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G_s α对小鼠卵母细胞发育调控作用的研究

摘要第6-10页
Abstract第10-15页
略缩词汇第16-19页
前言第19-32页
    1. 引言第19页
    2. 卵泡发育第19-22页
        2.1 原始卵泡的形成第19-21页
        2.2 卵泡的活化和生长第21页
        2.3 卵泡闭锁第21-22页
    3. 卵母细胞减数分裂第22-27页
        3.1 卵母细胞减数分裂的阻滞第23-26页
        3.2 卵母细胞减数分裂的恢复第26-27页
    4. G_sα概述第27-32页
        4.1 G_α的基本特征第27-29页
        4.2 G_sα的生物学功能第29-32页
实验材料和方法第32-56页
    1 实验材料第32-40页
        1.1 实验动物第32页
        1.2 菌株第32页
        1.3 主要实验试剂第32-35页
        1.4 主要实验仪器第35-37页
        1.5 主要实验试剂配方第37-40页
    2 实验方法第40-56页
        2.1 小鼠鼠尾基因组提取第40页
        2.2 小鼠基因型鉴定第40-42页
        2.3 卵母细胞的采集和培养第42-43页
        2.4 自然排卵以及胚胎获取第43页
        2.5 体外受精第43-44页
        2.6 雌鼠繁殖力检测第44页
        2.7 小鼠卵巢组织学分析、卵泡计数和免疫染色第44-46页
        2.8 卵母细胞ROS水平检测和定量第46-47页
        2.9 卵母细胞GSH含量检测第47页
        2.10 卵母细胞ATP含量检测第47-48页
        2.11 卵母细胞线粒体DNA拷贝数检测第48-52页
        2.12 卵母细胞免疫荧光染色第52页
        2.13 卵母细胞线粒体参数检测第52-53页
        2.14 卵母细胞Annexin V染色第53页
        2.15 蛋白提取和Western Blot检测第53-54页
        2.16 小鼠血清激素水平检测第54页
        2.17 小鼠动情周期检测第54-56页
实验结果第56-75页
    1. 制作由Zp3-Cre介导的卵母细胞特异性敲除小鼠第56-57页
    2. G_sα对于维持雌性小鼠的生育力是必需的第57-61页
    3. 在卵母细胞中敲除G_sα导致小鼠早期胚胎发育出现缺陷第61-62页
    4. 卵母细胞中删除G_sα导致减数分裂提前恢复第62-64页
    5. 卵母细胞中G_sα的敲除导致卵母细胞质量恶化第64-68页
    6. 卵母细胞中缺失G_sα导致氧化应激以及线粒体功能紊乱第68-72页
    7. 卵母细胞中删除G_sα导致细胞早期凋亡第72-73页
    8. 抗氧化剂的增补可以部分挽救G_sα敲除卵母细胞的缺陷第73-75页
讨论第75-78页
总结第78-79页
创新点第79-80页
参考文献第80-91页
攻读博士期间发表学术论文情况第91-92页
致谢第92-93页
学位论文评阅及答辩情况表第93页

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