摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略词表 | 第8-11页 |
第一章 引言 | 第11-33页 |
1.1 酿酒酵母DNA复制及其检验点 | 第11-18页 |
1.2 染色质组装复合体CAF-1 | 第18-22页 |
1.3 组蛋白转录因子Spt21 | 第22页 |
1.4 高通量遗传学相互作用研究方法 | 第22-32页 |
1.5 论文的研究目的和意义 | 第32-33页 |
第二章 实验材料与实验方法 | 第33-46页 |
2.1 实验材料 | 第33-35页 |
2.2 E-MAP实验方法 | 第35-40页 |
2.3 酿酒酵母高效转化 | 第40-41页 |
2.4 酵母基因敲除 | 第41页 |
2.5 TCA-丙酮法提取酵母细胞总蛋白 | 第41-42页 |
2.6 免疫沉淀 | 第42页 |
2.7 可溶性GST融合蛋白的诱导表达和纯化 | 第42-43页 |
2.8 蛋白免疫印迹 | 第43页 |
2.9 梯度稀释药物测菌株敏感性实验 | 第43-44页 |
2.10 酵母基因组提取 | 第44页 |
2.11 利用流式细胞仪分析细胞周期 | 第44页 |
2.12 荧光显微镜观察样品的制备 | 第44-45页 |
2.13 激光共聚焦显微镜观察荧光蛋白 | 第45页 |
2.14 酵母双杂交实验 | 第45页 |
2.15 体外磷酸化反应 | 第45-46页 |
第三章 酿酒酵母S期检验点遗传互作网络分析 | 第46-66页 |
3.1 酿酒酵母S期检验点遗传互作网络概况与分析 | 第46-56页 |
3.2 S期检验点遗传互作网络分析 | 第56-65页 |
3.3 小结 | 第65-66页 |
第四章 CAF-1参与S期检验点的激活 | 第66-80页 |
4.1 CAF-1与9-1-1复合体具有负相互作用 | 第66-67页 |
4.2 CAF-1与S期检验点其它组分具有负相互作用 | 第67-68页 |
4.3 过表达RNR1/RNR3能回补CAF-1突变体的弱生长表型 | 第68-69页 |
4.4 CAF-1参与效应激酶Rad53的激活 | 第69-71页 |
4.5 CAF-1影响S期检验点引起的细胞周期停滞 | 第71-72页 |
4.6 CAF-1参与核心激酶Mec1的激活过程 | 第72-75页 |
4.7 CAF-1与核心激酶Mec1/Ddc2复合体有互作 | 第75-77页 |
4.8 Mec1在体外可以磷酸化CAF-1 | 第77-78页 |
4.9 小结 | 第78-80页 |
第五章 Spt21参与S期检验点的激活 | 第80-83页 |
5.1 SPT21与9-1-1复合体具有负相互作用 | 第80-81页 |
5.2 Spt21影响激酶Rad53的激活 | 第81页 |
5.3 Spt21影响S期检验点引起的细胞周期停滞 | 第81-82页 |
5.4 小结 | 第82-83页 |
第六章 讨论与展望 | 第83-86页 |
参考文献 | 第86-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
附录 | 第99-105页 |
附录1 菌株列表 | 第99-100页 |
附录2 质粒列表 | 第100-101页 |
附录3 问询基因列表 | 第101-105页 |
个人简历 | 第105页 |