| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第14-32页 |
| ·鸭病毒性肝炎的流行与分布 | 第14-15页 |
| ·DHV-Ⅰ的分类地位 | 第15-16页 |
| ·DHV-Ⅰ的病原特性 | 第16-18页 |
| ·DHV-Ⅰ的理化特性及生物学特性 | 第16页 |
| ·DHV-Ⅰ的增殖培养 | 第16-17页 |
| ·DHV-Ⅰ的致病力 | 第17-18页 |
| ·DHV-Ⅰ的纯化研究 | 第18页 |
| ·DHV-Ⅰ诊断技术的研究 | 第18-21页 |
| ·病毒分离技术 | 第18-19页 |
| ·血清学诊断技术 | 第19-21页 |
| ·分子生物学诊断技术 | 第21页 |
| ·DHV-Ⅰ的基因组结构及其功能 | 第21-22页 |
| ·DHV-Ⅰ的病毒蛋白及其功能 | 第22-23页 |
| ·小RNA 病毒核酸链与多聚蛋白加工研究 | 第23-26页 |
| ·小RNA 病毒基因组的主要结构特点 | 第23-24页 |
| ·小RNA 病毒多聚蛋白的加工处理 | 第24-26页 |
| ·动物疫苗研究进展 | 第26-30页 |
| ·灭活疫苗 | 第26-27页 |
| ·减毒活疫苗 | 第27页 |
| ·亚单位疫苗 | 第27页 |
| ·基因工程疫苗 | 第27-30页 |
| ·鸭肝炎的免疫防制及其存在的问题 | 第30-31页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第31-32页 |
| 2 材料和方法 | 第32-42页 |
| ·实验材料 | 第32-33页 |
| ·病毒与细胞 | 第32页 |
| ·质粒与菌种 | 第32页 |
| ·工具酶及试剂 | 第32页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| ·主要溶液及配制 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-42页 |
| ·引物的设计与合成 | 第33-34页 |
| ·病毒RNA 的提取 | 第34页 |
| ·RT-PCR 扩增及检测 | 第34-35页 |
| ·PCR 产物的胶回收 | 第35页 |
| ·PCR 产物和载体的酶切及回收 | 第35-36页 |
| ·PCR 产物和载体pFBHb 的连接 | 第36页 |
| ·Top10 感受态细胞的制备 | 第36-37页 |
| ·连接产物的转化 | 第37页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第37-38页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第38页 |
| ·重组杆状病毒表达载体的转座重组 | 第38页 |
| ·重组转座子的鉴定 | 第38-39页 |
| ·Sf9 细胞的培养 | 第39-40页 |
| ·重组杆状病毒的构建 | 第40页 |
| ·重组杆状病毒在sf9 昆虫细胞中的表达 | 第40页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 检测 | 第40-41页 |
| ·Western blot 检测重组蛋白反应活性 | 第41-42页 |
| 3 结果 | 第42-47页 |
| ·目的基因VP1、VP0 和VP3 的扩增结果 | 第42-43页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第43-44页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第43-44页 |
| ·重组质粒的PCR 鉴定 | 第44页 |
| ·重组转座子的PCR 鉴定 | 第44-45页 |
| ·转染后细胞的形态学变化 | 第45页 |
| ·表达蛋白的 SDS-PAGE 和 Western-blot 分析 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-51页 |
| ·表达系的选择 | 第47-48页 |
| ·Bac-to-Bac 系统与表达载体的选择 | 第48页 |
| ·目的片段的选择 | 第48-49页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第49-50页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第50页 |
| ·表达过程中注意的问题 | 第50-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第60页 |