中文摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩略词表 | 第11-14页 |
第一章 前言 | 第14-17页 |
第二章 文献综述 肺巨噬细胞在肺部相关疾病中的研究进展 | 第17-26页 |
一.肺巨噬细胞 | 第17-19页 |
1.肺巨噬细胞的来源 | 第17-18页 |
2.肺巨噬细胞的分类 | 第18-19页 |
二.肺巨噬细胞的基本生理功能 | 第19-21页 |
1.趋化和运动功能 | 第19页 |
2.吞噬和杀菌功能 | 第19页 |
3.分泌和细胞调控功能 | 第19-20页 |
4.特殊活化状态及其功能 | 第20-21页 |
三.肺巨噬细胞与常见肺部疾病 | 第21-26页 |
1.慢性阻塞性肺疾病 | 第21-22页 |
2.肺结核 | 第22-23页 |
3.哮喘 | 第23-24页 |
4.肺纤维化 | 第24-26页 |
第三章 材料与方法 | 第26-42页 |
3.1 实验材料 | 第26-32页 |
3.1.1 实验动物与细胞 | 第26页 |
3.1.2 主要试剂 | 第26-28页 |
3.1.3 实验相关试剂配置 | 第28-31页 |
3.1.4 主要仪器与耗材 | 第31-32页 |
3.2 实验方法 | 第32-42页 |
3.2.1 巨噬细胞系与成纤维细胞系的培养:复苏、传代和冻存 | 第32-33页 |
3.2.2 蛋白样品的制备 | 第33-34页 |
3.2.3 SDS-PAGE蛋白质免疫印迹 | 第34页 |
3.2.4 细胞免疫荧光 | 第34-35页 |
3.2.5 siRNA特异性的敲减巨噬细胞中的环状RNA | 第35-36页 |
3.2.6CRISPR/Cas9特异性的敲减蛋白ZC3H4 | 第36页 |
3.2.7 MTT实验测定细胞活力 | 第36页 |
3.2.8 RNA的提取 | 第36-37页 |
3.2.9 实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR) | 第37-38页 |
3.2.10 3D巢式基质模型的迁移实验 | 第38页 |
3.2.11 原位杂交实验 | 第38-39页 |
3.2.12 RNApull-down实验 | 第39-40页 |
3.2.13 人的肺灌洗液获得巨噬细胞 | 第40页 |
3.2.14 小鼠矽肺模型的建立 | 第40页 |
3.2.15 小鼠肺组织标本采集 | 第40-41页 |
3.2.16 数据的统计与分析 | 第41-42页 |
第四章 实验结果 | 第42-55页 |
第一部分:ZC3H4参与SiO_2引起的巨噬细胞的活化 | 第42-47页 |
4.1.1 SiO_2引起巨噬细胞的活化 | 第42-43页 |
4.1.2 SiO_2引起巨噬细胞中ZC3H4表达呈时间依赖性升高 | 第43-44页 |
4.1.3 ZC3H4参与SiO_2引起的巨噬细胞的活化 | 第44-45页 |
4.1.4 ZC3H4参与巨噬细胞活化诱导的成纤维细胞迁移 | 第45-47页 |
第二部分:ZC3H4影响巨噬细胞活化的分子机制 | 第47-55页 |
4.2.1 SiO_2引起了巨噬细胞中circZC3H4水平呈时间依赖性升高 | 第47-49页 |
4.2.2 circZC3H4调控ZC3H4的表达和巨噬细胞活化 | 第49-50页 |
4.2.3 circZC3H4和miR-212有相互作用 | 第50-51页 |
4.2.4 miR-212对ZC3H4表达的影响 | 第51-52页 |
4.2.5 circZC3H4通过miR-212调控ZC3H4的表达 | 第52-53页 |
4.2.6 人源细胞和组织样本中ZC3H4表达的检测 | 第53-55页 |
第五章 讨论 | 第55-59页 |
第六章 结论 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-72页 |
作者简介 | 第72页 |