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新型锌指蛋白-ZC3H4参与SiO2诱导巨噬细胞活化的机制研究

中文摘要第5-7页
Abstract第7-8页
缩略词表第11-14页
第一章 前言第14-17页
第二章 文献综述 肺巨噬细胞在肺部相关疾病中的研究进展第17-26页
    一.肺巨噬细胞第17-19页
        1.肺巨噬细胞的来源第17-18页
        2.肺巨噬细胞的分类第18-19页
    二.肺巨噬细胞的基本生理功能第19-21页
        1.趋化和运动功能第19页
        2.吞噬和杀菌功能第19页
        3.分泌和细胞调控功能第19-20页
        4.特殊活化状态及其功能第20-21页
    三.肺巨噬细胞与常见肺部疾病第21-26页
        1.慢性阻塞性肺疾病第21-22页
        2.肺结核第22-23页
        3.哮喘第23-24页
        4.肺纤维化第24-26页
第三章 材料与方法第26-42页
    3.1 实验材料第26-32页
        3.1.1 实验动物与细胞第26页
        3.1.2 主要试剂第26-28页
        3.1.3 实验相关试剂配置第28-31页
        3.1.4 主要仪器与耗材第31-32页
    3.2 实验方法第32-42页
        3.2.1 巨噬细胞系与成纤维细胞系的培养:复苏、传代和冻存第32-33页
        3.2.2 蛋白样品的制备第33-34页
        3.2.3 SDS-PAGE蛋白质免疫印迹第34页
        3.2.4 细胞免疫荧光第34-35页
        3.2.5 siRNA特异性的敲减巨噬细胞中的环状RNA第35-36页
        3.2.6CRISPR/Cas9特异性的敲减蛋白ZC3H4第36页
        3.2.7 MTT实验测定细胞活力第36页
        3.2.8 RNA的提取第36-37页
        3.2.9 实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)第37-38页
        3.2.10 3D巢式基质模型的迁移实验第38页
        3.2.11 原位杂交实验第38-39页
        3.2.12 RNApull-down实验第39-40页
        3.2.13 人的肺灌洗液获得巨噬细胞第40页
        3.2.14 小鼠矽肺模型的建立第40页
        3.2.15 小鼠肺组织标本采集第40-41页
        3.2.16 数据的统计与分析第41-42页
第四章 实验结果第42-55页
    第一部分:ZC3H4参与SiO_2引起的巨噬细胞的活化第42-47页
        4.1.1 SiO_2引起巨噬细胞的活化第42-43页
        4.1.2 SiO_2引起巨噬细胞中ZC3H4表达呈时间依赖性升高第43-44页
        4.1.3 ZC3H4参与SiO_2引起的巨噬细胞的活化第44-45页
        4.1.4 ZC3H4参与巨噬细胞活化诱导的成纤维细胞迁移第45-47页
    第二部分:ZC3H4影响巨噬细胞活化的分子机制第47-55页
        4.2.1 SiO_2引起了巨噬细胞中circZC3H4水平呈时间依赖性升高第47-49页
        4.2.2 circZC3H4调控ZC3H4的表达和巨噬细胞活化第49-50页
        4.2.3 circZC3H4和miR-212有相互作用第50-51页
        4.2.4 miR-212对ZC3H4表达的影响第51-52页
        4.2.5 circZC3H4通过miR-212调控ZC3H4的表达第52-53页
        4.2.6 人源细胞和组织样本中ZC3H4表达的检测第53-55页
第五章 讨论第55-59页
第六章 结论第59-60页
致谢第60-61页
参考文献第61-72页
作者简介第72页

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