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金龟子绿僵菌耐夏季高温能力的种内变异、一新孢壁蛋白的基因克隆及功能鉴定

致谢第1-10页
摘要第10-13页
1 生防真菌的生态适应性及其孢壁蛋白功能的研究现状第13-28页
   ·生防真菌的生态适应性第13-19页
     ·生防真菌及其制剂的环境胁迫第13-16页
     ·提高生防真菌及其制剂生态适应性的策略第16-19页
   ·生防真菌孢壁蛋白的结构和功能第19-24页
     ·孢壁组成第19-21页
     ·真菌孢子的疏水蛋白与疏水性第21-23页
     ·其他孢壁蛋白第23-24页
   ·生防真菌的生物学性状研究及遗传改良方法第24-27页
     ·生防真菌的耐热测定体系第24页
     ·胶体金免疫定位技术第24-25页
     ·真菌的遗传转化第25-27页
   ·研究目标和意义第27-28页
2 金龟子绿僵菌分生孢子耐夏季高温能力的种内变异第28-37页
   ·材料与方法第29-31页
     ·菌株第29页
     ·分生孢子的制备第29-30页
     ·分生孢子耐热力测定第30页
     ·菌落生长速率测定第30页
     ·数据分析第30-31页
   ·结果与分析第31-35页
     ·供试菌株的耐热力第31-33页
     ·不同胁迫温度下的耐热力第33页
     ·菌落生长速率第33-35页
   ·讨论第35-37页
3 金龟子绿僵菌孢壁蛋白的提取与电泳分析第37-40页
   ·材料与方法第37-38页
     ·菌株第37页
     ·孢壁蛋白提取与含量测定第37-38页
     ·孢壁蛋白的电泳分析第38页
   ·结果与讨论第38-40页
     ·不同菌株的孢壁蛋白含量第38页
     ·不同菌株孢壁蛋白的组分分析第38-40页
4 金龟子绿僵菌孢壁蛋白CWP10的基因克隆及分析第40-53页
   ·材料第40-41页
     ·菌株第40页
     ·质粒第40页
     ·试剂第40-41页
   ·方法第41-47页
     ·目标蛋白分离第41页
     ·目标蛋白的电转印第41页
     ·目标蛋白的N-端序列测定第41页
     ·目标蛋白编码序列的克隆第41-43页
     ·Southern杂交分析第43-45页
     ·原核表达以及抗体制备第45页
     ·Western杂交分析第45-46页
     ·目标基因上游疑似启动子序列的克隆及初步分析第46-47页
     ·糖基化染色第47页
   ·结果与分析第47-52页
     ·目标蛋白的N-端序列第47-48页
     ·目标蛋白的基因克隆与序列分析第48-52页
   ·讨论第52-53页
5 孢壁蛋白CWP10的免疫定位与功能分析第53-62页
   ·材料第53页
     ·菌株第53页
     ·质粒第53页
   ·方法第53-57页
     ·胶体金免疫定位第53-54页
     ·转基因菌株的构建第54页
     ·转基因菌株的三类孢子疏水率测定第54-56页
     ·转基因菌株的三类孢子对不同介质附着力的测定第56页
     ·转基因菌株分生孢子对热胁迫和紫外辐射耐受力的测定第56-57页
   ·结果与分析第57-60页
     ·胶体金免疫定位第57-58页
     ·CWP10在球孢白僵菌中的表达第58页
     ·孢壁蛋白CWP10对球孢白僵菌疏水性和孢子附着力的影响第58-60页
     ·表达CWP10的球孢白僵菌分生孢子对环境胁迫的反应第60页
   ·讨论第60-62页
6 结语第62-64页
参考文献第64-76页
Summary第76-79页
附录:在读期间主要成果第79页

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