中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 引言 | 第9-17页 |
1.1 研究背景 | 第9-14页 |
1.1.1 UV-B研究进展 | 第9-10页 |
1.1.2 微管的相关研究进展 | 第10-11页 |
1.1.3 微管结合蛋白研究进展 | 第11-14页 |
1.2 研究目的与意义 | 第14页 |
1.3 研究内容 | 第14-17页 |
2 材料与方法 | 第17-31页 |
2.1 实验材料 | 第17-18页 |
2.1.1 实验样品 | 第17页 |
2.1.2 主要试剂与酶 | 第17-18页 |
2.1.3 主要仪器 | 第18页 |
2.2 实验方法 | 第18-31页 |
2.2.1 材料培养 | 第18页 |
2.2.2 各处理组设置 | 第18-19页 |
2.2.3 拟南芥植株株高和根长的测定 | 第19页 |
2.2.4 可溶性糖及丙二醛(MDA)的测定 | 第19页 |
2.2.5 可溶性蛋白的测定 | 第19页 |
2.2.6 抗氧化酶活性的测定 | 第19页 |
2.2.7 数据统计与分析 | 第19页 |
2.2.8 MAP65-1过表达载体的构建 | 第19-23页 |
2.2.9 pGFPXB-4-MAP65-1的鉴定 | 第23-25页 |
2.2.10 pGFPXB-4-MAP65-1转化农杆菌 | 第25-26页 |
2.2.11 浸花法转化拟南芥 | 第26页 |
2.2.12 筛选阳性转基因植株 | 第26-27页 |
2.2.13 农杆菌介导的瞬时转化烟草(注射法) | 第27页 |
2.2.14 T-DNA插入突变体的纯合性鉴定 | 第27-29页 |
2.2.15 半定量RT-PCR法检测细胞内目的基因在转录水平的表达 | 第29-30页 |
2.2.16 生物信息学分析所用软件 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-49页 |
3.1 MAP65-1的生物信息学分析 | 第31-34页 |
3.2 pGFPXB-4-MAP65-1的构建 | 第34-38页 |
3.2.1 RNA的提取及cDNA的获得 | 第34-35页 |
3.2.2 MAP65-1基因的扩增 | 第35页 |
3.2.3 PCR验证和酶切验证 | 第35-36页 |
3.2.4 测序验证 | 第36-38页 |
3.3 pGFPXB-4-MAP65-1的鉴定 | 第38-40页 |
3.3.1 pGFPXB-4-MAP65-1转化农杆菌的验证 | 第38-39页 |
3.3.2 pGFPXB-4-MAP65-1重组质粒在烟草叶表皮细胞的瞬时表达 | 第39页 |
3.3.3 DNA水平鉴定阳性转基因植株 | 第39-40页 |
3.4 pGFPXB-4-MAP65-1重组质粒在拟南芥各组织的表达 | 第40-41页 |
3.5 T-DNA插入突变体的鉴定 | 第41-42页 |
3.6 增强UV-B辐射拟南芥不同株系的影响 | 第42-49页 |
3.6.1 增强UV-B辐射对拟南芥不同株系根长的影响 | 第42页 |
3.6.2 增强UV-B辐射对拟南芥不同株系株高的影响 | 第42-43页 |
3.6.3 增强UV-B辐射对拟南芥不同株系丙二醛的影响 | 第43-44页 |
3.6.4 增强UV-B辐射对拟南芥不同株系可溶性蛋白的影响 | 第44页 |
3.6.5 增强UV-B辐射对拟南芥不同株系可溶性糖含量的影响 | 第44-45页 |
3.6.6 增强UV-B辐射对拟南芥不同株系抗氧化酶活性的影响 | 第45-46页 |
3.6.7 增强UV-B辐射对AtMAP65-1基因表达的影响 | 第46-47页 |
3.6.8 增强UV-B辐射对拟南芥MAP65-1蛋白表达的影响 | 第47-49页 |
4 讨论与结论 | 第49-52页 |
4.1 讨论 | 第49-52页 |
4.1.1 生物信息学分析 | 第49页 |
4.1.2 GFP标签 | 第49-50页 |
4.1.3 MAP65-1与“分束分裂”现象可能存在的关系 | 第50-52页 |
4.1.4 增强UV-B辐射对拟南芥不同株系生理指标的影响 | 第52页 |
4.2 结论 | 第52页 |
待解决的问题 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-61页 |
在学期间的研究成果 | 第61-63页 |
致谢 | 第63页 |