摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
前言 | 第14-19页 |
第一章 材料与仪器 | 第19-24页 |
1.1 实验动物 | 第19页 |
1.2 主要试剂与耗材 | 第19-20页 |
1.3 主要仪器 | 第20-22页 |
1.4 部分试剂的配置 | 第22-24页 |
第二章 实验方法与步骤 | 第24-39页 |
2.1 动物模型建立及分组干预 | 第24-25页 |
2.1.1 动物分组 | 第24页 |
2.1.2 P38 MAPK抑制剂SB 203580的配制 | 第24页 |
2.1.3 脑积水动物模型建立 | 第24-25页 |
2.1.4 验干预 | 第25页 |
2.2 脑积水程度评价 | 第25-26页 |
2.2.1 MRI检查 | 第25-26页 |
2.2.2 脑室体积和EVAN's指数测定 | 第26页 |
2.3 脑组织标本取材与处理 | 第26-27页 |
2.3.1 脑脊液取材 | 第26页 |
2.3.2 脑组织取材 | 第26-27页 |
2.3.3 脑含水量的测定 | 第27页 |
2.4 脑脊液酶联免疫吸附法(ELISA)测定肿瘤坏死因子-α浓度 | 第27-29页 |
2.5 RT-PCR检测脑组织中AQP4 mRNA与的TNF-αmRNA水平 | 第29-33页 |
2.5.1 引物设计 | 第29页 |
2.5.2 大鼠脑组织总RNA提取 | 第29-31页 |
2.5.3 RNA的浓度和纯度的测定 | 第31页 |
2.5.4 RNA的逆转录 | 第31-32页 |
2.5.5 RT-PCR检测 | 第32-33页 |
2.6 Western Blot检测脑组织中AQP-4,P38及磷酸化P38水平 | 第33-37页 |
2.6.1 动物蛋白提取 | 第34页 |
2.6.2 BCA法测蛋白浓度 | 第34-35页 |
2.6.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第35-36页 |
2.6.4 电转 | 第36页 |
2.6.5 封闭、杂交 | 第36页 |
2.6.6 ECL发光鉴定 | 第36-37页 |
2.7 免疫组化检测脑组织中AQP-4,P38及磷酸化P38水平 | 第37-38页 |
2.8 统计学分析 | 第38-39页 |
第三章 实验结果 | 第39-48页 |
3.1 实验动物基本情况 | 第39-40页 |
3.1.1 动物建模结果 | 第39页 |
3.1.2 动物行为学表现及体重变化 | 第39-40页 |
3.2 MRI检测结果 | 第40-41页 |
3.2.1 MRI影像 | 第40-41页 |
3.2.2 EVAN'S指数测定结果 | 第41页 |
3.3 脑组织水含量测定结果 | 第41-42页 |
3.4 ELISA检测结果 | 第42-43页 |
3.5 RT-PCR检测结果 | 第43-44页 |
3.6 Western Blot检测结果 | 第44-46页 |
3.7 免疫组化检测结果 | 第46-48页 |
第四章 讨论 | 第48-56页 |
4.1 脑积水动物模型的建立方式及评价 | 第48-49页 |
4.2 AQP4在脑积水中的作用 | 第49-52页 |
4.2.1 AQP4在各种脑积水模型中的功能体现 | 第50-51页 |
4.2.2 AQP4对脑积水性脑水肿的作用 | 第51-52页 |
4.3 P38 MAPK信号通路对脑积水的调控作用 | 第52-56页 |
4.3.1 P38 MAPK信号通路调控脑积水时炎症因子表达 | 第53-54页 |
4.3.2 P38 MAPK信号通路调控AQP4表达及对脑积水的保护作用 | 第54-56页 |
第五章 结论与展望 | 第56-57页 |
5.1 结论 | 第56页 |
5.2 展望 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
致谢 | 第62页 |