摘要 | 第6-8页 |
abstract | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第11-13页 |
第二章 材料与方法 | 第13-26页 |
2.1 实验试剂与仪器 | 第13-17页 |
2.1.1 实验动物 | 第13页 |
2.1.2 实验试剂 | 第13-15页 |
2.1.3 实验仪器及统计软件 | 第15页 |
2.1.4 试剂配方 | 第15-17页 |
2.2 实验流程与方法 | 第17-26页 |
2.2.1 SD大鼠坐骨神经夹伤模型的制备 | 第17页 |
2.2.2 蛋白的提取和定量 | 第17-18页 |
2.2.3 Western-blot | 第18页 |
2.2.4 RNA的提取 | 第18-19页 |
2.2.5 逆转录 | 第19页 |
2.2.6 RT-PCR | 第19-20页 |
2.2.7 免疫组织化学染色和免疫细胞化学染色 | 第20-21页 |
2.2.8 施万细胞的培养纯化 | 第21-22页 |
2.2.9 背根神经节神经元的培养纯化 | 第22页 |
2.2.10 背根神经节神经元和施万细胞共培养成髓鞘模型的建立 | 第22-23页 |
2.2.11 针对EphA4的有效siRNA片段筛选 | 第23页 |
2.2.12 细胞EdU增殖实验 | 第23-24页 |
2.2.13 Trans-well细胞迁移实验 | 第24页 |
2.2.14 细胞分化实验 | 第24页 |
2.2.15 大鼠坐骨神经夹伤模型 | 第24-25页 |
2.2.16 大鼠坐骨神经夹伤后原位注射修饰siRNA干扰模型 | 第25-26页 |
第三章 结果 | 第26-42页 |
3.1 EphA4的细胞表达定位 | 第26-27页 |
3.2 Eph家族及其配体在背根神经节神经元和施万细胞中的表达 | 第27页 |
3.3 EphA4的组织表达定位 | 第27-28页 |
3.4 大鼠坐骨神经夹伤模型髓鞘形成相关蛋白的表达变化及定位 | 第28-31页 |
3.5 成髓鞘模型的建立 | 第31-34页 |
3.5.1 背根神经节的植块的培养和纯化 | 第31-32页 |
3.5.2 施万细胞的培养和纯化 | 第32-33页 |
3.5.3 施万细胞和背根神经节神经元共培养成髓鞘模型的建立 | 第33-34页 |
3.6 体外成髓鞘过程中髓鞘形成相关基因的表达变化 | 第34-35页 |
3.7 EphA4的siRNA有效片段筛选 | 第35-36页 |
3.8 EphA4对施万细胞增殖的影响 | 第36-37页 |
3.9 EphA4对施万细胞迁移的影响 | 第37-38页 |
3.10 EphA4对施万细胞分化的影响 | 第38-39页 |
3.10.1 体外分化模型的建立 | 第38页 |
3.10.2 分化模型中相关基因的表达变化情况 | 第38-39页 |
3.10.3 EphA4对施万细胞分化的影响 | 第39页 |
3.11 大鼠坐骨神经夹伤后原位注射修饰后EGFP-siRNA | 第39-40页 |
3.12 EphA4对坐骨神经夹伤后再生轴突髓鞘化的影响 | 第40-42页 |
第四章 讨论 | 第42-44页 |
第五章 结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-48页 |
英文缩写词表 | 第48-50页 |
附录1(相关引物序列) | 第50-52页 |
附录2(siRNA产品序列) | 第52-53页 |
综述 | 第53-63页 |
参考文献 | 第58-63页 |
致谢 | 第63页 |