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枯草芽孢杆菌Tpb55抗菌蛋白Bst1的分离和基因克隆及其序列分析

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
第一章 综述第11-19页
   ·烟草赤星病的概述第11-13页
     ·烟草赤星病的症状第11页
     ·病原学第11-12页
     ·烟草赤星病抗病品种的选育及研究进展第12-13页
   ·抗植物真菌病害基因工程的研究及应用第13-15页
   ·抗植物真菌病害蛋白基因的研究和应用第15-18页
     ·对致病真菌细胞壁起水解作用的蛋白酶基因第15-16页
     ·蛋白合成干扰素基因第16页
     ·小分子量抗真菌蛋白基因第16-17页
     ·植物分泌的病程相关蛋白编码基因第17页
     ·广谱抗真菌蛋白的基因第17页
     ·功能还不明确的抗真菌蛋白第17-18页
   ·菌株T_(PB)55 的研究背景及意义第18-19页
第二章 BST1 抗菌蛋白的分离及N 末端部分氨基酸序列的测定分析第19-34页
   ·材料与方法第19-26页
     ·Bst1 抗菌蛋白的分离第19-21页
       ·主要试剂第19-20页
       ·缓冲液第20页
       ·仪器第20页
       ·生防菌株的来源和保存第20页
       ·培养基的配置第20-21页
     ·检测枯草芽孢杆菌Tpb55 对烟草赤星病菌的拮抗活性第21页
     ·抗菌粗蛋白提取液的制备第21-22页
     ·DEAE Sepharose 离子交换层析过程第22-23页
     ·Sephadex G-75 分子交换层析第23页
     ·抗菌蛋白Bst1 的抑制烟草赤星病菌活性检测第23页
     ·Bst1 抑菌蛋白的纯度及其分子量测定第23-26页
       ·主要试剂及缓冲液的制备如下第23-24页
       ·Bst1 蛋白上样样品制备第24页
       ·SDS 电泳检测蛋白的分子量及纯度第24页
       ·电泳胶的银染过程如下第24-26页
     ·Bst1 抗菌蛋白N 末端前18 个氨基酸序列测定第26页
       ·试剂与仪器第26页
       ·抗菌蛋白Bst1 的N 末端前18 个氨基酸序列测定第26页
   ·结果与分析第26-34页
     ·Bst1 抗菌蛋白的分离第26-30页
     ·枯草芽孢杆菌Tpb55 抗菌蛋白Bst1N 末端前18 个氨基酸序列的测定第30-34页
第三章 抑菌蛋白BST1 编码基因的克隆及序列分析第34-45页
   ·材料与方法第34-35页
     ·枯草芽孢杆菌Tpb55 基因组DNA 的提取与制备第34-35页
       ·供体菌株第34页
       ·试剂及主要仪器第34页
       ·Tpb55 菌株的培养第34页
       ·Tpb55 基因组DNA 的提取第34-35页
   ·抑菌蛋白BST1 编码基因的PCR 扩增第35-39页
     ·主要试剂及仪器第35页
     ·引物的设计与合成第35页
     ·PCR 扩增第35-36页
     ·PCR 产物的回收第36-37页
     ·PCR 产物的克隆第37-38页
       ·菌株和质粒第37页
       ·PCR 纯化回收产物与pEASY-T1 Cloning Vector 连接第37-38页
       ·连接产物转化大肠杆菌Tra1151-T1 感受态细胞第38页
     ·阳性克隆的筛选与鉴定第38-39页
     ·序列同源性比较第39页
   ·结果与分析第39-45页
     ·枯草芽孢杆菌Tpb55 基因组DNA 的提取第39-40页
     ·抑菌蛋白Bst1 编码基因的PCR 扩增第40页
     ·PCR 产物的克隆与鉴定第40-41页
     ·核苷酸序列测定第41-42页
     ·序列分析第42-45页
第四章 讨论与建议第45-48页
参考文献第48-53页
致谢第53-54页
作者简历第54页

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