摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
1 研究背景 | 第8-24页 |
1.1 全球珊瑚的分布 | 第8页 |
1.2 环境因子对珊瑚礁生态系统的影响 | 第8-9页 |
1.3 珊瑚的分类及鹿角杯形珊瑚简介 | 第9-10页 |
1.4 虫黄藻简介 | 第10-12页 |
1.4.1 虫黄藻的分类 | 第10-11页 |
1.4.2 虫黄藻的生活史 | 第11-12页 |
1.5 珊瑚与虫黄藻的关系 | 第12-14页 |
1.6 珊瑚的白化及其对生态的影响 | 第14-17页 |
1.6.1 珊瑚的白化 | 第14-16页 |
1.6.2 珊瑚礁白化的生态影响 | 第16-17页 |
1.7 我国珊瑚礁白化的研究现状 | 第17-18页 |
1.8 NO系统简介 | 第18-20页 |
1.8.1 NO系统组成简介 | 第19页 |
1.8.2 NOS的分类 | 第19-20页 |
1.9 NO系统在机体的生理调节功能 | 第20-21页 |
1.10 NO系统在其他生物中的研究进展 | 第21-22页 |
1.10.1 NO系统在低等动物中的研究 | 第21页 |
1.10.2 NO系统在鱼类、甲壳等动物中的研究 | 第21-22页 |
1.11 本研究的目的及意义 | 第22-24页 |
1.11.1 研究意义 | 第22页 |
1.11.2 研究目的 | 第22-24页 |
2 材料和方法 | 第24-39页 |
2.1 实验材料 | 第24-27页 |
2.1.1 实验生物及菌株 | 第24页 |
2.1.2 本实验所用到的试剂耗材 | 第24-27页 |
2.2 实验方法 | 第27-39页 |
2.2.1 鹿角杯形珊瑚-虫黄藻总RNA的制备 | 第27页 |
2.2.2 珊瑚-虫黄藻cDNA第一链的合成 | 第27-28页 |
2.2.3 PdNOS基因全长的扩增 | 第28-29页 |
2.2.4 虫黄藻NOS基因全长的扩增 | 第29-31页 |
2.2.5 基因序列及蛋白功能分析 | 第31页 |
2.2.6 NOS基因ORF框目的片段扩增 | 第31-34页 |
2.2.7 重组表达载体的构建 | 第34页 |
2.2.8 PdNOS和虫黄藻NOS的重组蛋白的表达 | 第34-37页 |
2.2.9 鹿角杯形珊瑚热胁迫实验 | 第37-38页 |
2.2.10 热胁迫实验下样品总蛋白的测定 | 第38页 |
2.2.11 热胁迫实验下NO含量的测定 | 第38页 |
2.2.12 热胁迫实验下NOS酶比活力的测定 | 第38-39页 |
3 实验结果 | 第39-63页 |
3.1 珊瑚-虫黄藻cDNA文库制备及基因全长的获得 | 第39-40页 |
3.2 PdNOS基因序列及蛋白结构特征 | 第40-50页 |
3.2.1 PdNOS基因的cDNA序列特征 | 第40-44页 |
3.2.2 PdNOS分子量及等电点分析 | 第44-45页 |
3.2.3 PdNOS蛋白质结构域预测 | 第45页 |
3.2.4 PdNOS功能位点分析 | 第45-47页 |
3.2.5 PdNOS蛋白信号肽预测 | 第47-48页 |
3.2.6 PdNOS跨膜区预测 | 第48页 |
3.2.7 PdNOS的亚细胞定位预测 | 第48-49页 |
3.2.8 PdNOS蛋白三维结构的预测 | 第49页 |
3.2.9 PdNOS的同源性分析 | 第49-50页 |
3.3 虫黄藻NOS基因序列及蛋白结构特征 | 第50-58页 |
3.3.1 虫黄藻NOS基因的序列分析 | 第50-53页 |
3.3.2 虫黄藻NOS分子量及等电点分析 | 第53页 |
3.3.3 虫黄藻NOS蛋白质结构域预测 | 第53-54页 |
3.3.4 虫黄藻NOS功能位点分析 | 第54-55页 |
3.3.5 虫黄藻NOS蛋白信号肽预测 | 第55页 |
3.3.6 虫黄藻NOS跨膜区预测 | 第55-56页 |
3.3.7 虫黄藻NOS的亚细胞定位预测 | 第56页 |
3.3.8 虫黄藻NOS蛋白三维结构的预测 | 第56-57页 |
3.3.9 虫黄藻NOS的同源性分析 | 第57-58页 |
3.4 珊瑚-虫黄藻NOS ORF片段的原核表达 | 第58-60页 |
3.4.1 珊瑚-虫黄藻NOS ORF片段的克隆 | 第58-59页 |
3.4.2 珊瑚-虫黄藻NOS ORF重组蛋白的表达 | 第59-60页 |
3.5 样品总蛋白浓度的测定 | 第60页 |
3.6 热应激下珊瑚NOS活性的变化 | 第60-61页 |
3.7 热应激下NO含量的变化 | 第61-63页 |
4 讨论 | 第63-66页 |
4.1 PdNOS的基本特征 | 第63-64页 |
4.2 虫黄藻NOS的基本特征 | 第64页 |
4.3 NOS活性和NO含量的热响应 | 第64-66页 |
5 结论 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-73页 |
致谢 | 第73页 |