| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-23页 |
| 1 棉花纤维品质改良的基因工程 | 第11-16页 |
| ·棉花品质方面的改良 | 第11-12页 |
| ·色泽改良 | 第11-12页 |
| ·纤维品质的改良 | 第12页 |
| ·棉花纤维品质改良的思路 | 第12-16页 |
| ·传统棉花纤维改良法 | 第12-13页 |
| ·棉纤维发育特异启动子 | 第13页 |
| ·棉纤维特异表达基因 | 第13-15页 |
| ·棉纤维发育相关基因 | 第15-16页 |
| 2 棉花遗传转化方法 | 第16-18页 |
| ·农杆菌介导的载体法 | 第16-17页 |
| ·花粉管通道法 | 第17-18页 |
| ·基因枪转化法 | 第18页 |
| 3 棉花组培及农杆菌介导棉花基因转化的影响因素 | 第18-21页 |
| ·植物基因型 | 第19页 |
| ·外植体来源 | 第19-20页 |
| ·生理状态 | 第20页 |
| ·外植体预培养 | 第20页 |
| ·药物选择及药物筛选压力的选择 | 第20-21页 |
| 4 本实验研究目的和立题依据 | 第21-23页 |
| 第二章 材料和方法 | 第23-31页 |
| 1 材料 | 第23-26页 |
| ·目的基因 | 第23页 |
| ·供试材料 | 第23页 |
| ·根癌农杆菌及质粒PBinEXN | 第23-24页 |
| ·实验所用主要试剂 | 第24-25页 |
| ·培养基的选用与培养条件 | 第25-26页 |
| ·细菌培养基 | 第25页 |
| ·植物培养基 | 第25-26页 |
| 2 方法 | 第26-29页 |
| ·DNA转化技术 | 第26-28页 |
| ·制备中间载体--Expansin转化大肠杆菌E.coliDH5 α | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌E.coliDH5 α感受态的制备 | 第26页 |
| ·Expansin转化大肠杆菌E.coliDH5 α | 第26页 |
| ·质粒的提取和检测 | 第26-27页 |
| ·中间载体转化根癌农杆菌EHA105 | 第27-28页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第27页 |
| ·中间载体转农杆菌 | 第27页 |
| ·检测 | 第27-28页 |
| ·棉花无菌苗的培养 | 第28页 |
| ·农杆菌的培养及活化 | 第28页 |
| ·茎尖的剥离和外植体的侵染 | 第28页 |
| ·共培养 | 第28页 |
| ·选择培养与壮苗 | 第28-29页 |
| ·生根培养 | 第29页 |
| 3 筛选优化因素的几个处理 | 第29-31页 |
| ·组培因素的优化筛选 | 第29页 |
| ·筛选激动素(KT)浓度的处理 | 第29页 |
| ·筛选卡那霉素(Kan)浓度的处理 | 第29页 |
| ·转化因素的优化筛选 | 第29-30页 |
| ·农杆菌最佳侵染浓度的筛选: | 第29-30页 |
| ·转化用的茎尖外植体最佳苗龄的筛选 | 第30页 |
| ·真空渗透处理 | 第30-31页 |
| ·真空处理的影响 | 第30页 |
| ·真空处理适宜时间的筛选 | 第30-31页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第31-40页 |
| 1 质粒的提取和检测 | 第31页 |
| ·大肠杆菌中的质粒检测 | 第31页 |
| ·农杆菌中的质粒检测 | 第31页 |
| 2 棉花组培和转化体系优化 | 第31-40页 |
| ·棉花无菌苗的制备 | 第31-32页 |
| ·外界物理条件对组培苗生长的影响 | 第32页 |
| ·不同浓度激动素(KT)对棉花茎尖成苗的影响 | 第32-33页 |
| ·卡那霉素(Kan)浓度对棉花茎尖组培苗生长的影响 | 第33-34页 |
| ·不同浓度的农杆菌侵染对棉花转化率的影响 | 第34-35页 |
| ·外植体的生理状态对棉花茎尖转化的影响 | 第35-36页 |
| ·真空渗透处理 | 第36-40页 |
| ·真空渗透处理对转化的影响 | 第36-37页 |
| ·真空处理适宜时间的筛选 | 第37-40页 |
| 第四章 讨论 | 第40-46页 |
| 1 茎尖转化受体系统的特点 | 第40-41页 |
| 2 基因型与转化各因子的关系 | 第41页 |
| 3 活性炭和KT对棉花茎尖培养效果的影响 | 第41-42页 |
| 4 抗生素Kan的作用、最高选择压的确定和梯度选择方法 | 第42-43页 |
| 5 棉酚对棉花茎尖培养和转化的影响 | 第43-44页 |
| 6 外植体的生理状态对茎尖转化的影响 | 第44-45页 |
| 7 真空辅助处理和茎尖创伤方式对转化后抗性绿苗率的影响 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
