首页--医药、卫生论文--内科学论文--传染病论文--病毒性肝炎论文

基于TPPⅡ作用的HBcAg诱导HBV特异性CTL反应的实验研究

摘要第3-6页
abstract第6-8页
缩略词表第13-15页
绪论第15-18页
第一部分 重组腺病毒载体Adv-HBcAg-TPPⅡ的构建及病毒包装、纯化和鉴定第18-49页
    1.前言第18-19页
    2.材料和方法第19-32页
        2.1 主要仪器和试剂第19-20页
        2.2 主要试剂配制第20-25页
        2.4 设计引物第25页
        2.5 pAdeno-MCMV-EGFP-P2A-HBcAg-3FLAG和p Adeno-MCMV-EGFP-P2A-HBcAg-TPPⅡ-3FLAG质粒的构建第25-28页
        2.6 重组腺病毒的包装和表达第28-32页
        2.7 统计学处理第32页
    3.结果第32-46页
        3.1 慢腺毒载体图谱第32-34页
        3.2 HBcAg-TPPⅡ和 HBcAg基因片段PCR扩增结果第34-35页
        3.3 重组克隆的菌落PCR鉴定第35-36页
        3.4 阳性克隆的测序结果第36-44页
        3.5 重组腺病毒滴度测定结果第44页
        3.6 重组腺病毒转染293T细胞转染率第44页
        3.7 重组腺病毒转染率第44-45页
        3.8 重组腺病毒目的蛋白的检测结果第45-46页
    4.讨论第46-48页
    5.小结第48-49页
第二部分 Adv-HBcAg-TPPⅡ诱导特异性CTL反应的体外研究第49-70页
    1.前言第49-50页
    2.材料和方法第50-59页
        2.1 主要仪器和试剂第50-52页
        2.2 小鼠髓源性DC分离和培养第52页
        2.3 重组腺病毒转染DC第52-53页
        2.4 DC表面分子检测第53页
        2.5 细胞因子IL-12P70 的检测第53-54页
        2.6 脾淋巴细胞的获取第54页
        2.7 T淋巴细胞的分离(尼龙毛柱法)第54-55页
        2.8 T淋巴细胞分泌的细胞因子的检测第55-56页
        2.9 T细胞内因子检测第56-57页
        2.11 小鼠肥大细胞瘤细胞(P815/c)细胞株的培养第57-58页
        2.12 特异性CTL检测第58-59页
        2.13 统计学处理第59页
    3.结果第59-68页
        3.1 不同时期DC的形态第59-61页
        3.2 重组腺病毒转染DC细胞转染率第61-62页
        3.3 Adv-HBcAg-TPPⅡ DC细胞表面分子的表达第62-63页
        3.4 Adv-HBcAg-TPPⅡ促进DC分泌IL-12P第63-64页
        3.5 Adv-HBcAg-TPPⅡ刺激Th1 型细胞因子的分泌第64-67页
        3.6 Adv-HBcAg-TPPⅡ促进T淋巴细胞增殖第67页
        3.7 Adv-HBcAg-TPPⅡ诱导CTL反应第67-68页
    4.讨论第68-69页
    5.小结第69-70页
第三部分 Adv-HBcAg–TPPⅡ免疫HLA-A2 限制性C57BL/6 小鼠诱导特异性CTL反应的体内研究第70-92页
    1.前言第70页
    2.材料和方法第70-81页
        2.1 主要试剂和仪器第70-72页
        2.2 实验动物的处理第72-73页
        2.3 小鼠脾淋巴细胞的制备第73页
        2.4 T淋巴细胞的分离(尼龙毛柱法)第73-74页
        2.5 T淋巴细胞分泌的细胞因子的检测第74-75页
        2.6 T细胞内因子检测第75页
        2.7 T淋巴细胞增殖活性检测第75-76页
        2.8 小鼠肥大瘤细胞P815 细胞株的培养第76页
        2.9 特异性CTL检测第76-77页
        2.10 RT-PCR法检测JAK/STAT信号通路的各指标表达水平第77-78页
        2.11 Western bloting法检测JAK/STAT信号通路第78-81页
        2.12 统计学处理第81页
    3.结果第81-90页
        3.1 重组腺病毒诱导小鼠T淋巴细胞分泌细胞因子第81-84页
        3.2 CD8α+IFN-γ+T和 CD4+IFN-γ+T淋巴细胞的检测第84-86页
        3.3 重组腺病毒Adv-HBcAg-TPPⅡ促进T淋巴细胞的增殖第86-87页
        3.4 重组腺病毒Adv-HBcAg-TPPⅡ增强特异性CTL反应第87-88页
        3.5 Adv-HBcAg-TPPⅡ对 JAK/STAT信号通路第88-90页
    4.讨论第90-91页
    5.小结第91-92页
第四部分 Adv-HBcAg-TPPⅡ体内免疫HBV转基因小鼠诱导特异性CTL反应的研究第92-127页
    1.前言第92页
    2.材料和方法第92-108页
        2.1 主要试剂和仪器第92-94页
        2.2 实验动物饲养及处理第94页
        2.3 血清HBV DNA、HBsAg、以及AST和 ALT的检测第94-95页
        2.4 肝组织HE染色第95-97页
        2.5 肝组织HBcAg和 HBsAg免疫组化染色第97-100页
        2.6 小鼠脾淋巴细胞的制备第100-101页
        2.7 T淋巴细胞的分离(尼龙毛柱法)第101-102页
        2.8 T淋巴细胞分泌的细胞因子的检测第102-103页
        2.9 T细胞内因子检测第103页
        2.10 T淋巴细胞增殖活性检测第103页
        2.11 小鼠肥大瘤细胞P815/c细胞株的培养第103-104页
        2.12 特异性CTL检测第104-105页
        2.13 RT-PCR法检测T-bet、GATA-3的m RNA表达水平第105-106页
        2.14 Western blotting检测第106-108页
        2.15 统计学处理第108页
    3.结果第108-124页
        3.1 血清HBV DNA、HBsAg、以及AST和 ALT的检测第108-112页
        3.2 肝组织HE染色第112页
        3.3 肝组织HBcAg和 HBsAg免疫组织化学分析第112-114页
        3.4 重组腺病毒免疫小鼠后诱导T淋巴细胞分泌细胞因子第114-117页
        3.5 CD8α+IFN-γ+T和 CD4+IFN-γ+T淋巴细胞的检测第117-120页
        3.6 T细胞增殖活性检测第120页
        3.7 特异性CTL反应第120-121页
        3.8 重组腺病毒对T-bet和 GATA-3 的影响第121-124页
    4.讨论第124-126页
    5.小结第126-127页
结论第127-128页
参考文献第128-139页
致谢第139-141页
攻读博士期间发表的论文第141-143页

论文共143页,点击 下载论文
上一篇:miR-136-5p通过靶向IKKβ调控NF-κB信号通路影响脊髓损伤炎症因子表达的机制研究
下一篇:小学《典范英语》阅读教材使用现状与对策研究--以秦皇岛市Q小学为例