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鹿角杯形珊瑚一氧化氮合成酶的分子特征研究

摘要第4-5页
Abstract第5页
1 研究背景第8-24页
    1.1 全球珊瑚的分布第8页
    1.2 环境因子对珊瑚礁生态系统的影响第8-9页
    1.3 珊瑚的分类及鹿角杯形珊瑚简介第9-10页
    1.4 虫黄藻简介第10-12页
        1.4.1 虫黄藻的分类第10-11页
        1.4.2 虫黄藻的生活史第11-12页
    1.5 珊瑚与虫黄藻的关系第12-14页
    1.6 珊瑚的白化及其对生态的影响第14-17页
        1.6.1 珊瑚的白化第14-16页
        1.6.2 珊瑚礁白化的生态影响第16-17页
    1.7 我国珊瑚礁白化的研究现状第17-18页
    1.8 NO系统简介第18-20页
        1.8.1 NO系统组成简介第19页
        1.8.2 NOS的分类第19-20页
    1.9 NO系统在机体的生理调节功能第20-21页
    1.10 NO系统在其他生物中的研究进展第21-22页
        1.10.1 NO系统在低等动物中的研究第21页
        1.10.2 NO系统在鱼类、甲壳等动物中的研究第21-22页
    1.11 本研究的目的及意义第22-24页
        1.11.1 研究意义第22页
        1.11.2 研究目的第22-24页
2 材料和方法第24-39页
    2.1 实验材料第24-27页
        2.1.1 实验生物及菌株第24页
        2.1.2 本实验所用到的试剂耗材第24-27页
    2.2 实验方法第27-39页
        2.2.1 鹿角杯形珊瑚-虫黄藻总RNA的制备第27页
        2.2.2 珊瑚-虫黄藻cDNA第一链的合成第27-28页
        2.2.3 PdNOS基因全长的扩增第28-29页
        2.2.4 虫黄藻NOS基因全长的扩增第29-31页
        2.2.5 基因序列及蛋白功能分析第31页
        2.2.6 NOS基因ORF框目的片段扩增第31-34页
        2.2.7 重组表达载体的构建第34页
        2.2.8 PdNOS和虫黄藻NOS的重组蛋白的表达第34-37页
        2.2.9 鹿角杯形珊瑚热胁迫实验第37-38页
        2.2.10 热胁迫实验下样品总蛋白的测定第38页
        2.2.11 热胁迫实验下NO含量的测定第38页
        2.2.12 热胁迫实验下NOS酶比活力的测定第38-39页
3 实验结果第39-63页
    3.1 珊瑚-虫黄藻cDNA文库制备及基因全长的获得第39-40页
    3.2 PdNOS基因序列及蛋白结构特征第40-50页
        3.2.1 PdNOS基因的cDNA序列特征第40-44页
        3.2.2 PdNOS分子量及等电点分析第44-45页
        3.2.3 PdNOS蛋白质结构域预测第45页
        3.2.4 PdNOS功能位点分析第45-47页
        3.2.5 PdNOS蛋白信号肽预测第47-48页
        3.2.6 PdNOS跨膜区预测第48页
        3.2.7 PdNOS的亚细胞定位预测第48-49页
        3.2.8 PdNOS蛋白三维结构的预测第49页
        3.2.9 PdNOS的同源性分析第49-50页
    3.3 虫黄藻NOS基因序列及蛋白结构特征第50-58页
        3.3.1 虫黄藻NOS基因的序列分析第50-53页
        3.3.2 虫黄藻NOS分子量及等电点分析第53页
        3.3.3 虫黄藻NOS蛋白质结构域预测第53-54页
        3.3.4 虫黄藻NOS功能位点分析第54-55页
        3.3.5 虫黄藻NOS蛋白信号肽预测第55页
        3.3.6 虫黄藻NOS跨膜区预测第55-56页
        3.3.7 虫黄藻NOS的亚细胞定位预测第56页
        3.3.8 虫黄藻NOS蛋白三维结构的预测第56-57页
        3.3.9 虫黄藻NOS的同源性分析第57-58页
    3.4 珊瑚-虫黄藻NOS ORF片段的原核表达第58-60页
        3.4.1 珊瑚-虫黄藻NOS ORF片段的克隆第58-59页
        3.4.2 珊瑚-虫黄藻NOS ORF重组蛋白的表达第59-60页
    3.5 样品总蛋白浓度的测定第60页
    3.6 热应激下珊瑚NOS活性的变化第60-61页
    3.7 热应激下NO含量的变化第61-63页
4 讨论第63-66页
    4.1 PdNOS的基本特征第63-64页
    4.2 虫黄藻NOS的基本特征第64页
    4.3 NOS活性和NO含量的热响应第64-66页
5 结论第66-67页
参考文献第67-73页
致谢第73页

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