| 中文摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 主要缩略词 | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-24页 |
| 1.1 炎症反应和NF-kB激活调控 | 第12-14页 |
| 1.1.1 炎症反应介绍 | 第12页 |
| 1.1.2 NF-kB功能概述 | 第12-13页 |
| 1.1.3 NF-kB在炎症反应中的作用 | 第13-14页 |
| 1.1.4 NF-kB相关的疾病 | 第14页 |
| 1.2 IKK复合物的调节功能和疾病 | 第14-17页 |
| 1.2.1 IKK复合物 | 第14-16页 |
| 1.2.2 IKK的结构域及其调节功能 | 第16-17页 |
| 1.2.3 IKKγ和疾病 | 第17页 |
| 1.3 蛋白质寡聚化的生理功能 | 第17-19页 |
| 1.3.1 寡聚化和寡聚物简介 | 第17-18页 |
| 1.3.2 蛋白质寡聚化在信号通路中的作用 | 第18-19页 |
| 1.3.3 蛋白质寡聚化在蛋白降解中的作用 | 第19页 |
| 1.4 ANGPTL8和糖脂代谢 | 第19-24页 |
| 1.4.1 ANGPTL8简介 | 第20页 |
| 1.4.2 ANGPTL8和糖代谢 | 第20-21页 |
| 1.4.3 ANGPTL8和脂代谢 | 第21-22页 |
| 1.4.4 脂质代谢和炎症 | 第22-24页 |
| 2 实验试剂和仪器 | 第24-32页 |
| 2.1 实验试剂 | 第24-27页 |
| 2.2 细胞系 | 第27-28页 |
| 2.3 抗体 | 第28页 |
| 2.4 实验仪器 | 第28-29页 |
| 2.5 实验中相关试剂的配制 | 第29-32页 |
| 3 实验方法 | 第32-44页 |
| 3.1 各种载体的构建以及质粒的提取 | 第32-34页 |
| 3.1.1 质粒扩增 | 第32页 |
| 3.1.2 质粒提取 | 第32页 |
| 3.1.3 真核及原核表达载体的构建 | 第32-34页 |
| 3.2 ANGPTL8蛋白的表达和纯化 | 第34-35页 |
| 3.3 细胞培养、传代、瞬时转染和冻存 | 第35-36页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第35页 |
| 3.3.2 细胞传代 | 第35页 |
| 3.3.3 细胞冻存 | 第35-36页 |
| 3.3.4 细胞瞬时转染 | 第36页 |
| 3.4 Westernblot实验 | 第36-37页 |
| 3.5 免疫共沉淀实验 | 第37-38页 |
| 3.6 硫黄素T(ThTFluorescence)荧光检测实验 | 第38-39页 |
| 3.7 荧光共定位实验 | 第39页 |
| 3.8 透射电子显微镜(TEM)检测实验 | 第39-40页 |
| 3.9 圆二色光谱(CD)检测 | 第40页 |
| 3.10 ANGPTL8二级结构模拟 | 第40-41页 |
| 3.11 动态光散射(DLS)实验 | 第41页 |
| 3.12 分子排阻色谱(SEC)实验 | 第41-43页 |
| 3.13 点杂交(Dotblot)实验 | 第43-44页 |
| 4 实验结果 | 第44-56页 |
| 4.1 ANGPTL8和IKKγ在细胞内有共定位 | 第44-45页 |
| 4.2 ANGPTL8体外聚集性质 | 第45-50页 |
| 4.2.1 ANGPTL8蛋白表达和纯化 | 第46页 |
| 4.2.2 硫黄素T荧光实验(ThT)和圆二色光谱实验(CD)分析ANGPTL8聚集过程中二级结构的变化 | 第46-47页 |
| 4.2.3 动态光散射(DLS)分析ANGPTL8聚集过程中的粒径变化 | 第47-48页 |
| 4.2.4 透射电镜(TEM)分析ANGPTL8聚集物的结构 | 第48-49页 |
| 4.2.5 点杂交(Dotblot)分析ANGPTL8聚集中的结构变化 | 第49-50页 |
| 4.3 ANGPTL8相关截短突变质粒的构建 | 第50-52页 |
| 4.4 IKKγ降解需要ANGPTL8的自身寡聚化 | 第52-56页 |
| 4.4.1 ANGPTL8发生自身寡聚化的重要结构为26-70aa片段 | 第52页 |
| 4.4.2 ANGPTL8能够通过CC1结构域和p62结合 | 第52-53页 |
| 4.4.3 ANGPTL8能够通过26-70aa片段降解IKKγ | 第53-54页 |
| 4.4.4 分子筛分析ANGPTL8、p62、IKKγ形成的蛋白复合物 | 第54-56页 |
| 5 讨论与展望 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 综述 | 第66-81页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
