| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-25页 |
| 1 核盘菌的研究进展 | 第14-17页 |
| ·核盘菌及其作物菌核病 | 第14页 |
| ·核盘菌的致病因子 | 第14-15页 |
| ·菌核病的防治 | 第15-16页 |
| ·生物防治 | 第16-17页 |
| 2 盾壳霉的研究进展 | 第17-21页 |
| ·盾壳霉的生物学特性 | 第17页 |
| ·盾壳霉的分布及多样性 | 第17-18页 |
| ·盾壳霉的生态学研究 | 第18-19页 |
| ·盾壳霉对菌核病的生物防治效果 | 第19页 |
| ·盾壳霉防治核盘菌的主要机制 | 第19-20页 |
| ·盾壳霉降解草酸的研究 | 第20-21页 |
| ·盾壳霉的分子生物学研究 | 第21页 |
| 3 真菌产生抗生素或毒素的研究 | 第21-22页 |
| 4 环境pH调控的研究进展 | 第22-24页 |
| ·受环境pH调控的基因 | 第22-23页 |
| ·pH调控的分子机理 | 第23-24页 |
| 5 研究内容和意义 | 第24-25页 |
| 第二章 碳氮源与环境pH值对盾壳霉产生AFS的影响 | 第25-40页 |
| 1 材料和方法 | 第25-29页 |
| ·供试菌株 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·试剂 | 第26页 |
| ·仪器与设备 | 第26页 |
| ·盾壳霉培养物滤液对核盘菌菌生长抑制作用的测定 | 第26页 |
| ·碳源对盾壳霉产生AFS的影响 | 第26-27页 |
| ·碳源与环境pH值对盾壳霉产生AFS的影响 | 第27页 |
| ·氮源对盾壳霉产生AFS的影响 | 第27-28页 |
| ·氮源与环境pH值对盾壳霉产生AFS的影响 | 第28页 |
| ·盾壳霉寄生核盘菌过程中AFS的产生 | 第28-29页 |
| ·核盘菌菌丝或菌核提取物作为营养物质对盾壳霉产生AFS的影响 | 第29页 |
| ·数据统计 | 第29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-38页 |
| ·碳源对盾壳霉产生AFS的影响 | 第29-31页 |
| ·碳源与环境pH值对盾壳霉产生AFS的影响 | 第31-33页 |
| ·氮源对盾壳霉产生AFS的影响 | 第33-34页 |
| ·氮源与环境pH值对盾壳霉产生AFS的影响 | 第34-36页 |
| ·盾壳霉寄生核盘菌过程中AFS的产生 | 第36-37页 |
| ·核盘菌菌丝或菌核提取物作为营养物质对盾壳霉产生AFS的影响 | 第37-38页 |
| 3 讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 酸性环境对盾壳霉产生AFS及对AFS活性的影响 | 第40-49页 |
| 1 材料和方法 | 第40-43页 |
| ·菌株 | 第40页 |
| ·培养基 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40-41页 |
| ·仪器与设备 | 第41页 |
| ·盾壳霉培养物滤液对核盘菌菌生长抑制率的测定 | 第41页 |
| ·盐酸营造的酸性环境对盾壳霉产生AFS的影响 | 第41页 |
| ·环境pH值对AFS活性的影响 | 第41-42页 |
| ·盾壳霉分生孢子在草酸出现时的防病效果 | 第42页 |
| ·数据统计分析 | 第42-43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-47页 |
| ·盐酸营造的酸性环境对盾壳霉产生AFS的影响 | 第43-44页 |
| ·环境pH值对盾壳霉AFS活性的影响 | 第44-45页 |
| ·盾壳霉分生孢子在草酸出现时的防病效果 | 第45-47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 环境pH值调控盾壳霉产生AFS的分子机理 | 第49-64页 |
| 1 材料和方法 | 第50-54页 |
| ·供试菌株 | 第50页 |
| ·培养基 | 第50页 |
| ·试剂 | 第50-51页 |
| ·仪器与设备 | 第51页 |
| ·核酸的提取 | 第51页 |
| ·盾壳霉pacC同源序列的克隆 | 第51-52页 |
| ·盾壳霉cmpacC基因全长的克隆 | 第52页 |
| ·Southern杂交分析 | 第52-54页 |
| ·cmpacC基因的系统发育进化分析 | 第54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-63页 |
| ·盾壳霉中pacC基因同源片段的克隆 | 第54-56页 |
| ·盾壳霉中pacC同源基因5'末端的克隆 | 第56页 |
| ·盾壳霉中pacC同源基因3'末端序列的克隆 | 第56-57页 |
| ·盾壳霉pacC同源基因序列拼接 | 第57-58页 |
| ·Southern杂交分析 | 第58-59页 |
| ·cmpacC序列分析 | 第59-62页 |
| ·cmpacC基因系统发育进化分析 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-64页 |
| 第五章 cmpacC的表达模式分析及启动子克隆 | 第64-80页 |
| 1 材料和方法 | 第65-73页 |
| ·供试菌株 | 第65页 |
| ·培养基 | 第65页 |
| ·试剂 | 第65-66页 |
| ·仪器与设备 | 第66页 |
| ·核酸的提取 | 第66页 |
| ·盾壳霉actin同源片段的克隆 | 第66-67页 |
| ·cmact1序列分析 | 第67页 |
| ·不同环境pH下cmpacC,cmch1或cmg1的表达模式分析 | 第67-69页 |
| ·cmpacC基因侧翼序列的克隆 | 第69-73页 |
| 2 结果与分析 | 第73-78页 |
| ·盾壳霉actin基因同源片段的克隆及分析 | 第73-75页 |
| ·不同环境pH下cmpacC,cmch1或cmg1的表达模式 | 第75-76页 |
| ·cmpacC侧翼序列的克隆及分析 | 第76-78页 |
| 3 讨论 | 第78-80页 |
| 第六章 盾壳霉cmcreA基因的克隆和表达分析 | 第80-90页 |
| 1 材料和方法 | 第80-85页 |
| ·供试菌株 | 第80-81页 |
| ·培养基 | 第81页 |
| ·试剂 | 第81页 |
| ·仪器与设备 | 第81页 |
| ·盾壳霉creA同源基因的克隆 | 第81-82页 |
| ·cmcreA 3'末端序列的克隆 | 第82页 |
| ·cmcreA序列分析 | 第82-83页 |
| ·cmcreA的表达模式分析 | 第83-85页 |
| 2 结果与分析 | 第85-89页 |
| ·盾壳霉creA基因同源片段的克隆 | 第85页 |
| ·cmcreA基因cDNA 3'末端序列的克隆 | 第85-86页 |
| ·cmcreA的序列分析 | 第86-87页 |
| ·cmcreA的表达模式分析 | 第87-89页 |
| 3 讨论 | 第89-90页 |
| 第七章 cmpalF基因的克隆及其功能验证 | 第90-108页 |
| 1 材料和方法 | 第90-100页 |
| ·供试菌株 | 第90页 |
| ·培养基 | 第90-91页 |
| ·试剂 | 第91-92页 |
| ·仪器与设备 | 第92页 |
| ·PCR产物纯化 | 第92页 |
| ·PCR产物加A | 第92-93页 |
| ·质粒提取 | 第93页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第93页 |
| ·农杆菌感受态的热击转化 | 第93-94页 |
| ·cmpalF的敲除 | 第94-98页 |
| ·cmpalF敲除突变体对环境pH的适应 | 第98-99页 |
| ·cmpalF对盾壳霉抗真菌物质产生的影响 | 第99页 |
| ·cmpalF对cmpacC表达的影响 | 第99-100页 |
| ·数据统计分析 | 第100页 |
| 2 结果与分析 | 第100-106页 |
| ·cmpalF的敲除 | 第100-102页 |
| ·cmpacF敲除突变体对环境pH的适应 | 第102-103页 |
| ·cmpalF对盾壳霉产生抗真菌物质的影响 | 第103-105页 |
| ·cmpalF对cmpacC表达的影响 | 第105-106页 |
| 3、讨论 | 第106-108页 |
| 第八章 环境pH值诱导盾壳霉差异表达基因的分析 | 第108-121页 |
| 1 材料和方法 | 第108-112页 |
| ·供试菌株 | 第108-109页 |
| ·培养基 | 第109页 |
| ·试剂 | 第109页 |
| ·仪器设备 | 第109页 |
| ·盾壳霉菌丝的培养和收集 | 第109页 |
| ·差异表达基因的克隆和筛选 | 第109-110页 |
| ·数据处理的步骤 | 第110-111页 |
| ·标签的基因注释、标准化和确定基因表达量返回信息分析流程 | 第111-112页 |
| ·差异表达基因的筛选 | 第112页 |
| ·差异表达基因的功能分类 | 第112页 |
| 2 结果与分析 | 第112-120页 |
| ·盾壳霉不同环境pH值下菌丝RNA的提取及质量检测 | 第112-113页 |
| ·测序评估 | 第113-117页 |
| ·差异表达基因的筛选 | 第117-118页 |
| ·差异表达基因的功能分类 | 第118-119页 |
| ·与盾壳霉产生抗真菌物质相关的差异表达的基因 | 第119-120页 |
| 3 讨论 | 第120-121页 |
| 第九章 结论与展望 | 第121-124页 |
| 1 结论 | 第121-122页 |
| 2 展望 | 第122-124页 |
| 参考文献 | 第124-136页 |
| 致谢 | 第136-137页 |
| 附录1 盾壳霉DNA提取 | 第137-138页 |
| 附录2 盾壳霉总RNA提取 | 第138-139页 |
| 附录3 PCR扩增DNA片段的回收与纯化 | 第139-140页 |
| 附录4 PCR扩增产物的克隆测序 | 第140-142页 |
| 附录5 5'末端序列的克隆(5'RACE) | 第142-147页 |
| 附录6 3'末端序列的克隆(3'RACE) | 第147-150页 |
| 附录7 cmpacC及其侧翼序列 | 第150-153页 |
| 附录8 博士在读期间已发表的文章 | 第153页 |
