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玉米胚乳蛋白二维亲和电泳条件的优化以及淀粉代谢相关蛋白的分离与鉴定

提要第1-7页
英文缩写表第7-9页
第一章 绪论第9-25页
   ·淀粉第9页
   ·淀粉合成的研究进展第9-11页
   ·与淀粉代谢核心途径有关的酶的研究进展第11-16页
     ·蔗糖合成酶(Sucrose Synthase,SUS,EC 2. 4. 1.13)第11-12页
     ·蔗糖磷酸合成酶(Sucrose Phosphate Synthase,SPS,EC 2.4.1.14)第12页
     ·腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(ADP-glucose pyrophosphorylase,AGPase,EC 2.7.7.27 )第12-13页
     ·淀粉合成酶(Starch synthase, SSs,EC 2.4.2.21 )第13-14页
     ·淀粉分支酶(Starch Branching Enzyme,SBEs,EC 2.4.1.18 )第14-15页
     ·淀粉去分支酶(Starch Debranching Enzymes,DBEs,EC 3.2.1.41 and EC 3.2.1.第15-16页
     ·淀粉磷酸化酶(Starch phosphorylase,SP,EC 2.4.1.1)第16页
   ·淀粉代谢调控的研究进展第16-21页
     ·代谢物的别构调控第16-17页
     ·淀粉代谢酶的翻译后修饰第17-20页
     ·酶的表达水平的调控第20-21页
   ·研究参与淀粉代谢的蛋白和酶的功能的方法第21-23页
     ·利用突变体研究酶的功能第21-22页
     ·反向遗传技术第22页
     ·二维亲和电泳第22-23页
   ·立项依据第23-25页
第二章 材料与方法第25-41页
   ·实验材料第25-33页
     ·植物材料第25页
     ·主要仪器第25-26页
     ·试剂第26-27页
     ·常用溶液配制第27-33页
   ·实验方法第33-41页
     ·非失活的玉米胚乳蛋白样品制备第33-34页
     ·一维聚丙烯酰胺凝胶电泳第34-35页
     ·第二维亲和凝胶电泳第35-36页
     ·显色第36-37页
     ·图片保存第37页
     ·质谱(LC-MS/MS)鉴定第37-39页
     ·酶谱检测第39-41页
第三章 实验结果第41-50页
   ·玉米胚乳蛋白二维亲和电泳条件的优化第41-46页
     ·样本的采集第41页
     ·Bradford 法测定蛋白质浓度标准曲线的绘制第41-42页
     ·裂解液孵育时间对蛋白提取效果的影响第42-43页
     ·不同底物浓度对分离效果的影响第43页
     ·不同电泳时间对分离效果的影响第43-45页
     ·不同发育期的玉米胚乳蛋白的SDS-PAGE第45-46页
   ·玉米淀粉代谢相关蛋白的分离与鉴定第46-50页
     ·四个不同发育期的玉米胚乳全蛋白的2-DAE 图片第46-48页
     ·分离得到的蛋白点的质谱结果第48-49页
     ·淀粉磷酸化酶的酶谱验证第49-50页
第四章 讨论第50-55页
   ·二维亲和电泳技术与二维电泳的比较第50-51页
   ·不同发育期出现的差异第51-52页
   ·与底物相互作用的酶类第52-55页
     ·蔗糖合成酶-SH1 (SUS-SH1)第52-53页
     ·淀粉磷酸化酶第53页
     ·普鲁兰型淀粉脱支酶第53页
     ·SP 和SUS-SH1 与支链淀粉和糖原的亲和力的差异第53-54页
     ·其他关键酶类的缺失第54-55页
第五章 结论第55-56页
参考文献第56-74页
附录第74-78页
硕士期间发表文章第78-79页
致谢第79-80页
中文摘要第80-82页
Abstract第82-84页

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