抗番鸭呼肠孤病毒σB蛋白单克隆抗体的制备
中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
1 前言 | 第11-21页 |
·呼肠孤病毒科简介 | 第11页 |
·禽呼肠孤病毒简介 | 第11-12页 |
·病毒的特性 | 第11-12页 |
·基因组及编码的蛋白 | 第12页 |
·番鸭呼肠孤病毒研究进展 | 第12-17页 |
·病毒特性 | 第13页 |
·基因组及编码蛋白 | 第13-15页 |
·流行病学 | 第15页 |
·临床症状及剖检 | 第15页 |
·鉴别诊断 | 第15-17页 |
·防治 | 第17页 |
·单克隆抗体技术简介 | 第17-20页 |
·单抗制备的原理 | 第18页 |
·多抗和单抗特性比较 | 第18-19页 |
·单抗应用的研究 | 第19-20页 |
·研究目的和意义 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-30页 |
·试验材料 | 第21-22页 |
·主要仪器与耗材 | 第21页 |
·主要试剂和溶液 | 第21页 |
·动物与细胞 | 第21-22页 |
·质粒 | 第22页 |
·试验方法 | 第22-30页 |
·免疫原的制备与检测 | 第22-23页 |
·动物免疫 | 第23页 |
·间接ELISA检测方法的建立 | 第23页 |
·动物效价的检测 | 第23-24页 |
·细胞融合 | 第24-26页 |
·单克隆抗体特性鉴定 | 第26-28页 |
·表位的初步鉴定 | 第28-30页 |
3 结果 | 第30-37页 |
·免疫原的制备与检测 | 第30-31页 |
·抗原的纯化 | 第30页 |
·抗原浓度的测定 | 第30页 |
·蛋白的抗原性检测 | 第30-31页 |
·ELISA筛选方法的建立 | 第31页 |
·细胞融合和阳性杂交瘤细胞株的筛选 | 第31-32页 |
·细胞融合率和阳性率的计算 | 第31-32页 |
·融合细胞的克隆化 | 第32页 |
·单克隆抗体的特异性鉴定 | 第32-34页 |
·Western blot | 第32页 |
·单抗稳定性测定 | 第32-33页 |
·染色体分析 | 第33页 |
·单克隆抗体亚型的测定 | 第33页 |
·腹水与细胞上清的效价 | 第33页 |
·免疫组化鉴定 | 第33-34页 |
·表位的初步鉴定 | 第34-37页 |
4 讨论 | 第37-41页 |
·单克隆抗体制备过程的确定 | 第37-38页 |
·抗原的制备 | 第37页 |
·免疫程序的选择 | 第37页 |
·SP2/0问题 | 第37-38页 |
·筛选过程中污染,记录等问题 | 第38页 |
·抗体的大量制备 | 第38-40页 |
·动物体内生产单抗的方法 | 第38页 |
·体外培养生产单抗的方法 | 第38-39页 |
·杂交瘤细胞的无血清培养 | 第39-40页 |
·抗原表位初步分析 | 第40-41页 |
5 结论 | 第41-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-47页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第47页 |