中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
1 文献综述-植物抗病基因研究进展 | 第10-34页 |
·植物抗病基因的克隆 | 第10-18页 |
·图位克隆法 | 第11-14页 |
·分子标记遗传连锁图 | 第12页 |
·目标基因的精细定位 | 第12-13页 |
·构建目标基因区域物理图谱 | 第13页 |
·确定候选基因 | 第13页 |
·验证候选基因的功能 | 第13-14页 |
·转座子标签法 | 第14页 |
·同源序列法 | 第14-15页 |
·不同方法联合,优势互补 | 第15页 |
·已经克隆的植物抗病基因 | 第15-18页 |
·抗病基因保守结构及其相应的功能 | 第18-22页 |
·LRR的结构和功能 | 第18-20页 |
·NBS结构和功能 | 第20页 |
·TIR结构和功能 | 第20-21页 |
·受体激酶 | 第21-22页 |
·抗病基因表达方式 | 第22-23页 |
·选择性剪切 | 第22页 |
·组成型表达 | 第22-23页 |
·诱导型表达 | 第23页 |
·抗病基因进化 | 第23-25页 |
·抗病基因成簇分布 | 第23-24页 |
·抗病基因进化模型 | 第24-25页 |
·信号途径 | 第25-28页 |
·抗病基因介导的抗性反应机制 | 第25-26页 |
·抗病基因引发的抗病反应途径 | 第26-27页 |
·抗病反应和蛋白降解 | 第27-28页 |
·抗病基因的应用 | 第28-31页 |
·利用广谱抗性 | 第28-29页 |
·持久抗性 | 第29-30页 |
·非寄主抗性 | 第30-31页 |
·水稻白叶枯研究 | 第31-34页 |
·水稻白叶枯病 | 第31-32页 |
·水稻白叶枯病抗性基因的定位 | 第32页 |
·水稻白叶枯病抗性基因的克隆 | 第32页 |
·应用抗白叶枯病基因进行抗性育种 | 第32-34页 |
2 研究目的和意义 | 第34-35页 |
3 材料与方法 | 第35-39页 |
·实验材料 | 第35-36页 |
·实验材料及分析群体 | 第35-36页 |
·水稻白叶枯病菌菌株 | 第36页 |
·分子标记种类及来源 | 第36页 |
·克隆载体 | 第36页 |
·BAC文库 | 第36页 |
·方法 | 第36-39页 |
·白叶枯病抗性鉴定 | 第36-37页 |
·RFLP分析 | 第37页 |
·DNA的提取 | 第37页 |
·DNA浓度的测定及调整 | 第37页 |
·DNA的酶切、电泳及转膜 | 第37页 |
·Southern杂交 | 第37页 |
·群体重组单株筛选 | 第37页 |
·侯选基因的表达分析 | 第37-38页 |
·TA-克隆测序 | 第38页 |
·序列的比较 | 第38页 |
·序列分析 | 第38页 |
·转化克隆构建及BAC亚克隆 | 第38页 |
·农杆菌介导的遗传转化 | 第38-39页 |
4 结果与分析 | 第39-65页 |
·目标基因遗传定位 | 第39-41页 |
·目标基因Xa22(t)区域的标记 | 第39页 |
·两个侧翼SSR标记RM144和RM224混合扩增 | 第39-40页 |
·利用RM144和RM224筛选重组单株 | 第40-41页 |
·目标基因物理定位 | 第41-45页 |
·目标基因区域重组事件分析 | 第41-43页 |
·目标基因的定位克隆为M3H8 | 第43-44页 |
·目标基因区域比较复杂 | 第44-45页 |
·确定Xa22(t)的候选基因 | 第45-57页 |
·定位克隆M3H8的研究基础 | 第45-48页 |
·候选基因的RT-PCR表达分析 | 第48-51页 |
·Xa26的RT-PCR表达分析 | 第48-50页 |
·Xa26相邻区段的表达分析 | 第50-51页 |
·目标基因区域的表达分析 | 第51页 |
·等位酶切法克隆Xa22(t)的候选基因 | 第51-54页 |
·克隆包含Xa26的19-kb片段 | 第51-52页 |
·克隆包含LRR结构的片段 | 第52-53页 |
·克隆LRR-Kinase片段 | 第53-54页 |
·克隆含有NBS结构的80I12-2 | 第54-57页 |
·亚克隆80I12-2具NBS结构 | 第54页 |
·目标基因Xa22(t)区域可能与NBS有关 | 第54-55页 |
·定位克隆M3H8含NBS结构 | 第55-56页 |
·80112-2的NBS的表达分析 | 第56页 |
·含有NBS结构的80I12-2的克隆流程 | 第56-57页 |
·遗传转化Xa22(t)的候选基因 | 第57-60页 |
·构建pCAMBLA1301转化克隆 | 第57页 |
·转化植株阳性鉴定 | 第57-59页 |
·转化阳性植株抗性鉴定 | 第59-60页 |
·目标基因区域抗病基因同源序列分析 | 第60-65页 |
·Xa26同测序品种的序列比较分析 | 第60-62页 |
·目标基因区域抗病基因同源序列进化分析 | 第62-65页 |
5 讨论 | 第65-72页 |
·基因组测序后的基因克隆 | 第65-66页 |
·Xa22(t)区域几个基因紧密连锁 | 第66-68页 |
·扎昌龙表现广谱抗性 | 第68-69页 |
·Xa22(t)区域抗病基因保守结构的进化 | 第69-70页 |
·Xa22(t)区域今后的工作 | 第70-72页 |
6 参考文献 | 第72-86页 |
7 个人简历及发表的文章: | 第86-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
附录Ⅰ | 第88-96页 |
附录Ⅱ | 第96-97页 |