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水稻白叶枯病抗性基因Xa22(t)的克隆

中文摘要第1-8页
Abstract第8-10页
1 文献综述-植物抗病基因研究进展第10-34页
   ·植物抗病基因的克隆第10-18页
     ·图位克隆法第11-14页
       ·分子标记遗传连锁图第12页
       ·目标基因的精细定位第12-13页
       ·构建目标基因区域物理图谱第13页
       ·确定候选基因第13页
       ·验证候选基因的功能第13-14页
     ·转座子标签法第14页
     ·同源序列法第14-15页
     ·不同方法联合,优势互补第15页
     ·已经克隆的植物抗病基因第15-18页
   ·抗病基因保守结构及其相应的功能第18-22页
     ·LRR的结构和功能第18-20页
     ·NBS结构和功能第20页
     ·TIR结构和功能第20-21页
     ·受体激酶第21-22页
   ·抗病基因表达方式第22-23页
     ·选择性剪切第22页
     ·组成型表达第22-23页
     ·诱导型表达第23页
   ·抗病基因进化第23-25页
     ·抗病基因成簇分布第23-24页
     ·抗病基因进化模型第24-25页
   ·信号途径第25-28页
     ·抗病基因介导的抗性反应机制第25-26页
     ·抗病基因引发的抗病反应途径第26-27页
     ·抗病反应和蛋白降解第27-28页
   ·抗病基因的应用第28-31页
     ·利用广谱抗性第28-29页
     ·持久抗性第29-30页
     ·非寄主抗性第30-31页
   ·水稻白叶枯研究第31-34页
     ·水稻白叶枯病第31-32页
     ·水稻白叶枯病抗性基因的定位第32页
     ·水稻白叶枯病抗性基因的克隆第32页
     ·应用抗白叶枯病基因进行抗性育种第32-34页
2 研究目的和意义第34-35页
3 材料与方法第35-39页
   ·实验材料第35-36页
     ·实验材料及分析群体第35-36页
     ·水稻白叶枯病菌菌株第36页
     ·分子标记种类及来源第36页
     ·克隆载体第36页
     ·BAC文库第36页
   ·方法第36-39页
     ·白叶枯病抗性鉴定第36-37页
     ·RFLP分析第37页
       ·DNA的提取第37页
       ·DNA浓度的测定及调整第37页
       ·DNA的酶切、电泳及转膜第37页
       ·Southern杂交第37页
     ·群体重组单株筛选第37页
     ·侯选基因的表达分析第37-38页
     ·TA-克隆测序第38页
     ·序列的比较第38页
     ·序列分析第38页
     ·转化克隆构建及BAC亚克隆第38页
     ·农杆菌介导的遗传转化第38-39页
4 结果与分析第39-65页
   ·目标基因遗传定位第39-41页
     ·目标基因Xa22(t)区域的标记第39页
     ·两个侧翼SSR标记RM144和RM224混合扩增第39-40页
     ·利用RM144和RM224筛选重组单株第40-41页
   ·目标基因物理定位第41-45页
     ·目标基因区域重组事件分析第41-43页
     ·目标基因的定位克隆为M3H8第43-44页
     ·目标基因区域比较复杂第44-45页
   ·确定Xa22(t)的候选基因第45-57页
     ·定位克隆M3H8的研究基础第45-48页
     ·候选基因的RT-PCR表达分析第48-51页
       ·Xa26的RT-PCR表达分析第48-50页
       ·Xa26相邻区段的表达分析第50-51页
       ·目标基因区域的表达分析第51页
     ·等位酶切法克隆Xa22(t)的候选基因第51-54页
       ·克隆包含Xa26的19-kb片段第51-52页
       ·克隆包含LRR结构的片段第52-53页
       ·克隆LRR-Kinase片段第53-54页
     ·克隆含有NBS结构的80I12-2第54-57页
       ·亚克隆80I12-2具NBS结构第54页
       ·目标基因Xa22(t)区域可能与NBS有关第54-55页
       ·定位克隆M3H8含NBS结构第55-56页
       ·80112-2的NBS的表达分析第56页
       ·含有NBS结构的80I12-2的克隆流程第56-57页
   ·遗传转化Xa22(t)的候选基因第57-60页
     ·构建pCAMBLA1301转化克隆第57页
     ·转化植株阳性鉴定第57-59页
     ·转化阳性植株抗性鉴定第59-60页
   ·目标基因区域抗病基因同源序列分析第60-65页
     ·Xa26同测序品种的序列比较分析第60-62页
     ·目标基因区域抗病基因同源序列进化分析第62-65页
5 讨论第65-72页
   ·基因组测序后的基因克隆第65-66页
   ·Xa22(t)区域几个基因紧密连锁第66-68页
   ·扎昌龙表现广谱抗性第68-69页
   ·Xa22(t)区域抗病基因保守结构的进化第69-70页
   ·Xa22(t)区域今后的工作第70-72页
6 参考文献第72-86页
7 个人简历及发表的文章:第86-87页
致谢第87-88页
附录Ⅰ第88-96页
附录Ⅱ第96-97页

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