| 缩略词 | 第1-13页 |
| 中文摘要 | 第13-14页 |
| 英文摘要 | 第14-16页 |
| 前言 | 第16-39页 |
| 1 对虾白斑综合症病毒(WSSV)及其分子生物学研究 | 第16-38页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的研究概况 | 第16-23页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的发现 | 第16页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的感染宿主、传播途径和体内增殖 | 第16-17页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的感染动物模型 | 第17-18页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的病症及组织病理学 | 第18-19页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的形态特征 | 第19-20页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的分离纯化 | 第20-21页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的检测 | 第21-23页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的基因组学研究 | 第23-26页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的蛋白质组学研究 | 第26-38页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的结构蛋白 | 第27-33页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的功能酶类 | 第33-36页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的其他重要基因 | 第36-38页 |
| 2 本论文研究的内容和意义 | 第38-39页 |
| 第一部分 对虾白斑综合症病毒膜蛋白VP13A基因的鉴定 | 第39-54页 |
| 1 前言 | 第39-40页 |
| 2 材料与方法 | 第40-45页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-45页 |
| ·WSSV完整病毒粒子以及膜蛋白和核衣壳蛋白的制备 | 第40-42页 |
| ·VP13A基因的克隆表达和蛋白质纯化 | 第42-43页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第43页 |
| ·Western blot分析 | 第43-44页 |
| ·GST pull-down分析 | 第44页 |
| ·Far-Western分析 | 第44-45页 |
| 3 结果 | 第45-52页 |
| ·VP13A的基因结构和氨基酸信息 | 第45页 |
| ·VP13A基因的克隆表达和可溶蛋白纯化 | 第45-47页 |
| ·Western blot分析 | 第47-50页 |
| ·VP13A与WSSV膜蛋白之间的相互作用 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 第二部分 对虾白斑综合症病毒膜蛋白VP31及VP33对宿主细胞的粘附研究 | 第54-66页 |
| 1 前言 | 第54-55页 |
| 2 材料与方法 | 第55-59页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| ·方法 | 第56-59页 |
| ·VP31正常与突变蛋白的可溶表达和纯化 | 第56-57页 |
| ·VP33突变蛋白的构建和表达纯化 | 第57-58页 |
| ·细胞结合实验 | 第58-59页 |
| ·RGD竞争抑制细胞结合实验 | 第59页 |
| 3 结果 | 第59-65页 |
| ·VP31及VP33突变蛋白的设计 | 第59-60页 |
| ·MBP-VP31-His和MBP-VP31m-His的诱导表达和纯化 | 第60-61页 |
| ·VP33m-His的诱导表达和纯化 | 第61-63页 |
| ·细胞结合活性分析 | 第63-65页 |
| 4 讨论 | 第65-66页 |
| 第三部分 对虾白斑综合症病毒ATP酶活性的初步研究 | 第66-72页 |
| 1 前言 | 第66页 |
| 2 材料与方法 | 第66-67页 |
| ·材料 | 第66页 |
| ·方法 | 第66-67页 |
| ·WSSV完整病毒粒子以及膜蛋白和核衣壳蛋白的制备 | 第66页 |
| ·病毒ATP酶活性测定 | 第66-67页 |
| ·蔗糖密度梯度离心分离纯化WSSV | 第67页 |
| ·电镜观察分离开的病毒区带 | 第67页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第67页 |
| ·ATP结合蛋白的富集 | 第67页 |
| ·ATP结合蛋白的分析鉴定 | 第67页 |
| 3 结果 | 第67-70页 |
| ·WSSV全病毒的ATP酶活性初步测定 | 第67页 |
| ·经蔗糖密度梯度离心分离的病毒区带的电镜观察和SDS-PAGE分析 | 第67-69页 |
| ·WSSV膜蛋白组分中ATP结合蛋白的SDS-PAGE分析 | 第69-70页 |
| 4 讨论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-84页 |
| 附录 | 第84-93页 |
| 1 主要仪器设备 | 第84-85页 |
| 2 常用溶液及培养基的配制 | 第85-89页 |
| 3 常规实验方法 | 第89-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
