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运用高通量遗传互作图谱技术研究酵母DNA复制检验点网络

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
缩略词表第8-11页
第一章 引言第11-33页
    1.1 酿酒酵母DNA复制及其检验点第11-18页
    1.2 染色质组装复合体CAF-1第18-22页
    1.3 组蛋白转录因子Spt21第22页
    1.4 高通量遗传学相互作用研究方法第22-32页
    1.5 论文的研究目的和意义第32-33页
第二章 实验材料与实验方法第33-46页
    2.1 实验材料第33-35页
    2.2 E-MAP实验方法第35-40页
    2.3 酿酒酵母高效转化第40-41页
    2.4 酵母基因敲除第41页
    2.5 TCA-丙酮法提取酵母细胞总蛋白第41-42页
    2.6 免疫沉淀第42页
    2.7 可溶性GST融合蛋白的诱导表达和纯化第42-43页
    2.8 蛋白免疫印迹第43页
    2.9 梯度稀释药物测菌株敏感性实验第43-44页
    2.10 酵母基因组提取第44页
    2.11 利用流式细胞仪分析细胞周期第44页
    2.12 荧光显微镜观察样品的制备第44-45页
    2.13 激光共聚焦显微镜观察荧光蛋白第45页
    2.14 酵母双杂交实验第45页
    2.15 体外磷酸化反应第45-46页
第三章 酿酒酵母S期检验点遗传互作网络分析第46-66页
    3.1 酿酒酵母S期检验点遗传互作网络概况与分析第46-56页
    3.2 S期检验点遗传互作网络分析第56-65页
    3.3 小结第65-66页
第四章 CAF-1参与S期检验点的激活第66-80页
    4.1 CAF-1与9-1-1复合体具有负相互作用第66-67页
    4.2 CAF-1与S期检验点其它组分具有负相互作用第67-68页
    4.3 过表达RNR1/RNR3能回补CAF-1突变体的弱生长表型第68-69页
    4.4 CAF-1参与效应激酶Rad53的激活第69-71页
    4.5 CAF-1影响S期检验点引起的细胞周期停滞第71-72页
    4.6 CAF-1参与核心激酶Mec1的激活过程第72-75页
    4.7 CAF-1与核心激酶Mec1/Ddc2复合体有互作第75-77页
    4.8 Mec1在体外可以磷酸化CAF-1第77-78页
    4.9 小结第78-80页
第五章 Spt21参与S期检验点的激活第80-83页
    5.1 SPT21与9-1-1复合体具有负相互作用第80-81页
    5.2 Spt21影响激酶Rad53的激活第81页
    5.3 Spt21影响S期检验点引起的细胞周期停滞第81-82页
    5.4 小结第82-83页
第六章 讨论与展望第83-86页
参考文献第86-98页
致谢第98-99页
附录第99-105页
    附录1 菌株列表第99-100页
    附录2 质粒列表第100-101页
    附录3 问询基因列表第101-105页
个人简历第105页

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