| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 缩略词表 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述与研究思路 | 第15-36页 |
| ·前言 | 第15-16页 |
| ·植物的成花诱导 | 第16-26页 |
| ·成花诱导因素概述 | 第16-17页 |
| ·光周期途径 | 第17-19页 |
| ·春化途径 | 第19-21页 |
| ·自主途径 | 第21-23页 |
| ·赤霉素途径 | 第23-26页 |
| ·花分化启动 | 第26-28页 |
| ·花器官的发育 | 第28-29页 |
| ·木本植物成花调控分子机理的研究 | 第29-30页 |
| ·植物基因克隆方法 | 第30-34页 |
| ·基因克隆方法概述 | 第30-31页 |
| ·图位克隆法 | 第31页 |
| ·转座子标签法 | 第31-32页 |
| ·差异显示 | 第32页 |
| ·抑制性差减杂交 | 第32-34页 |
| ·本研究的目的、内容和意义 | 第34-36页 |
| 第二章 早实枳全发育时期cDNA文库的构建 | 第36-43页 |
| ·前言 | 第36页 |
| ·材料和方法 | 第36-40页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·总RNA提取及mRNA的分离 | 第36-37页 |
| ·mRNA的纯化 | 第37-38页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第38-39页 |
| ·cDNA与载体连接 | 第39页 |
| ·体外包装与文库扩增 | 第39-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-41页 |
| ·总RNA质量的检测 | 第40-41页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第41页 |
| ·文库质量的检测 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 早实枳不同发育阶段基因转录差异及表达分析 | 第43-65页 |
| ·前言 | 第43页 |
| ·材料和方法 | 第43-54页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·第一链cDNA合成 | 第44页 |
| ·第二链cDNA合成 | 第44-45页 |
| ·RsaⅠ的酶切 | 第45页 |
| ·接头的连接 | 第45-46页 |
| ·连接效率的检测 | 第46-47页 |
| ·第一次杂交 | 第47页 |
| ·第二次杂交 | 第47-48页 |
| ·利用Actin检测消减效果 | 第48-49页 |
| ·两次PCR扩增 | 第49-50页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第50-51页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第51页 |
| ·目的产物的克隆 | 第51-52页 |
| ·差减文库的构建 | 第52页 |
| ·杂交探针的制备 | 第52页 |
| ·插入片段的扩增与点膜 | 第52-53页 |
| ·杂交与显色 | 第53页 |
| ·差异克隆的选取 | 第53页 |
| ·序列同源性检索 | 第53页 |
| ·差异片段的实时定量分析 | 第53-54页 |
| ·载体构建和烟草遗传转化 | 第54页 |
| ·结果与分析 | 第54-62页 |
| ·RNA质量检测及mRNA分离 | 第54页 |
| ·双链cDNA合成及酶切效果 | 第54-55页 |
| ·接头连接效率检测 | 第55-56页 |
| ·差减文库构建 | 第56页 |
| ·斑点杂交筛选 | 第56-57页 |
| ·测序与同源检索 | 第57-58页 |
| ·功能基因分类 | 第58-59页 |
| ·成花相关基因实时定量分析 | 第59-61页 |
| ·F-BOX超量表达的烟草表型 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-65页 |
| 第四章 柑橘PtFLC和PtELF5克隆及其表达模式 | 第65-82页 |
| ·前言 | 第65页 |
| ·材料和方法 | 第65-67页 |
| ·材料 | 第65-66页 |
| ·PtFLC和PtELF5基因的克隆 | 第66-67页 |
| ·原位杂交分析 | 第67页 |
| ·载体构建与拟南芥转化 | 第67页 |
| ·结果分析 | 第67-79页 |
| ·PtFLC和PtELF5基因结构分析 | 第67-70页 |
| ·PtFLC和PtELF5实时定量分析 | 第70-71页 |
| ·PtFLC和PtELF5空间表达分析 | 第71-73页 |
| ·PtFLC选择性剪切的证据 | 第73-77页 |
| ·PtFLC在早实枳阶段转变过程中表达 | 第77-78页 |
| ·PtFLC和PtELF5在拟南芥中异位表达分析 | 第78-79页 |
| ·讨论 | 第79-82页 |
| 第五章 早实枳与普通枳童期阶段基因转录及差异分析 | 第82-97页 |
| ·前言 | 第82-83页 |
| ·材料与方法 | 第83页 |
| ·材料 | 第83页 |
| ·方法 | 第83页 |
| ·结果与分析 | 第83-93页 |
| ·材料的选取标准 | 第83-84页 |
| ·RNA质量检测 | 第84页 |
| ·正反差减文库构建及评估 | 第84-85页 |
| ·反向Northern筛选结果 | 第85页 |
| ·测序与同源检索 | 第85-87页 |
| ·鉴定成花相关ESTs | 第87页 |
| ·差异表达ESTs实时定量分析 | 第87-89页 |
| ·FT、TFL1和BAM空间表达分析 | 第89-91页 |
| ·PtSVP转化拟南芥表型分析 | 第91-93页 |
| ·讨论 | 第93-97页 |
| 第六章 早实枳TFL1/CEN同源基因分离及功能鉴定 | 第97-113页 |
| ·前言 | 第97-98页 |
| ·材料和方法 | 第98-100页 |
| ·材料 | 第98-99页 |
| ·总RNA提取和cDNA文库构建 | 第99页 |
| ·PtTFL1和PtTFL2全长cDNA分离 | 第99页 |
| ·PtTFL1和PtTFL2启动子的分离和信息学分析 | 第99页 |
| ·载体构建与拟南芥转化 | 第99-100页 |
| ·转基因植株的表型分析 | 第100页 |
| ·结果分析 | 第100-110页 |
| ·PtTFL1和PtTFL2全长cDNA序列分析 | 第100-101页 |
| ·TFL1/CEN在双子叶植物中进化分析 | 第101-102页 |
| ·PtTFL1和PtTFL2启动子结构分析 | 第102-103页 |
| ·PtTFL1和PtTFL2实时定量分析 | 第103-105页 |
| ·PtTFL1和PtTFL2在早实枳自剪过程中表达分析 | 第105-107页 |
| ·PtTFL1和PtTFL2在顶端分生组织中表达模式 | 第107-108页 |
| ·PtTFL1和PtTFL2转化拟南芥表型分析 | 第108-110页 |
| ·讨论 | 第110-113页 |
| ·PtTFL1和PtTFL2属于TFL1/CEN基因家族 | 第110-111页 |
| ·PtTFL1和PtTFL2在早实枳春梢中的表达模式 | 第111页 |
| ·PtTFL1和PtTFL2在柑橘自剪过程中的表达模式 | 第111-113页 |
| 第七章 转录组测序鉴定差异基因及分离成花相关的miRNA | 第113-121页 |
| ·前言 | 第113页 |
| ·材料方法 | 第113-115页 |
| ·材料 | 第113-114页 |
| ·通过转录组测序分离差异基因流程 | 第114-115页 |
| ·通过生物信息学分析鉴定早实枳成花相关miRNA的过程 | 第115页 |
| ·结果 | 第115-120页 |
| ·通过比较转录组分离早实枳和普通枳差异表达的基因 | 第115-117页 |
| ·通过转录组测序鉴定早实枳中成花相关的miRNA | 第117-120页 |
| ·讨论 | 第120-121页 |
| 第八章 全文小结 | 第121-124页 |
| 参考文献 | 第124-146页 |
| 附表 | 第146-164页 |
| 附表Ⅰ | 第146-151页 |
| 附表Ⅱ | 第151-156页 |
| 附表Ⅲ | 第156-160页 |
| 附表Ⅳ | 第160-164页 |
| 一、发表和已经准备的论文 | 第164-167页 |
| 第一作者论文 | 第164-166页 |
| 第二作者论文 | 第166-167页 |
| 二、摘要,会议论文 | 第167-168页 |
| 致谢 | 第168页 |
