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可调控的烟草叶绿体转基因表达体系研究

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-9页
缩略语第9-10页
第一部分 可调控的烟草叶绿体表达体系研究第10-73页
 综述第10-29页
  1. 叶绿体遗传学特征与叶绿体转化特点第10-14页
  2. 高等植物叶绿体转化技术的现状第14-23页
  3. 叶绿体转化的应用第23-27页
  4. 叶绿体转化技术的局限和发展方向第27-29页
 材料与方法第29-47页
  1. 实验材料第29-32页
   1.1 植物材料第29页
   1.2 菌株和质粒第29页
   1.3 工具酶和分子生物学试剂第29页
   1.4 主要仪器第29页
   1.5 主要溶液和培养基第29-32页
  2. 实验方法第32-47页
   2.1 碱裂解法小量制备E.coli 质粒第32-33页
   2.2 PCR第33-34页
   2.3 DNA的琼脂糖凝胶电泳第34页
   2.4 DNA片段的回收第34-35页
   2.5 PCR产物的加A反应第35-36页
   2.6 酶切反应第36页
   2.7 连接反应第36页
   2.8 大肠杆菌感受态细胞的制备第36-37页
   2.9 E.coli的转化第37页
   2.10 甘油管的制备第37页
   2.11 BADH的原核表达第37-38页
   2.12 农杆菌感受态制备法第38页
   2.13 农杆菌的转化第38-39页
   2.14 根癌农杆菌-Ti质粒介导法转化烟草第39-40页
   2.15 烟草总 DNA提取步骤第40页
   2.16 烟草 RNA提取及 DNA的去除第40页
   2.17 RT-PCR(one step)第40-41页
   2.18 转基因烟草的 Southern-blot检测第41-43页
   2.19 烟草 Alc启动子启动 T7 RNA Polymerase的诱导第43页
   2.20 基因枪转化烟草叶绿体第43-47页
 结果与分析第47-73页
  1. 叶绿体表达载体的构建第47-57页
   1.1 BADH表达盒的构建第48-51页
   1.2 莴苣叶绿体转化表达载体pLGB和pLNB的构建第51-53页
   1.3 烟草叶绿体转化表达载体pTGB和 PTNB的构建第53-56页
   1.4 构建载体所用引物序列及位置第56-57页
  2. BADH基因的原核表达第57-58页
  3. T7 RNA聚合酶基因在烟草核中的表达第58-62页
  4. 以BADH 基因作为筛选标记基因对烟草叶绿体进行转化第62-70页
   4.1 甜菜碱醛筛选浓度的选择第62-63页
   4.2 用莴苣叶绿体转化表达载体pLGB和pLNB转化烟草叶绿体的结果第63-68页
   4.3 用烟草叶绿体转化表达载体 pTGB和 pTNB转化烟草叶绿体的结果第68-70页
   4.4 小结第70页
  5. 以aadA基因作为筛选标记基因对 T7 RNA聚合酶核转化烟草的叶绿体进行转化第70-72页
   5.1 Spe和 Str筛选浓度的确定第70-71页
   5.2 烟草叶绿体转化表达载体 pTCG对 T7 RNA聚合酶核转化烟草叶绿体的转化第71-72页
  6. 总结第72-73页
第二部分 甜菜碱醛对莴苣分化再生影响的研究第73-79页
 简介第73-74页
 材料与方法第74-75页
  1. 实验材料第74页
   1.1 植物材料第74页
   1.2 药品第74页
   1.3 培养基第74页
  2. 实验方法第74-75页
   2.1 种子的萌发第74页
   2.2 愈伤诱导与分化培养第74页
   2.3 再生植株的生根第74-75页
 结果与分析第75-79页
  1. 愈伤组织诱导第75页
  2. 愈伤组织的分化与再生第75-77页
  3. 分析与讨论第77-79页
参考文献第79-91页
在读期间发表的文章、专利及参与课题第91页
论文创新点第91-92页
致谢第92页

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