| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词 | 第11-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-38页 |
| 第一章 生物体内的蛋白激酶及蛋白质磷酸化 | 第14-21页 |
| ·前言 | 第14页 |
| ·蛋白激酶的结构、生化特性及其和信号转导的关系 | 第14-16页 |
| ·蛋白质的可逆磷酸化和磷酸化位点 | 第16-18页 |
| ·植物蛋白激酶与逆境信号转导 | 第18-21页 |
| ·分裂原激活蛋白激酶 | 第18-19页 |
| ·受体蛋白激酶 | 第19-20页 |
| ·核糖体蛋白激酶 | 第20页 |
| ·转录调控蛋白激酶 | 第20-21页 |
| 第二章 CDPKs结构、生化性质、基因克隆及在钙信号转导中的作用 | 第21-38页 |
| ·引言 | 第21页 |
| ·CDPKs的结构 | 第21-22页 |
| ·CDPKs的生化性质 | 第22-30页 |
| ·CDPKs的底物和抑制剂 | 第22-24页 |
| ·CDPKs的活性调节 | 第24-25页 |
| ·CDPKs的豆蔻酰化和棕榈酰化 | 第25-27页 |
| ·CDPKs的同系物和特异性 | 第27-30页 |
| ·CDPKs的基因克隆 | 第30-32页 |
| ·CDPKs在植物Ca~(2+)信号转导中的作用 | 第32-35页 |
| ·参与碳氮代谢 | 第33页 |
| ·参与离子和水分的跨膜运输 | 第33页 |
| ·参与植物细胞骨架的调节 | 第33页 |
| ·调节气孔运动 | 第33-34页 |
| ·调节非生物胁迫信号转导途径 | 第34-35页 |
| ·调节激素反应 | 第35页 |
| ·调节病原菌防卫反应 | 第35页 |
| ·总结和展望 | 第35-36页 |
| ·本研究目的及意义 | 第36-38页 |
| ·蚕豆钙依赖蛋白激酶的基因克隆及功能分析 | 第36页 |
| ·玉米根液泡膜V-ATPase A亚基磷酸化位点的鉴定 | 第36-38页 |
| 第二部分 研究报告 | 第38-95页 |
| 第三章 蚕豆钙依赖蛋白激酶基因VfCPK的克隆及序列分析 | 第38-69页 |
| ·前言 | 第38页 |
| ·材料和方法 | 第38-47页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·RNA提取 | 第39-41页 |
| ·反转录 | 第41页 |
| ·中间片断的扩增 | 第41-44页 |
| ·RACE | 第44-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-64页 |
| ·中间片断的扩增及序列分析 | 第47-51页 |
| ·VfCPK1克隆及序列分析 | 第51-60页 |
| ·VfCPK2克隆及序列分析 | 第60-64页 |
| ·VfCPK1与VfCPK2的同源性比较分析 | 第64页 |
| ·讨论 | 第64-69页 |
| ·植物基因的克隆及引物设计 | 第64-66页 |
| ·蚕豆中CDPKs是由多基因家族编码的 | 第66页 |
| ·VfCPK1具有CDPKs的所有典型特征 | 第66-67页 |
| ·VfCPK2为部分CDPK序列 | 第67-69页 |
| 第四章 蚕豆钙依赖蛋白激酶基因VfCPK1的表达分析 | 第69-85页 |
| ·前言 | 第69页 |
| ·材料与方法 | 第69-76页 |
| ·材料 | 第69-70页 |
| ·Northern blottin | 第70-73页 |
| ·VfCPK1的抗原表位片段15肽的合成及抗血清制备 | 第73-74页 |
| ·Western blotting | 第74-76页 |
| ·结果与分析 | 第76-82页 |
| ·VfCPK1在转录水平的表达分析 | 第76-79页 |
| ·VfCPK1的15肽抗体的制备及效价分析 | 第79-81页 |
| ·VfCPK1在蛋白质水平的表达分析 | 第81-82页 |
| ·讨论 | 第82-85页 |
| ·VfCPK1在蚕豆不同部位的表达 | 第82-83页 |
| ·Ca~(2+)激活VfCPK1的表达 | 第83页 |
| ·VfCPK1参与渗透胁迫信号转导 | 第83页 |
| ·VfCPK1推测的作用底物 | 第83-85页 |
| 第五章 玉米根液泡膜H~+-ATPase A亚基磷酸化位点的鉴定 | 第85-94页 |
| ·前言 | 第85页 |
| ·材料和方法 | 第85-87页 |
| ·材料 | 第85-86页 |
| ·玉米根液泡膜的制备及纯度鉴定 | 第86页 |
| ·膜蛋白的磷酸化和脱磷酸化反应 | 第86页 |
| ·Ⅴ型H~+-ATPase质子转运活性及ATP水解活性的测定 | 第86页 |
| ·液泡膜蛋白的硫代磷酸化及荧光标记 | 第86-87页 |
| ·蛋白含量测定和Western blotting | 第87页 |
| ·V-ATPase A亚基的胰蛋白酶消化 | 第87页 |
| ·胰蛋白酶解A亚基片段的RP-HPLC分离 | 第87页 |
| ·用质谱分析测定硫代磷酸化荧光标记肽的分子量 | 第87页 |
| ·结果与分析 | 第87-91页 |
| ·磷酸化和脱磷酸化作用对玉米根V-ATPase活性的影响 | 第87-88页 |
| ·液泡膜蛋白的硫代磷酸化和A亚基的Western blotting | 第88-89页 |
| ·A亚基的胰蛋白酶解片段中的荧光标记肽的鉴定及质谱分析 | 第89-90页 |
| ·V-ATPase的A亚基磷酸化位点的分析 | 第90-91页 |
| ·讨论 | 第91-94页 |
| ·磷酸化作用对玉米根V-ATPase活性的调节 | 第91-92页 |
| ·玉米根V-ATPase的A亚基可被磷酸化 | 第92页 |
| ·玉米根V-ATPase的A亚基磷酸化位点在其C末端 | 第92-93页 |
| ·玉米根V-ATPase的A亚基可能是由CDPK磷酸化的 | 第93-94页 |
| 第六章 结论与建议 | 第94-95页 |
| ·主要结论 | 第94页 |
| ·主要创新点 | 第94页 |
| ·建议 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-108页 |
| 附录 | 第108-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| 个人简介 | 第112页 |
