| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第10-20页 |
| 1.1 细菌拟核 | 第10页 |
| 1.2 拟核相关蛋白 | 第10-15页 |
| 1.2.1 类组蛋白拟核结构蛋白H-NS | 第12页 |
| 1.2.2 热不稳定蛋白HU | 第12-13页 |
| 1.2.3 整合宿主因子IHF | 第13-15页 |
| 1.2.4 倒位刺激因子Fis | 第15页 |
| 1.3 分枝杆菌 | 第15-19页 |
| 1.3.1 结核分枝杆菌 | 第15-16页 |
| 1.3.2 耻垢分枝杆菌 | 第16页 |
| 1.3.3 分枝杆菌拟核蛋白研究进展 | 第16-19页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 第二章 耻垢分枝杆菌整合宿主因子MsIHF的表达与纯化 | 第20-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 实验室常用仪器 | 第20页 |
| 2.1.2 实验室常用试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.3 实验室常用酶 | 第21页 |
| 2.1.4 实验室常用载体和菌株 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法及步骤 | 第22-34页 |
| 2.2.1 基因克隆及质粒构建 | 第22-27页 |
| 2.2.2 目的蛋白的表达与纯化 | 第27-34页 |
| 2.3 实验结果分析 | 第34-41页 |
| 2.3.1 基因克隆结果分析 | 第34-35页 |
| 2.3.2 Ni柱亲和层析结果分析 | 第35-38页 |
| 2.3.3 离子交换层析结果分析 | 第38-39页 |
| 2.3.4 凝胶过滤层析结果分析 | 第39-41页 |
| 2.4 实验小结 | 第41-42页 |
| 第三章 MsIHF-DNA复合物结构的解析 | 第42-58页 |
| 3.1 实验材料 | 第42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42-45页 |
| 3.2.1 晶体的初筛 | 第42-43页 |
| 3.2.2 晶体的优化 | 第43-44页 |
| 3.2.3 晶体的后处理 | 第44页 |
| 3.2.4 数据的收集及处理 | 第44-45页 |
| 3.3 实验结果分析 | 第45-56页 |
| 3.3.1 MsIHF-DNA晶体初筛结果分析 | 第45-46页 |
| 3.3.2 MsIHF-DNA晶体优化结果分析 | 第46-48页 |
| 3.3.3 MsIHF-DNA晶体数据 | 第48-50页 |
| 3.3.4 MsIHF-DNA整体结构 | 第50-51页 |
| 3.3.5 MsIHF在结构中为同源二聚体 | 第51-53页 |
| 3.3.6 MsIHF与DNA相互作用 | 第53-56页 |
| 3.3.7 DNA构象改变 | 第56页 |
| 3.4 实验小结 | 第56-58页 |
| 第四章 MsIHF的生化性质研究 | 第58-66页 |
| 4.1 分析超速离心实验验证MsIHF在溶液中为二聚体 | 第58-60页 |
| 4.1.1 分析超速离心实验原理与应用 | 第58页 |
| 4.1.2 MsIHF分析超速离心实验结果 | 第58-60页 |
| 4.2 化学交联实验验证MsIHF在溶液中为二聚体 | 第60-62页 |
| 4.2.1 化学交联实验原理与应用 | 第60页 |
| 4.2.2 MsIHF化学交联实验结果 | 第60-62页 |
| 4.3 BLI技术检测MsIHF突变体与DNA的互作 | 第62-65页 |
| 4.3.1 BLI技术原理及应用 | 第62页 |
| 4.3.2 BLI技术检测MsIHF突变体与DNA亲和力实验结果 | 第62-65页 |
| 4.4 实验小结 | 第65-66页 |
| 结论与讨论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 附录 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第78页 |
