| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-36页 |
| 1.1 小麦赤霉病 | 第14页 |
| 1.2 禾谷镰刀菌 | 第14-17页 |
| 1.2.1 禾谷镰刀菌的生物学特性 | 第14-15页 |
| 1.2.2 禾谷镰刀菌的生活史和侵染循环 | 第15-17页 |
| 1.2.3 禾谷镰刀菌的寄主范围 | 第17页 |
| 1.3 前体mRNA的剪切和拼接 | 第17-24页 |
| 1.3.1 内含子剪接过程 | 第18页 |
| 1.3.2 前体mRNA剪接过程及剪接体的结构和组份 | 第18-23页 |
| 1.3.3 剪接体中三联体特异蛋白Snu66 | 第23-24页 |
| 1.4 嘌呤核苷酸代谢调控 | 第24-34页 |
| 1.4.1 嘌呤核苷酸的合成代谢 | 第24-32页 |
| 1.4.2 嘌呤核苷酸的分解代谢 | 第32-34页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第34-36页 |
| 第二章 禾谷镰刀菌mRNA剪接基因SNU66 的功能分析 | 第36-66页 |
| 2.1 前言 | 第36页 |
| 2.2 材料与方法 | 第36-42页 |
| 2.2.1 载体、供试菌株和培养条件 | 第36-37页 |
| 2.2.2 原生质体转化方法和表型测试 | 第37-38页 |
| 2.2.3 S37 全基因组测序鉴定FgSNU66 基因的突变位点 | 第38-39页 |
| 2.2.4 RNA提取、反转录和RT-PCR验证 | 第39-40页 |
| 2.2.5 RNA-seq数据分析 | 第40页 |
| 2.2.6 Fgprp4 中原位突变FgSNU66~（9aaD）、FgSNU66~（R644*）或FgSNU66~（?CT27） | 第40页 |
| 2.2.7 构建FgSNU66和FgHUB1 的基因敲除片段 | 第40-41页 |
| 2.2.8 鉴定FgSnu66 的磷酸化位点 | 第41页 |
| 2.2.9 酵母双杂交互作 | 第41页 |
| 2.2.10 获得FgSNU66~（T418A S420A S422A）和FgSNU66~（T445A S446A）-GFP转化子 | 第41页 |
| 2.2.11 Western blot和免疫共沉淀鉴定FgSnu66~（CT50）与Fg Snu66~（N596）是否互作 | 第41-42页 |
| 2.3 结果与分析 | 第42-61页 |
| 2.3.1 角变菌株S37在FgSNU66 基因上具有9 aa序列重复突变 | 第42-43页 |
| 2.3.2 Snu66 的序列保守性和进化分析 | 第43-45页 |
| 2.3.3 FgSNU66的9 aa序列重复突变可以恢复Fgprp4 突变体的缺陷 | 第45-48页 |
| 2.3.4 S37 菌株部分恢复了Fgprp4 突变体的内含子剪接效率缺陷 | 第48-49页 |
| 2.3.5 进一步发现19个Fgprp4 角变菌株在FgSNU66 发生突变 | 第49-53页 |
| 2.3.6 FgSNU666 的终止突变R644*可部分恢复Fgprp4 突变体的生长缺陷 | 第53页 |
| 2.3.7 R477H不影响FgSnu66 的核定位 | 第53-54页 |
| 2.3.8 FgSnu66的C端27 aa缺失可恢复Fgprp4 突变体的表型缺陷 | 第54-55页 |
| 2.3.9 FgSNU66和FgHUB1 在禾谷镰刀菌中推测为敲除致死基因 | 第55-56页 |
| 2.3.10 FgSnu66CT50与Fg Snu6N596之间不互作 | 第56-57页 |
| 2.3.11 FgSnu66的CT24 区域抑制其与FgPrp8和FgPrp6 的互作 | 第57-59页 |
| 2.3.12 FgSnu66的C端正调控其与FgHub1 的互作 | 第59页 |
| 2.3.13 FgSnu66 磷酸化位点T418、S420和S422 可能对自身功能很重要 | 第59-61页 |
| 2.4 结论与讨论 | 第61-65页 |
| 2.5 本章小结 | 第65-66页 |
| 第三章 嘌呤核苷酸代谢途径基因在禾谷镰刀菌生长发育和致病中的调控研究 | 第66-92页 |
| 3.1 前言 | 第66页 |
| 3.2 材料与方法 | 第66-68页 |
| 3.2.1 载体、供试菌株和培养条件 | 第66-67页 |
| 3.2.2 禾谷镰刀菌侵染寄主的显微结构和亚细胞定位观察 | 第67页 |
| 3.2.3 外源物质添加实验 | 第67-68页 |
| 3.2.4 DAPI染色和WGA488 染色 | 第68页 |
| 3.2.5 实时荧光定量PCR | 第68页 |
| 3.3 结果与分析 | 第68-89页 |
| 3.3.1 编码核酸/核苷/碱基脱氨酶结构域基因的预测和表达分析 | 第68-71页 |
| 3.3.2 禾谷镰刀菌编码脱氨酶基因的敲除突变体获得 | 第71-74页 |
| 3.3.3 禾谷镰刀菌嘌呤核苷酸代谢调控基因 | 第74-75页 |
| 3.3.4 ACD16 对禾谷镰刀菌的生长发育及致病性至关重要 | 第75-76页 |
| 3.3.5 外源添加腺嘌呤和组氨酸可恢复acd16 突变体的生长缺陷 | 第76-77页 |
| 3.3.6 ADE12 对禾谷镰刀菌生长发育和致病性至关重要 | 第77-79页 |
| 3.3.7 补救途径基因敲除不影响生长发育和致病性 | 第79-80页 |
| 3.3.8 ACD1 缺失不影响禾谷镰刀菌的生长速率 | 第80页 |
| 3.3.9 ACD1 缺失影响无性繁殖和有性生殖 | 第80-82页 |
| 3.3.10 ACD1 对禾谷镰刀菌的致病性发挥关键作用 | 第82-84页 |
| 3.3.11 acd1 突变体在侵染过程中的缺陷 | 第84-85页 |
| 3.3.12 外源添加IMP和腺苷酸可恢复acd1 的有性生殖缺陷 | 第85页 |
| 3.3.13 嘌呤核苷酸从头合成基因在有性发育时期表达量低 | 第85-87页 |
| 3.3.14 IMD1-4 对禾谷镰刀菌各个生长发育阶段和致病性很重要 | 第87-89页 |
| 3.3.15 ACD1-GFP融合蛋白的亚细胞定位 | 第89页 |
| 3.4 结论与讨论 | 第89-91页 |
| 3.5 本章小结 | 第91-92页 |
| 第四章 全文总结 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-102页 |
| 附录 | 第102-129页 |
| 缩略词 | 第129-130页 |
| 致谢 | 第130-131页 |
| 个人简历 | 第131页 |
