摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
英文缩略表 | 第12-14页 |
第一章 引言 | 第14-21页 |
·MDV 概述 | 第14-18页 |
·MDV 及其在疱疹病毒科的分类 | 第14页 |
·MDV 基因组和蛋白 | 第14-16页 |
·生物学特性及其感染机制 | 第16-17页 |
·MDV 疫苗 | 第17页 |
·人类疾病的模型 | 第17-18页 |
·NDV 概述 | 第18-19页 |
·ND 及 NDV 的历史 | 第18页 |
·NDV 形态学及其理化、生物学活性 | 第18-19页 |
·NDV 基因组及蛋白 | 第19页 |
·重组病毒研究现状 | 第19-20页 |
·本研究目的意义 | 第20-21页 |
第二章 表达 wF 基因的 rMDVs 的构建 | 第21-33页 |
·材料 | 第21-22页 |
·载体、基因工程菌株和病毒毒株 | 第21页 |
·主要仪器和试剂 | 第21-22页 |
·SPF 鸡胚 | 第22页 |
·方法 | 第22-26页 |
·引物设计与合成 | 第22页 |
·病毒基因扩增及表达载体构建 | 第22-23页 |
·重组病毒转移载体的构建及鉴定 | 第23页 |
·转移载体质粒的提取和纯化 | 第23-24页 |
·转染用 MDV 感染细胞总 DNA 的制备 | 第24页 |
·转移载体与总 DNA 共转染 CEF | 第24页 |
·重组病毒的筛选与纯化 | 第24页 |
·重组病毒的 PCR 鉴定 | 第24-25页 |
·间接免疫荧光检测(IFA) | 第25页 |
·wF 表达的 western blot 检测 | 第25页 |
·wF 基因的 southern blot 检测 | 第25页 |
·重组病毒生长特性的测定 | 第25-26页 |
·结果 | 第26-29页 |
·wF 基因及其真核表达载体的鉴定 | 第26页 |
·重组病毒转移载体的构建及鉴定 | 第26-27页 |
·重组病毒的 PCR 鉴定 | 第27页 |
·间接免疫荧光检测 | 第27-28页 |
·重组病毒中插入基因的 southern blot 检测 | 第28页 |
·重组病毒中插入基因的 western blot 检测 | 第28-29页 |
·重组病毒生长特性的测定 | 第29页 |
·讨论 | 第29-33页 |
·同源重组位点的选择 | 第29-30页 |
·表达载体构建 | 第30页 |
·真核细胞转染方法的比较 | 第30-31页 |
·gpt 筛选系统工作条件的优化 | 第31-32页 |
·加压筛选培养液的更换方法 | 第32-33页 |
第三章 表达 NDV oF 和 oF/oHN 基因的 rMDVs 构建 | 第33-41页 |
·材料 | 第33页 |
·载体、基因工程菌株和病毒毒株 | 第33页 |
·主要仪器和试剂 | 第33页 |
·方法 | 第33-36页 |
·引物设计与合成 | 第33-34页 |
·优化基因表达盒扩增及测序 | 第34页 |
·重组病毒转移载体的构建及鉴定 | 第34-35页 |
·转移载体质粒的提取和纯化 | 第35页 |
·转移载体与感染细胞总 DNA 共转染 CEF | 第35页 |
·重组病毒的筛选与纯化 | 第35页 |
·重组病毒的 PCR 鉴定 | 第35页 |
·间接免疫荧光检测(IFA) | 第35-36页 |
·外源基因表达的 western blot 检测 | 第36页 |
·外源基因的 southern blot 检测 | 第36页 |
·重组病毒生长特性的测定 | 第36页 |
·结果 | 第36-40页 |
·oF 及 oHN 表达盒扩增 | 第36-37页 |
·重组病毒转移载体的构建及鉴定 | 第37页 |
·重组病毒的 PCR 鉴定 | 第37-38页 |
·间接免疫荧光检测 | 第38页 |
·重组病毒中插入基因的 southern blot 检测 | 第38-39页 |
·重组病毒中插入基因的 western blot 检测 | 第39页 |
·重组病毒生长特性的测定 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
第四章 动物试验 | 第41-51页 |
·材料 | 第41-42页 |
·试验用 SPF 鸡和鸡胚 | 第41页 |
·病毒和疫苗 | 第41页 |
·试剂和仪器 | 第41-42页 |
·方法 | 第42-44页 |
·病毒培养和繁殖 | 第42页 |
·重组病毒 MDV 攻毒免疫保护性试验 | 第42-43页 |
·重组病毒针对 NDV 攻毒免疫保护性试验 | 第43-44页 |
·结果 | 第44-48页 |
·重组病毒免疫鸡群 MDV 攻毒试验 | 第44-45页 |
·重组病毒免疫鸡的 NDV 攻毒试验 | 第45-48页 |
·讨论 | 第48-51页 |
·MDV 攻毒保护试验 | 第48-49页 |
·NDV 攻毒免疫保护试验分析 | 第49-51页 |
第五章 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简历 | 第59页 |