| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 第一部分 研究背景 | 第8-17页 |
| 一、HOXB13基因及其转录调控机制的研究进展 | 第8-11页 |
| (一) HOX基因简介 | 第8-9页 |
| (二) HOXB13基因及其功能 | 第9-10页 |
| (三) HOXB13基因的调控 | 第10-11页 |
| 二、转录因子YY1概述 | 第11-14页 |
| (一) PcG蛋白及其对HOX基因的调控 | 第11-12页 |
| (二) YY1的结构及其功能域 | 第12页 |
| (三) YY1的基因调控功能 | 第12-13页 |
| (四) YY1的作用机制模型 | 第13-14页 |
| 三、本论文的内容及意义 | 第14-17页 |
| (一) 立题依据 | 第14-15页 |
| (二) 本文的研究内容和意义 | 第15-17页 |
| 第二部分 实验材料与方法 | 第17-29页 |
| 一、实验材料 | 第17页 |
| (一) 质粒和点突变体 | 第17页 |
| (二) 蛋白质和抗体 | 第17页 |
| (三) 哺乳动物细胞系 | 第17页 |
| (四) 试剂 | 第17页 |
| 二、实验方法 | 第17-29页 |
| Ⅰ.分子生物学试验方法 | 第17-22页 |
| (一) 分子克隆 | 第17页 |
| (二) DNA的琼脂糖电泳 | 第17页 |
| (三) 质粒大量制备的方法 | 第17-19页 |
| (四) 哺乳动物细胞总RNA的提取 | 第19-20页 |
| (五) 逆转录(Reverse Transcription,RT) | 第20-21页 |
| (六) PCR | 第21-22页 |
| Ⅱ.细胞生物学实验方法 | 第22-29页 |
| (一) 哺乳动物细胞系的培养 | 第22-23页 |
| (二) 真核生物细胞的瞬时转染和荧光素酶报告基因检测 | 第23-24页 |
| (三) 蛋白质的Western Blotting分析 | 第24-26页 |
| (四) 染色质免疫沉淀实验(Chromatin immunoprecipitation,ChIP) | 第26-27页 |
| (五) MTT细胞活性检测实验 | 第27-29页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第29-38页 |
| 一、重组质粒的构建及鉴定 | 第29-32页 |
| (一) HOXB13报告基因质粒的构建及鉴定 | 第29-30页 |
| (二) 截短突变质粒的构建与鉴定 | 第30页 |
| (三) 点突变质粒的构建及鉴定 | 第30-32页 |
| 二、YY1在HOXB13基因转录调控中的作用 | 第32-36页 |
| (一) YY1参与了HOXB13基因的转录抑制 | 第32-33页 |
| (二) YY1抑制了内源HOXB13基因的表达水平 | 第33-34页 |
| (三) YY1通过结合在HOXB13启动子区的来抑制HOXB13的表达 | 第34-35页 |
| (四) HOXB13启动子区-745位和-384位YY1结合位点在HOXB13转录调控中发挥重要作用 | 第35-36页 |
| 三、HOXB13在YY1影响AR阴性的前列腺癌生长的过程起着重要的作用 | 第36-38页 |
| 第四章 讨论 | 第38-40页 |
| 第五章 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第47页 |
