| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-13页 |
| 第一部分 穿梭质粒PDC315-TCRΑ12-2-IRES-VΒ7.1 的构建 | 第13-28页 |
| 引言 | 第13页 |
| 1 材料 | 第13-14页 |
| 2 方法 | 第14-23页 |
| ·TCRα12-2 基因的获得 | 第15-19页 |
| ·质粒pTCRα12-2－IRES-GFP 的构建 | 第19-21页 |
| ·TCRVβ7.1 基因的获得 | 第21页 |
| ·质粒pTCRα12-2-IRES-Vβ7.1 的构建 | 第21-22页 |
| ·穿梭质粒pDC315-TCRα12-2-IRES-Vβ7.1 的获得 | 第22-23页 |
| 3 结果 | 第23-28页 |
| ·PBMC 中获取TCRα12-2 基因 | 第23-24页 |
| ·质粒pTCRα12-2－IRES-GFP 的PCR 鉴定 | 第24-25页 |
| ·质粒pTCRα12-2-IRES-Vβ7.1 的PCR 鉴定 | 第25-26页 |
| ·穿梭质粒pDC315-TCRα12-2-IRES-Vβ7.1 的单、双酶切鉴定 | 第26-27页 |
| ·重组质粒序列测定 | 第27-28页 |
| 第二部分、重组腺病毒的包装、鉴定及滴度测定 | 第28-35页 |
| 引言 | 第28页 |
| 1 材料 | 第28页 |
| 2 方法 | 第28-31页 |
| ·重组腺病毒Ad.TCRα12-2-IRES-Vβ7.1 的包装 | 第28-29页 |
| ·重组腺病毒AdTCRα12-2-IRES-Vβ7.1 的鉴定和目的蛋白表达的检测 | 第29-31页 |
| 3 结果 | 第31-35页 |
| ·重组腺病毒Ad.TCRα12-2-IRES-Vβ7.1 的PCR 鉴定 | 第31-32页 |
| ·重组腺病毒Ad.TCRα12-2-IRES-Vβ7.1 的RT-PCR 鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组腺病毒Ad.TCRα12-2-IRES-Vβ7.1 的流式鉴定 | 第33-35页 |
| 第三部分 重组腺病毒对肝癌细胞的杀伤作用 | 第35-44页 |
| 引言 | 第35页 |
| 1. 材料 | 第35页 |
| 2 方法 | 第35-37页 |
| ·MTT 比色法检测重组腺病毒Ad.TCRα12-2-IRES-Vβ7.1 感染的PBMC 对肝癌细胞HepG2 和BEL-7402 的存活率的影响 | 第35-36页 |
| ·流式检测重组腺病毒Ad.TCRα12-2-IRES-Vβ7.1 感染的PBMC 对肝癌细胞HepG2 和BEL-7402 周期的影响 | 第36页 |
| ·统计学处理 | 第36-37页 |
| 3 结果 | 第37-41页 |
| ·MTT 比色法检测重组腺病毒Ad.TCRα12-2-IRES-Vβ7.1 感染的PBMC 对肝癌细胞HepG2 和BEL-7402 的杀伤作用 | 第37-38页 |
| ·流式检测重组腺病毒Ad.TCRα12-2-IRES- Vβ7.1 感染的PBMC 对肝癌细胞HepG2 和BEL-7402 周期的影响 | 第38-41页 |
| 讨论 | 第41-44页 |
| 全文总结 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 附录一英文缩略词表 | 第50-52页 |
| 附录二 质粒图谱 | 第52-55页 |
| 附录三 引物列表 | 第55-56页 |
| 附录四 文献综述 | 第56-62页 |
| 附录五 攻读学位期间发表的论文 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
