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利用基因工程技术培育抗白叶枯病和抗螟虫的水稻种质材料

英文缩略表第1-7页
中文摘要第7-8页
综述部分第8-22页
 1. 引言第8页
 2. 水稻抗白叶枯病育种第8-13页
  2.1 水稻白叶枯病与抗病育种第8-10页
  2.2 Xa21与水稻抗白叶枯病育种第10-13页
 3. 水稻抗螟虫育种第13-16页
  3.1 水稻抗虫基因工程第13页
  3.2 Bt基因与水稻抗虫基因工程第13-16页
 4. 水稻基因工程第16-21页
  4.1 水稻遗传转化中常用的选择标记基因第16页
  4.2 水稻遗传转化方法第16-18页
   4.2.1 PEG介导的转化方法第16页
   4.2.2 花粉管通道法第16页
   4.2.3 基因枪法第16-17页
   4.2.4 农杆菌介导转化法第17-18页
  4.3 转基因的表达第18-21页
   4.3.1 转基因沉默第19-20页
   4.3.2 无标记基因的转基因植株第20-21页
 5. 培育多抗的水稻种质材料第21-22页
  5.1 同时转多个基因于植物受体材料第21页
  5.2 培育多抗的水稻种质材料第21-22页
研究论文第22-57页
 1. 研究的目的和意义第22-23页
 2. 材料与方法第23-34页
  2.1 材料第23-25页
   2.1.1 植物材料第23页
   2.1.2 转化受体第23页
   2.1.3 菌株和质粒第23-24页
   2.1.4 病原菌小种第24页
   2.1.5 培养基第24-25页
   2.1.6 酶及试剂盒第25页
  2.2 方法第25-34页
   2.2.1 农杆菌转化水稻基本方法第25-26页
    2.2.1.1 幼胚预培养第25页
    2.2.1.2 胚性愈伤组织的诱导第25页
    2.2.1.3 农杆菌预处理第25页
    2.2.1.4 幼胚转化第25-26页
    2.2.1.5 愈伤组织转化第26页
    2.2.1.6 抗性愈伤组织的选择第26页
    2.2.1.7 抗性愈伤组织的分化第26页
    2.2.1.8 生根和移苗第26页
   2.2.2 愈伤组织诱导条件和农杆菌转化体系的优化第26-27页
    2.2.2.1 2,4-D对愈伤组织诱导的影响第26页
    2.2.2.2 As对转化效率的影响第26页
    2.2.2.3 农杆菌菌株对转化效率的影响第26页
    2.2.2.4 菌液浓度对转化效率的影响第26页
    2.2.2.5 受体材料对转化效率的影响第26页
    2.2.2.6 水稻基因型对转化效率的影响第26-27页
    2.2.2.7 激素配比对抗性愈伤组织分化的影响第27页
    2.2.2.8 干燥处理对抗性愈伤组织分化的影响第27页
    2.2.2.9 琼脂浓度对抗性愈伤组织分化的影响第27页
    2.2.2.10 高渗处理对抗性愈伤组织分化的影响第27页
   2.2.3 转基因水稻的检测第27-34页
    2.2.3.1 组织化学检测第27-28页
    2.2.3.2 PCR检测第28-30页
     2.2.3.2.1 质粒DNA的大量提取第28-29页
     2.2.3.2.2 植物总DNA的提取第29页
     2.2.3.2.3 PCR反应引物第29页
     2.2.3.2.4 PCR反应体系和条件第29-30页
    2.2.3.3 Southern Blot分析第30-33页
     2.2.3.3.1 质粒提取第30页
     2.2.3.3.2 植物总DNA提取第30页
     2.2.3.3.3 植物总DNA酶切、电泳和转膜第30-32页
     2.2.3.3.4 探针的制备第32-33页
     2.2.3.3.5 Southern Blot杂交第33页
    2.2.3.4 抗性检测第33-34页
     2.2.3.4.1 抗病性测定第33页
     2.2.3.4.2 抗虫性测定第33-34页
 3. 结果与分析第34-52页
  3.1 愈伤组织诱导第34-36页
   3.1.1 愈伤组织分型第34页
   3.1.2 2,4-D浓度对愈伤组织诱导的影响第34-35页
   3.1.3 培养基对愈伤组织诱导的影响第35-36页
  3.2 转化体系的优化第36-38页
   3.2.1 As对转化效率的影响第36页
   3.2.2 农杆菌菌株对转化效率的影响第36-37页
   3.2.3 菌液浓度对转化效率的影响第37页
   3.2.4 转化受体对转化效率的影响第37-38页
  3.3 抗性愈伤组织的选择和再生第38-41页
   3.3.1 激素配比对抗性愈伤组织分化的影响第38-39页
   3.3.2 琼脂浓度对抗性愈伤组织分化的影响第39-40页
   3.3.3 干燥处理对抗性愈伤组织分化的影响第40页
   3.3.4 高渗处理对抗性愈伤组织分化的影响第40-41页
   3.3.5 多效唑对生根的影响第41页
  3.4 转基因TO代植株的检测第41-50页
   3.4.1 转基因植株的获得第41页
   3.4.2 Gus染色检测第41-42页
   3.4.3 PCR检测第42页
   3.4.4 Southern Blot分析第42-50页
    3.4.4.1 水稻总DNA的提取同3.4.3.1第42-43页
    3.4.4.2 限制性内切酶酶切位点的鉴定第43-45页
    3.4.4.3 水稻总DNA的酶切第45页
    3.4.4.4 探针的制备第45-46页
    3.4.4.5 Southern Blot杂交分析第46-50页
     3.4.4.5.1 Xa21转基因水稻植株的杂交第46-48页
     3.4.4.5.2 Bt转基因水稻植株的杂交第48-50页
  3.5 T1代Bt转基因水稻二化螟抗性的室内测定第50页
  3.6 T1代Xa21转基因植株分析第50-52页
   3.6.1 T1代Xa21转基因植株抗病性分析第50-51页
   3.6.2 T1代Xa21转基因植株的gus染色分析第51-52页
 4. 结论与讨论第52-55页
  4.1 水稻愈伤组织诱导和再生体系的优化第52页
  4.2 两种选择标记基因的应用第52页
  4.3 农杆菌介导水稻愈伤组织转化体系的优化第52-53页
  4.4 Gus基因的应用第53页
  4.5 外源基因的表达和遗传特点第53-54页
  4.6 多价转基因水稻转化的意义和存在的问题第54-55页
 5. 结论第55-57页
参考文献第57-65页
英文摘要第65-67页
附录第67-76页

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