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家蚕W染色体特异转基因品系的建立及ZFN打靶初探

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 文献综述第12-28页
   ·专养雄蚕简介第12-14页
     ·通过雌雄分养实现专养雄蚕第12-13页
     ·通过遗传区性品系实现专养雄蚕第13-14页
   ·遗传区性品系与昆虫不育技术第14-20页
     ·遗传区性品系在昆虫不育技术中的应用第15-16页
     ·鳞翅目遗传特征及遗传区性品系第16-17页
     ·传统遗传区性品系的主要结构和局限性第17-18页
     ·利用转基因建立遗传区性品系第18-19页
     ·转基因方法的优缺点第19-20页
   ·锌指核酸酶第20-28页
     ·锌指结构第21-22页
     ·Fok1结构域第22页
     ·锌指核酸酶的原理及应用第22-28页
第二章 引言第28-30页
   ·研究背景及目的意义第28-29页
   ·技术路线第29-30页
第三章 家蚕W染色体转基因的获得第30-54页
   ·实验材料与试剂第30-33页
     ·实验材料第30页
     ·主要仪器第30-31页
     ·主要试剂及配方第31-33页
   ·实验方法第33-39页
     ·家蚕转基因品系第33页
     ·转基因个体筛查第33页
     ·转基因家蚕基因组的提取第33-36页
     ·反向PCR第36-39页
   ·结果与分析第39-53页
     ·W染色体转基因家蚕的获得第39-50页
     ·30-13转基因系的分子检测第50-51页
     ·30-13转基因品系基因拷贝数的鉴定第51-52页
     ·插入位点的确定第52-53页
   ·讨论第53-54页
第四章 GFP靶向锌指核酸酶的打靶初探第54-66页
   ·实验材料与仪器第54页
     ·实验材料第54页
     ·实验仪器第54页
   ·实验方法第54-60页
     ·GFP-ZFN的锌指蛋白编码序列的设计与合成第54-55页
     ·GFP-ZFN表达载体的构建与mRNA的制备第55-60页
     ·GFP-ZFN mRNA的胚胎显微注射第60页
     ·GFP敲除个体的荧光筛选第60页
   ·实验结果与分析第60-65页
     ·GFP-ZFN的锌指蛋白编码序列的设计与合成第60-62页
     ·GFP-ZFN表达载体的构建及mRNA的合成第62-63页
     ·GFP-ZFN mRNA注射个体及GFP敲除个体的荧光检测第63-65页
   ·讨论第65-66页
第五章 结论第66-68页
参考文献第68-74页
附录第74-76页
硕士在读期间发表的文章及参加课题情况第76-78页
致谢第78页

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