致谢 | 第1-12页 |
摘要 | 第12-14页 |
Abstract | 第14-16页 |
第一章 文献综述和研究背景 | 第16-25页 |
·植物的免疫抗病反应 | 第16-19页 |
·植物先天免疫性(innate immunity) | 第16-19页 |
·植物的诱导免疫性(inducible immunity) | 第19页 |
·植物抗病信号传导途径 | 第19-23页 |
·SA信号途径 | 第19-22页 |
·JA/ET信号途径 | 第22-23页 |
·本研究的目的意义和主要研究内容 | 第23-25页 |
第二章 水稻鞘氨醇-1-磷酸代谢基因OsSPK1和OsSPL1的功能分析 | 第25-65页 |
摘要 | 第25-26页 |
·前言 | 第26-28页 |
·材料与方法 | 第28-37页 |
·供试稻瘟菌菌株与接种 | 第28-29页 |
·水稻幼苗培育与处理 | 第29页 |
·OsSPK1和OsSPL1 cDNA的克隆 | 第29-30页 |
·DNA的序列测定和分析 | 第30页 |
·总RNA提取 | 第30页 |
·RT-PCR分析 | 第30-31页 |
·植物转化双元表达载体pCHF3-OsSPK1和pCHF3-OsSPL1的构建 | 第31-32页 |
·转OsSPK1和OsSPL1基因烟草植株的获得 | 第32-33页 |
·烟草基因组DNA提取 | 第33页 |
·转基因烟草的分子鉴定 | 第33页 |
·转基因烟草植株中OsSPK1和OsSPL1基因和PR基因的表达分析 | 第33-34页 |
·OsSPK1和OsSPL1转基因烟草植株抗病性测定 | 第34-35页 |
·烟草花叶病毒的接种处理 | 第34-35页 |
·烟草野火病菌接种处理 | 第35页 |
·OsSPK1和OsSPL1转基因烟草种子对ABA的反应 | 第35页 |
·OsSPK1和OsSPL1转基因烟草植株叶片抗盐性生物测定 | 第35页 |
·OsSPK1和OsSPL1转基因烟草植株抗氧化胁迫测定 | 第35-36页 |
·叶绿素含量的测定 | 第36页 |
·Fumonisin B1引起过敏性反应分析 | 第36-37页 |
·1-磷酸鞘氨醇的测定 | 第37页 |
·结果与分析 | 第37-63页 |
·水稻OsSPK1和OsSPL1基因克隆及蛋白特征分析 | 第37-38页 |
·OsSPK1、OsSPK2和OsSPL1在水稻抗病反应中的差异表达 | 第38-43页 |
·植物转化双元表达载体pCHF3-OsSPK1和pCHF3-OsSPL1的构建 | 第43页 |
·OsSPK1和OsSPL1转基因烟草植株的获得 | 第43-48页 |
·OsSPK1和OsSPL1转基因烟草植株的分子鉴定 | 第48页 |
·OsSPK1和OsSPL1转基因烟草株系的抗病性表型 | 第48-50页 |
·烟草花叶病毒病抗性表型 | 第48-50页 |
·烟草野火病抗性表型 | 第50页 |
·OsSPK1和OsSPL1转基因烟草植株中PR基因表达的变化 | 第50页 |
·OsSPK1和OsSPL1转基因烟草植株的ABA敏感性 | 第50-54页 |
·OsSPK1和OsSPL1转基因烟草植株的抗盐性表型 | 第54页 |
·OsSPK1和OsSPL1转基因烟草植株的抗氧化胁迫表型 | 第54-57页 |
·OsSPK1和OsSPL1转基因烟草植株的HR反应 | 第57页 |
·OsSPK1和OsSPL1转基因烟草植株中S1P的含量 | 第57-63页 |
·讨论 | 第63-65页 |
第三章 AtBIK1参与拟南芥磷营养的调控 | 第65-96页 |
·前言 | 第66-68页 |
·材料和方法 | 第68-74页 |
·供试材料和生长条件 | 第68-69页 |
·植物总RNA的提取 | 第69页 |
·AtBlK1基因Promoter::GUS载体的构建 | 第69-70页 |
·GUS染色 | 第70页 |
·主根、侧根和根毛数的测定 | 第70页 |
·花青素含量的测定 | 第70页 |
·植株总磷含量测定 | 第70-71页 |
·酸性磷酸酶的测定和染色 | 第71页 |
·H2O2和超氧阴离子的测定 | 第71页 |
·Botrytis cinerea接种 | 第71-72页 |
·叶绿素含量的测定 | 第72页 |
·腐败植株数测定 | 第72页 |
·真菌生长量测定 | 第72页 |
·Altenaria brassicicola接种处理 | 第72页 |
·RT-PCR分析 | 第72-73页 |
·Q-PCR | 第73-74页 |
·结果与分析 | 第74-91页 |
·AtBlK1在各组织中的表达情况 | 第74-75页 |
·根系统结构的改变 | 第75页 |
·bik1植株中花青素含量增加 | 第75-81页 |
·AtBIK1功能丧失影响植株总磷的积累 | 第81页 |
·AtBIK1的功能丧失降低酸性磷酸酶活性 | 第81页 |
·bik1突变体植株中磷饥饿应答基因诱导基因表达下降 | 第81页 |
·bik1突变体植株中活性氧产生下降 | 第81页 |
·在缺磷条件下bik1突变体进一步增加Botrytis cinerea的感病性 | 第81-86页 |
·在缺磷条件下bik1突变体对Altenaria brassicicola的抗性表型 | 第86页 |
·PR基因表达的变化 | 第86-91页 |
·bik1突变体中miR399及其靶标基因表达变化 | 第91页 |
·讨论: | 第91-96页 |
第四章 水稻OsBIK1的克隆鉴定与功能分析 | 第96-120页 |
摘要 | 第96-97页 |
·前言 | 第97页 |
·材料和方法 | 第97-102页 |
·供试水稻、病菌菌株、诱导处理及病菌接种 | 第97页 |
·水稻OsBIK1基因cDNA序列的克隆 | 第97页 |
·DNA的序列测定和分析 | 第97-98页 |
·水稻总RNA的提取 | 第98页 |
·OsBIK1在水稻抗病反应中差异表达的RT-PCR分析 | 第98页 |
·水稻OsBIK1基因植物转化双元表达载体的构建 | 第98页 |
·OsBIK1转基因拟南芥植株的抗性 | 第98页 |
·OsBIK1转基因水稻植株的获得 | 第98-100页 |
·植物材料、菌种和载体 | 第98-99页 |
·水稻的农杆菌转化和抗性植株的获得 | 第99-100页 |
·水稻基因组的提取和OsBIK1转基因水稻植株的分子鉴定 | 第100页 |
·OsBIK1转基因水稻的生长状况 | 第100-101页 |
·OsBIK1转基因水稻稻瘟病抗性测定 | 第101页 |
·OsBIK1转基因水稻种子对ABA的反应 | 第101页 |
·OsBIK1转基因水稻植株抗盐性生物测定 | 第101页 |
·OsBIK1转基因水稻植株抗干旱测定 | 第101-102页 |
·OsBIK1转基因水稻种子抗冻害测定 | 第102页 |
·Q-PCR | 第102页 |
·结果和分析 | 第102-118页 |
·OsBIK1基因全长cDNA序列的克隆及序列分析 | 第102页 |
·OsBIK1蛋白的结构与系统进化树分析 | 第102页 |
·OsBIK1基因在水稻抗病反应中的差异表达 | 第102-105页 |
·植物转化双元表达载体pCAMBIA 99-1-OsBIK1的构建 | 第105页 |
·OsBIK1能互补拟南芥bik1的功能 | 第105页 |
·OsBIK1转基因水稻植株的获得 | 第105-109页 |
·OsBIK1转基因水稻植株的分子鉴定 | 第109页 |
·OsBIK1转基因水稻植株的生长状况 | 第109页 |
·OsBIK1转基因水稻植株提高稻瘟菌抗性 | 第109页 |
·OsBIK1转基因水稻植株对ABA敏感性不变 | 第109-113页 |
·OsBIK1转基因水稻植株提高冻害抗性 | 第113页 |
·OsBIK1转基因水稻植株提高抗盐性 | 第113页 |
·OsBIK1转基因水稻植株提高对干旱胁迫的抗性 | 第113页 |
·逆境胁迫下OsBIK1基因表达的变化 | 第113-118页 |
·讨论 | 第118-120页 |
第五章 全文小结和今后的研究 | 第120-122页 |
参考文献 | 第122-130页 |