摘要 | 第6-10页 |
Abstract | 第10-15页 |
略缩词汇 | 第16-19页 |
前言 | 第19-32页 |
1. 引言 | 第19页 |
2. 卵泡发育 | 第19-22页 |
2.1 原始卵泡的形成 | 第19-21页 |
2.2 卵泡的活化和生长 | 第21页 |
2.3 卵泡闭锁 | 第21-22页 |
3. 卵母细胞减数分裂 | 第22-27页 |
3.1 卵母细胞减数分裂的阻滞 | 第23-26页 |
3.2 卵母细胞减数分裂的恢复 | 第26-27页 |
4. G_sα概述 | 第27-32页 |
4.1 G_α的基本特征 | 第27-29页 |
4.2 G_sα的生物学功能 | 第29-32页 |
实验材料和方法 | 第32-56页 |
1 实验材料 | 第32-40页 |
1.1 实验动物 | 第32页 |
1.2 菌株 | 第32页 |
1.3 主要实验试剂 | 第32-35页 |
1.4 主要实验仪器 | 第35-37页 |
1.5 主要实验试剂配方 | 第37-40页 |
2 实验方法 | 第40-56页 |
2.1 小鼠鼠尾基因组提取 | 第40页 |
2.2 小鼠基因型鉴定 | 第40-42页 |
2.3 卵母细胞的采集和培养 | 第42-43页 |
2.4 自然排卵以及胚胎获取 | 第43页 |
2.5 体外受精 | 第43-44页 |
2.6 雌鼠繁殖力检测 | 第44页 |
2.7 小鼠卵巢组织学分析、卵泡计数和免疫染色 | 第44-46页 |
2.8 卵母细胞ROS水平检测和定量 | 第46-47页 |
2.9 卵母细胞GSH含量检测 | 第47页 |
2.10 卵母细胞ATP含量检测 | 第47-48页 |
2.11 卵母细胞线粒体DNA拷贝数检测 | 第48-52页 |
2.12 卵母细胞免疫荧光染色 | 第52页 |
2.13 卵母细胞线粒体参数检测 | 第52-53页 |
2.14 卵母细胞Annexin V染色 | 第53页 |
2.15 蛋白提取和Western Blot检测 | 第53-54页 |
2.16 小鼠血清激素水平检测 | 第54页 |
2.17 小鼠动情周期检测 | 第54-56页 |
实验结果 | 第56-75页 |
1. 制作由Zp3-Cre介导的卵母细胞特异性敲除小鼠 | 第56-57页 |
2. G_sα对于维持雌性小鼠的生育力是必需的 | 第57-61页 |
3. 在卵母细胞中敲除G_sα导致小鼠早期胚胎发育出现缺陷 | 第61-62页 |
4. 卵母细胞中删除G_sα导致减数分裂提前恢复 | 第62-64页 |
5. 卵母细胞中G_sα的敲除导致卵母细胞质量恶化 | 第64-68页 |
6. 卵母细胞中缺失G_sα导致氧化应激以及线粒体功能紊乱 | 第68-72页 |
7. 卵母细胞中删除G_sα导致细胞早期凋亡 | 第72-73页 |
8. 抗氧化剂的增补可以部分挽救G_sα敲除卵母细胞的缺陷 | 第73-75页 |
讨论 | 第75-78页 |
总结 | 第78-79页 |
创新点 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-91页 |
攻读博士期间发表学术论文情况 | 第91-92页 |
致谢 | 第92-93页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第93页 |