| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-15页 |
| 符号说明 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-32页 |
| 导言 | 第16页 |
| ·肿瘤基因治疗的现状与研究方法 | 第16-17页 |
| ·腺病毒载体的现状与问题 | 第17-23页 |
| ·腺病毒简介 | 第17-18页 |
| ·腺病毒载体研究现状 | 第18-19页 |
| ·腺病毒载体存在的问题 | 第19-20页 |
| ·腺病毒靶向性改造 | 第20-22页 |
| ·有效的抗肿瘤治疗基因 | 第22页 |
| ·肿瘤选择性复制型腺病毒 | 第22-23页 |
| ·WNT/β-catenin 信号途径研究进展 | 第23-26页 |
| ·WNT 信号转导通路的组成 | 第23-24页 |
| ·经典Wnt 信号途径的分子机制 | 第24-25页 |
| ·WNT/β-catenin 信号途径活化与肿瘤发生 | 第25-26页 |
| ·白细胞介素24 研究进展 | 第26-32页 |
| ·白细胞介素24 分子简介 | 第26-27页 |
| ·白细胞介素24 表达 | 第27-28页 |
| ·白细胞介素24 受体 | 第28页 |
| ·白细胞介素24 的生物学功能 | 第28-31页 |
| ·白细胞介素24 与肿瘤基因治疗 | 第31-32页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第32-56页 |
| ·实验材料 | 第32-40页 |
| ·菌株 | 第32页 |
| ·质粒 | 第32-33页 |
| ·病毒载体 | 第33-34页 |
| ·细胞株 | 第34页 |
| ·抗体 | 第34-35页 |
| ·试剂盒 | 第35页 |
| ·主要仪器 | 第35-36页 |
| ·培养基和化学试剂 | 第36-40页 |
| ·计算机分析软件 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-56页 |
| ·碱裂解法小量抽取质粒 | 第40-41页 |
| ·质粒制备 | 第41页 |
| ·质粒DNA 对大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第41页 |
| ·细胞培养 | 第41-42页 |
| ·Lipofectamine 2000 法转染细胞（以pEGFP-N1 为例） | 第42页 |
| ·Luciferase 相对荧光单位的检测 | 第42-43页 |
| ·FCM 分析携带EGFP 的质粒或腺病毒对细胞转染/感染效率 | 第43页 |
| ·FCM 分析细胞凋亡（Annexin V/PI） | 第43-44页 |
| ·TUNEL 原位凋亡检测 | 第44-45页 |
| ·Western blot 检测细胞蛋白表达 | 第45-46页 |
| ·ELISA 检测MDA-7/IL24 浓度 | 第46-47页 |
| ·Bradford 蛋白定量检测 | 第47页 |
| ·RT-PCR 检测组织或细胞相关基因表达 | 第47-49页 |
| ·免疫组织化学检测 | 第49-51页 |
| ·重组腺病毒载体包装 | 第51页 |
| ·重组腺病毒的筛选和鉴定 | 第51-52页 |
| ·重组腺病毒在293 细胞中大量扩增腺病毒 | 第52-53页 |
| ·氯化铯密度梯度离心纯化腺病毒 | 第53-54页 |
| ·病毒滴度空斑测定法 | 第54页 |
| ·TCID50（半数组织培养感染量）法测腺病毒滴度 | 第54-55页 |
| ·小动物活体成像检测系统 | 第55-56页 |
| 第三章 不同血清型重组腺病毒感染效率及基因表达水平比较 | 第56-70页 |
| 前言 | 第56-57页 |
| ·结果与分析 | 第57-68页 |
| ·人正常组织CAR 受体水平 | 第57-61页 |
| ·肿瘤组织CAR、CD46 受体表达 | 第61-63页 |
| ·Ad5-Luc 及Ad5F116-Luc 感染细胞后的外源基因表达 | 第63页 |
| ·Ad5-Luc 及Ad5F116-Luc 体内应用 | 第63-68页 |
| ·讨论 | 第68-70页 |
| 第四章 携带mda-7/IL24 的嵌合型溶瘤腺病毒(Ad5F11b.wnt-E1A-hIL24)抗肿瘤效果及机理研究 | 第70-101页 |
| 前言 | 第70-71页 |
| ·结果与分析 | 第71-92页 |
| ·临床肿瘤β-catenin 突变检测 | 第71-73页 |
| ·β-catenin/TCF 高活性细胞株筛选 | 第73-74页 |
| ·条件复制性嵌合型溶瘤病毒载体构建 | 第74-76页 |
| ·嵌合型溶瘤腺病毒载体的体外选择性毒性 | 第76-84页 |
| ·嵌合型溶瘤腺病毒诱导细胞凋亡 | 第84-85页 |
| ·嵌合型溶瘤腺病毒诱导细胞凋亡的分子机理 | 第85-86页 |
| ·外源 MDA-7/IL24 蛋白亚细胞定位 | 第86-88页 |
| ·RT-PCR 检测细胞内 mda-7/IL24 受体相关基因的表达 | 第88-89页 |
| ·嵌合型溶瘤腺病毒体内抗肿瘤作用 | 第89-92页 |
| ·讨 论 | 第92-99页 |
| ·肿瘤内 β-catenin 突变 | 第92-93页 |
| ·腺病毒载体靶向性改造 | 第93-94页 |
| ·肿瘤选择性复制型腺病毒 | 第94-95页 |
| ·MDA-7/IL24 抗肿瘤作用 | 第95-96页 |
| ·MDA-7/IL24 抗肿瘤分子机理 | 第96-97页 |
| ·外源 MDA-7/IL24 在内质网/线粒体的定位 | 第97-98页 |
| ·细胞内 MDA-7/IL24 相关受体表达 | 第98-99页 |
| ·小结 | 第99-101页 |
| 第五章 总结与展望 | 第101-103页 |
| ·本研究工作总结与主要创新点 | 第101-102页 |
| ·工作展望 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-117页 |
| 附录一 | 第117-119页 |
| 在学期间发表的论文和科研成果清单 | 第119-120页 |
| 致谢 | 第120页 |
