   ·方法第33-54页
     ·克隆载体的构建第33-41页
     ·基因突变第41-44页
     ·LFTM5回复突变子的蛋白表达第44-54页
3 结果与分析第54-75页
   ·LFTM5的DNA和氨基酸序列第54-60页
   ·基因回复突变第60页
   ·蛋白表达第60-65页
   ·突变子的聚合功能测定第65-71页
   ·酶蛋白活性测定第71-75页
4 讨论第75-85页
   ·基因突变第75-76页
   ·蛋白表达与纯化第76-81页
   ·各突变位点对酶活性的影响评价第81-83页
     ·K230N,A383T,R399H和F492L对酶活性的影响第82页
     ·F389Y对酶活性的影响第82页
     ·不同突变位点对复制忠实性的影响第82-83页
   ·酶蛋白纯度和浓度对PCR的影响第83-85页
     ·蛋白纯度对酶活性的影响第83页
     ·酶蛋白纯度和浓度对PCR的影响第83-85页
5 结论第85-87页
   ·LFTM5具有聚合酶的结构特征但无聚合酶活性第85页
   ·各突变位点对酶的聚合活性具有的不同影响力第85页
   ·F389为聚合酶结构上关键功能位点第85页
   ·酶蛋白的纯度和浓度对PCR的影响第85页
   ·酶蛋白的纯度和浓度对pcR的影响第85-87页
参考文献第87-93页
附录第93-113页
致谢第113-114页
个人简历第114页

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