| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 引言 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-27页 |
| 1 多分DNA病毒(PDV)基本生物学特征 | 第15-17页 |
| ·PDV的生活史 | 第15-16页 |
| ·PDV基因组 | 第16-17页 |
| 2 PDV基本生理功能 | 第17-20页 |
| ·免疫抑制 | 第17-18页 |
| ·发育调控 | 第18-20页 |
| 3 PDV主要基因和基因家族研究现状 | 第20-26页 |
| ·姬蜂病毒(Ichnovirus,IV)基因家族 | 第21-23页 |
| ·茧蜂病毒(Bracovirus,BV)基因家族 | 第23-26页 |
| 4 EP基因家族研究现状 | 第26-27页 |
| 第二章 基本实验材料和方法 | 第27-36页 |
| 1 基本实验材料 | 第27-29页 |
| ·养虫设备 | 第27页 |
| ·供试材料 | 第27-28页 |
| ·实验仪器 | 第28-29页 |
| ·实验试剂 | 第29页 |
| 2 基本实验方法 | 第29-34页 |
| ·RNA提取 | 第29页 |
| ·cDNA合成 | 第29-30页 |
| ·PCR反应 | 第30页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第30页 |
| ·凝胶回收目的片段 | 第30-31页 |
| ·连接反应 | 第31页 |
| ·感受态细胞制备 | 第31页 |
| ·质粒或连接产物转化感受态细胞 | 第31页 |
| ·质粒提取 | 第31-32页 |
| ·质粒双酶切 | 第32页 |
| ·重组质粒的筛选 | 第32页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第32页 |
| ·Western Blot | 第32-33页 |
| ·ELISA | 第33-34页 |
| 3 实验常用试剂配制 | 第34-36页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳缓冲液 | 第34页 |
| ·常用缓冲液 | 第34页 |
| ·LB培养基 | 第34页 |
| ·SDS-PAGE电泳试剂 | 第34-35页 |
| ·Western Blot试剂 | 第35页 |
| ·ELISA试剂 | 第35-36页 |
| 第三章 CvBV EP-1 like基因家族成员序列分析 | 第36-44页 |
| 1 实验材料 | 第36页 |
| 2 实验方法 | 第36-39页 |
| ·引物设计 | 第36-37页 |
| ·RACE | 第37-38页 |
| ·产物纯化、连接T载体及鉴定 | 第38页 |
| ·生物信息学分析 | 第38-39页 |
| 3 结果 | 第39-42页 |
| ·EP-1 like基因家族的分析 | 第39-40页 |
| ·蛋白序列功能位点预测及蛋白序列同源关系 | 第40页 |
| ·EP基因家族系统蛋白质序列发生关系 | 第40-42页 |
| 4 讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 CvBV EP-1 like 1(EPL-1)基因克隆、原核表达与多克隆抗体制备 | 第44-52页 |
| 1 实验材料 | 第44页 |
| 2 实验方法 | 第44-46页 |
| ·基因克隆 | 第44-45页 |
| ·重组表达载体构建 | 第45页 |
| ·诱导表达条件的优化 | 第45页 |
| ·Western Blot鉴定 | 第45页 |
| ·表达蛋白纯化 | 第45-46页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第46页 |
| ·抗体效价和特异性检测 | 第46页 |
| 3 结果 | 第46-51页 |
| ·EPL-1基因克隆和重组载体的构建 | 第46-47页 |
| ·诱导表达条件优化及鉴定 | 第47-49页 |
| ·Western Blot鉴定 | 第49页 |
| ·抗体效价测定 | 第49页 |
| ·抗体反应特异性 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-52页 |
| 第五章 小菜蛾体内CvBV EPL-1蛋白含量变化和EPL-1基因转录动态 | 第52-57页 |
| 1 实验材料 | 第52页 |
| 2 实验方法 | 第52-53页 |
| ·多克隆抗体分析EPL-1蛋白在小菜蛾幼虫体内的表达动态 | 第52页 |
| ·EPL-1基因荧光定量PCR | 第52-53页 |
| 3 结果 | 第53-55页 |
| ·EPL-1蛋白在小菜蛾血淋巴内的含量变化 | 第53页 |
| ·EPL-1基因转录时空动态 | 第53-55页 |
| 4 讨论 | 第55-57页 |
| 第六章 总结与讨论 | 第57-59页 |
| 1 结论与讨论 | 第57-58页 |
| 2 本研究创新之处 | 第58页 |
| 3 不足之处 | 第58页 |
| 4 努力方向 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-69页 |
| 附录 硕士期间发表论文情况 | 第69页 |
