| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 本论文常用中英文缩写词 | 第10-12页 |
| 文献综述 | 第12-21页 |
| 引言 | 第21-22页 |
| 一株分泌猪IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞的制备与鉴定 | 第22-51页 |
| 1 材料与方法 | 第22-35页 |
| ·实验动物 | 第22页 |
| ·质粒和菌种 | 第22页 |
| ·细胞 | 第22页 |
| ·融合蛋白 | 第22页 |
| ·酶类及相关试剂 | 第22页 |
| ·常用溶液配制 | 第22-28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·抗原制备和鉴定 | 第28-31页 |
| ·重组质粒 PET-32a-PoIFN-γ 和 PGEX-4T-1-PoIFN-γ 转化宿主 | 第28-29页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
| ·重组质粒 PET-32a-PoIFN-γ 和 PGEX-4T-1-PoIFN-γ 的转化 | 第29页 |
| ·重组质粒的菌液PCR 鉴定 | 第29页 |
| ·SDS-PAGE 电泳检测 His-PoIFN-γ、GST-PoIFN-γ 融合蛋白的诱导表达 | 第29-30页 |
| ·His-PoIFN-γ、GST-PoIFN-γ 融合蛋白及空载体标签蛋白的大量提取 | 第30页 |
| ·Folin-酚法测 His-PoIFN-γ、GST-PoIFN-γ 及空载体标签蛋白浓度 | 第30页 |
| ·制作标准曲线 | 第30页 |
| ·检测融合蛋白浓度 | 第30页 |
| ·GST-PoIFN-γ 融合蛋白的纯化 | 第30页 |
| ·动物免疫 | 第30-31页 |
| ·阳性杂交瘤筛选方法（间接ELISA 法）的建立 | 第31页 |
| ·ELISA 抗原最适包被浓度与阴性、阳性血清最佳稀释度的确定 | 第31页 |
| ·间接ELISA 反应程序 | 第31页 |
| ·单抗细胞株的建立与鉴定 | 第31-33页 |
| ·细胞融合 | 第31-32页 |
| ·饲养细胞的制备 | 第31页 |
| ·免疫脾细胞的准备 | 第31-32页 |
| ·骨髓瘤 SP2/0 细胞的准备 | 第32页 |
| ·细胞融合及杂交瘤细胞的选择性培养 | 第32页 |
| ·阳性杂交瘤细胞株的获得 | 第32-33页 |
| ·亚克隆 | 第32页 |
| ·细胞冻存 | 第32-33页 |
| ·细胞复苏 | 第33页 |
| ·阳性杂交瘤细胞株的稳定性实验 | 第33页 |
| ·单抗特异性鉴定 | 第33-34页 |
| ·Dot-ELISA 鉴定单抗的特异性 | 第33页 |
| ·Western-blot 鉴定单抗的特异性 | 第33-34页 |
| ·小鼠腹水的制备和效价测定 | 第34页 |
| ·单克隆抗体亚型鉴定 | 第34-35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-43页 |
| ·抗原的制备及鉴定 | 第35-38页 |
| ·菌液PCR 鉴定阳性克隆 | 第35页 |
| ·PET-32a-PoIFN-γ 和 PGEX-4T-1-PolFN-γ 原核表达蛋白的鉴定 | 第35-36页 |
| ·His-PolFN-γ 融合蛋白大量提取 | 第36-37页 |
| ·GST-PoIFN-γ 的纯化 | 第37页 |
| ·Folin-酚法测定 His-PoIFN-γ、GST-PoIFN-γ 融合蛋白及 His 标签蛋白含量 | 第37-38页 |
| ·阳性单克隆抗体细胞株间接ELISA 筛选法的建立 | 第38-40页 |
| ·单抗细胞株的建立与鉴定 | 第40-41页 |
| ·细胞融合与筛选 | 第40-41页 |
| ·杂交瘤细胞株的获得 | 第41页 |
| ·阳性杂交瘤细胞稳定性实验 | 第41页 |
| ·单抗特异性检测结果 | 第41-42页 |
| ·单克隆抗体的Dot-ELISA 鉴定 | 第41页 |
| ·单克隆抗体的 Western-blot 鉴定 | 第41-42页 |
| ·小鼠腹水效价测定结果及单抗亚型鉴定结果 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43-48页 |
| ·抗原的制备与动物免疫 | 第43-44页 |
| ·免疫抗原的选择 | 第43页 |
| ·检测抗原的纯化 | 第43-44页 |
| ·动物免疫 | 第44页 |
| ·阳性克隆的筛选方法 | 第44-45页 |
| ·细胞融合 | 第45-46页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的亚克隆 | 第46-47页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第47-48页 |
| 4 结论 | 第48-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简介 | 第57页 |
