| 摘要 | 第1-12页 |
| 前言 | 第12-19页 |
| 第1章 卤虫在对虾白斑综合症病毒传播感染中的作用 | 第19-29页 |
| 概述 | 第20-21页 |
| 1 前言 | 第21-23页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的宿主广泛性概述 | 第21-22页 |
| ·卤虫感染白斑综合症病毒研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-25页 |
| ·材料 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-25页 |
| ·卤虫的饲养 | 第23-24页 |
| ·卤虫的人工感染 | 第24-25页 |
| ·白斑综合症病毒的检测 | 第25页 |
| 3 结果与讨论 | 第25-29页 |
| ·卤虫投喂病毒感染死亡率统计 | 第25-27页 |
| ·白斑综合症病毒在卤虫中的横向和纵向传播 | 第27-29页 |
| 第2章 对虾白斑综合症病毒胶原蛋白的鉴定 | 第29-56页 |
| 概述 | 第30-31页 |
| 1 前言 | 第31-38页 |
| ·胶原蛋白概述 | 第31-35页 |
| ·胶原蛋白的种类 | 第32-34页 |
| ·胶原蛋白的结构和生物学功能特点 | 第34-35页 |
| ·类胶原蛋白 | 第35-36页 |
| ·类胶原蛋白定义 | 第35页 |
| ·类胶原蛋白在结构和功能上与胶原蛋白的差别 | 第35-36页 |
| ·类胶原片段 | 第36页 |
| ·类胶原片段定义 | 第36页 |
| ·类胶原片段的功能及存在范围 | 第36页 |
| ·病毒膜蛋白 | 第36-38页 |
| ·结构性质和主要功能域 | 第37-38页 |
| ·病毒膜蛋白与某些胶原蛋白在结构上的相似性 | 第38页 |
| 2 材料与方法 | 第38-43页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·引物 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-43页 |
| ·螯虾感染 | 第39页 |
| ·感染螯虾总mRNA的提取 | 第39页 |
| ·感染螯虾总RNA的提取 | 第39页 |
| ·白斑综合症病毒类胶原蛋白结构的计算机辅助分析 | 第39-40页 |
| ·RT-PCR | 第40页 |
| ·Northern blot | 第40页 |
| ·类胶原蛋白基因在大肠杆菌(E.coli.)中的克隆表达 | 第40页 |
| ·核衣壳病毒和有包膜病毒的纯化分离 | 第40页 |
| ·抗体IgG制备 | 第40-41页 |
| ·Western blot | 第41页 |
| ·特异抗体制备及免疫定位技术 | 第41-42页 |
| ·免疫亲和层析柱纯化天然病毒类胶原蛋白 | 第42-43页 |
| ·病毒类胶原蛋白糖基化特点分析 | 第43页 |
| 3 结果与讨论 | 第43-56页 |
| ·白斑综合症病毒类胶原蛋白一级结构分析 | 第43-46页 |
| ·白斑综合症病毒类胶原蛋白基因转录水平分析 | 第46-49页 |
| ·白斑综合症病毒类胶原蛋白N末端肽的表达纯化 | 第49-52页 |
| ·抗体制备 | 第52页 |
| ·白斑综合症病毒类胶原蛋白的免疫定位 | 第52-53页 |
| ·天然病毒CLP蛋白的免疫亲和纯化和糖基化分析 | 第53-56页 |
| 第3章 对虾白斑综合症病毒中胸腺嘧啶核苷酸合成酶的鉴定 | 第56-73页 |
| 概述 | 第57-58页 |
| 1 前言 | 第58-63页 |
| ·胸腺嘧啶核苷酸合成酶概述 | 第58-63页 |
| ·胸腺嘧啶核苷酸合成酶的生物学功能 | 第59-60页 |
| ·胸腺嘧啶核苷酸合成酶在抗肿瘤研究中的应用 | 第60-61页 |
| ·胸腺嘧啶核苷酸合成酶的主要功能域 | 第61-63页 |
| ·胸腺嘧啶核苷酸合成酶研究现状及展望 | 第63页 |
| 2 材料与方法 | 第63-65页 |
| ·材料 | 第63-64页 |
| ·引物 | 第64页 |
| ·方法 | 第64-65页 |
| ·计算机辅助分析 | 第64页 |
| ·RT-PCR | 第64页 |
| ·5＇／3′-RACE | 第64页 |
| ·白斑综合症病毒胸腺嘧啶核苷酸合成酶的克隆表达 | 第64页 |
| ·５ TS底物结合性质的鉴定 | 第64-65页 |
| 3 结果与讨论 | 第65-73页 |
| ·白斑综合症病毒胸腺嘧啶核苷酸合成酶的一级结构 | 第65-66页 |
| ·白斑综合症病毒胸腺嘧啶核苷酸合成酶进化树分析 | 第66-69页 |
| ·白斑综合症病毒胸腺嘧啶核苷酸合成酶基因转录水平分析 | 第69-70页 |
| ·白斑综合症病毒胸腺嘧啶核苷酸合成酶底物结合实验 | 第70-73页 |
| 第4章 病毒同源重复区特异DNA结合蛋白的纯化鉴定 | 第73-95页 |
| 概述 | 第74-76页 |
| 1 前言 | 第76-83页 |
| ·白斑综合症病毒基因组内多拷贝重复片段 | 第76-78页 |
| ·基因组DNA序列重复性特征 | 第76页 |
| ·白斑综合症病毒中重复序列特征 | 第76-78页 |
| ·DNA结合蛋白 | 第78-79页 |
| ·特异性DNA结合蛋白的纯化 | 第79-83页 |
| ·经典亲和层析法 | 第79-81页 |
| ·改进的亲和层析纯化技术 | 第81-82页 |
| ·凝胶迁移率分析 | 第82-83页 |
| 2 材料与方法 | 第83-86页 |
| ·引物 | 第83页 |
| ·溶液配制 | 第83-84页 |
| ·方法 | 第84-86页 |
| ·探针灵敏度检测 | 第84页 |
| ·蛋白探针结合反应 | 第84页 |
| ·分子筛CM-sepharose 6B分离纯化酶切产物小片段 | 第84-85页 |
| ·蛋白粗提物(Crude Extracts)样品的制备 | 第85页 |
| ·亲和层析法纯化特异DNA结合蛋白 | 第85-86页 |
| ·结合蛋白凝胶迁移率分析 | 第86页 |
| 3 结果与讨论 | 第86-95页 |
| ·病毒基因组重复序列计算机辅助分析 | 第86-87页 |
| ·亲和层析配体的制备 | 第87-88页 |
| ·含HCD-158片段的克隆 | 第87-88页 |
| ·分子筛纯化亲和配体 | 第88页 |
| ·亲和层析蛋白样品的选择 | 第88-89页 |
| ·亲和层析纯化特异DNA结合蛋白 | 第89-91页 |
| ·凝胶阻滞反应鉴定纯化的特异性DNA结合蛋白 | 第91-94页 |
| ·GMSA分析 | 第91-92页 |
| ·健康虾与感染虾亲和纯化洗脱产物比较 | 第92-93页 |
| ·特异性结合位点的确定 | 第93-94页 |
| ·肽指纹图谱分析 | 第94-95页 |
| 全文结论与展望 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-107页 |
| 附录 | 第107-117页 |
| 附录1. 常规实验方法 | 第107-113页 |
| 附录2. 常规试剂和溶液 | 第113-117页 |
| 博士在学期间发表与待发表文章 | 第117-118页 |
| 致谢 | 第118页 |
