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超抗原SEA基因表达及其对禽流感灭活苗的免疫增强作用研究

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 引言第14-27页
   ·禽流感疫苗概述第14-19页
     ·全病毒灭活疫苗第14-15页
     ·亚单位疫苗第15-16页
     ·重组活载体疫苗第16-19页
     ·DNA 疫苗第19页
   ·佐剂的研究进展第19-22页
     ·疫苗递呈系统第19-20页
     ·免疫刺激性佐剂第20-21页
     ·粘膜免疫性佐剂第21-22页
   ·超抗原及金黄色葡萄球菌肠毒素 A 研究进展第22-26页
     ·超抗原免疫学背景第22-23页
     ·超抗原一般性质第23页
     ·超抗原的功能机制第23-24页
     ·超抗原活化细胞的类型第24页
     ·超抗原与疾病第24-25页
     ·超抗原临床价值第25-26页
   ·研究的目的和意义第26-27页
第二章 超抗原葡萄球菌肠毒素 A 原核表达及鉴定第27-34页
   ·实验材料第27-28页
     ·基因及载体第27页
     ·主要试剂第27-28页
   ·实验方法第28-30页
     ·SEA 基因片段的设计及合成第28页
     ·SEA 基因的克隆及鉴定第28页
     ·原核表达载体 pET-SEA 的构建第28页
     ·pET-SEA 的诱导表达条件的摸索第28页
     ·SDS-PAGE 分析 pET-SEA 的诱导表达产物第28-29页
     ·重组 SEA 的纯化第29页
     ·重组 SEA 蛋白脱盐、浓缩及定量第29页
     ·重组 SEA 体外淋巴细胞增殖实验第29-30页
     ·重组 SEA 的 western-blot 检测第30页
   ·实验结果第30-33页
     ·目的基因的设计第30页
     ·pET-SEA 质粒双酶切的鉴定结果第30-31页
     ·pET-SEA 质粒表达条件的优化结果第31页
     ·重组 SEA 蛋白 SDS-PAGE 分析结果第31页
     ·重组 SEA 蛋白体外刺激淋巴细胞增殖结果第31-32页
     ·重组 SEA 蛋白的 western-blot 鉴定结果第32-33页
   ·讨论第33-34页
第三章 重组 SEA 佐剂禽流感灭活苗在 SPF 鸡的免疫增强效果第34-43页
   ·实验材料第34页
     ·病毒及标准血清第34页
     ·SPF 鸡胚及 SPF 鸡第34页
     ·主要试剂及仪器第34页
   ·实验方法第34-37页
     ·重组 SEA 佐剂禽流感灭活苗的制备及安全性试验第34-35页
     ·试验动物分组、疫苗免疫及攻毒第35页
     ·免疫 SPF 鸡的 HI 抗体动态监测第35-36页
     ·双色法流式细胞术分选外周淋巴细胞第36页
     ·细胞因子的检测第36页
     ·SPF 鸡组织器官中重组 SEA 残留检测第36-37页
     ·拭子检测第37页
   ·实验结果第37-42页
     ·重组 SEA 佐剂 AIV 灭活苗的安全性试验第37页
     ·免疫 SPF 鸡的 HI 抗体检测结果第37-38页
     ·血清 IFN-γ及 IL-2 含量测定结果第38-39页
     ·SPF 鸡免疫后外周血淋巴细胞的检测结果第39-40页
     ·免疫 SPF 鸡组织器官内重组 SEA 残留检测结果第40页
     ·重组 SEA 最佳剂量第40页
     ·攻毒保护试验结果第40-42页
   ·讨论第42-43页
第四章 重组 SEA 佐剂禽流感灭活苗在肉鸡的免疫增强效果第43-48页
   ·实验材料第43页
     ·病毒及标准血清第43页
     ·SPF 鸡胚及肉鸡第43页
     ·主要试剂及仪器第43页
   ·试验方法第43-44页
     ·重组 SEA 佐剂 AIV 灭活苗的制备及其安全性试验第43-44页
     ·试验动物分组及疫苗免疫第44页
     ·免疫肉鸡的 HI 抗体动态监测第44页
     ·双色法流式细胞术分选外周淋巴细胞第44页
     ·肉鸡组织器官内重组 SEA 残留检测第44页
   ·实验结果第44-46页
     ·重组 SEA 佐剂 AIV 灭活苗安全性试验结果第44页
     ·免疫肉鸡的 HI 抗体检测结果第44-45页
     ·肉鸡免疫后外周淋巴细胞的检测结果第45页
     ·肉鸡组织器官内重组 SEA 残留检测结果第45-46页
   ·讨论第46-48页
第五章 重组 SEA 佐剂新城疫灭活苗在 SPF 鸡的免疫增强效果第48-52页
   ·实验材料第48页
     ·病毒及标准血清第48页
     ·SPF 鸡胚及 SPF 鸡第48页
   ·实验方法第48-49页
     ·重组 SEA 佐剂 NDV 灭活苗的制备及其安全性试验第48-49页
     ·试验动物分组及疫苗免疫第49页
     ·免疫 SPF 鸡的 HI 抗体动态监测第49页
     ·攻毒保护试验第49页
   ·实验结果第49-50页
     ·重组 SEA 佐剂 NDV 灭活苗安全性试验结果第49页
     ·免疫 SPF 鸡的 HI 抗体检测结果第49页
     ·攻毒保护试验结果第49-50页
   ·讨论第50-52页
第六章 全文结论第52-53页
参考文献第53-60页
致谢第60-62页
作者简介第62页

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