| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第10-34页 |
| 1.1 引言 | 第10-11页 |
| 1.2 香豆素及其衍生物的生物活性 | 第11-18页 |
| 1.2.1 抗肿瘤活性 | 第11-15页 |
| 1.2.2 抗菌活性 | 第15-16页 |
| 1.2.3 抗氧化和抗炎活性 | 第16-17页 |
| 1.2.4 抗病毒活性 | 第17页 |
| 1.2.5 降血脂活性 | 第17-18页 |
| 1.3 哌嗪衍生物在抗肿瘤活性改造中的应用 | 第18-22页 |
| 1.3.1 哌嗪及其衍生物的生物活性 | 第18-21页 |
| 1.3.2 哌嗪对香豆素结构改造的研究现状 | 第21-22页 |
| 1.4 本课题的确定及其研究意义 | 第22-24页 |
| 参考文献 | 第24-34页 |
| 第二章 香豆素哌嗪衍生物的合成 | 第34-51页 |
| 2.1 引言 | 第34页 |
| 2.2 试剂及仪器 | 第34-35页 |
| 2.2.1 药品和试剂 | 第34-35页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第35页 |
| 2.3 实验部分 | 第35-47页 |
| 2.3.1 异氰酸酯、异硫氰酸酯的制备 | 第35页 |
| 2.3.2 香豆素哌嗪脲衍生物的合成 | 第35-47页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第47-48页 |
| 2.5 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-51页 |
| 第三章 香豆素哌嗪衍生物体外抗肿瘤活性研究 | 第51-59页 |
| 3.1 引言 | 第51页 |
| 3.2 实验材料 | 第51-52页 |
| 3.2.1 主要仪器 | 第51-52页 |
| 3.2.2 药品和试剂 | 第52页 |
| 3.3 实验方法 | 第52-53页 |
| 3.3.1 试剂的配制 | 第52页 |
| 3.3.2 MTT法筛选的实验步骤 | 第52-53页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第53-56页 |
| 3.5 本章小结 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-59页 |
| 第四章 香豆素哌嗪衍生物的抗肿瘤机制研究 | 第59-87页 |
| 4.1 引言 | 第59-60页 |
| 4.2 实验材料和方法 | 第60-67页 |
| 4.2.1 材料 | 第60-61页 |
| 4.2.1.1 细胞株 | 第60-61页 |
| 4.2.1.2 主要试剂 | 第61页 |
| 4.2.1.3 主要实验仪器 | 第61页 |
| 4.2.2 实验方法 | 第61-67页 |
| 4.2.2.1 细胞凋亡检测 | 第62页 |
| 4.2.2.1.1 FITC Annexin V/PI凋亡实验 | 第62页 |
| 4.2.2.1.2 Hoechst 33258染色 | 第62页 |
| 4.2.2.1.3 吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)荧光染色 | 第62页 |
| 4.2.2.1.4 JC-1染色 | 第62页 |
| 4.2.2.2 细胞周期实验 | 第62-63页 |
| 4.2.2.3 荧光定量PCR检测 | 第63-64页 |
| 4.2.2.3.1 细胞总RNA的提取 | 第63页 |
| 4.2.2.3.2 逆转录实验 | 第63页 |
| 4.2.2.3.3 荧光定量PCR | 第63-64页 |
| 4.2.2.4 细胞间的ROS检测 | 第64页 |
| 4.2.2.5 细胞间的Ca~(2+)检测 | 第64页 |
| 4.2.2.6 Caspase-3活性检测 | 第64-65页 |
| 4.2.2.7 Western blot蛋白印迹实验 | 第65-67页 |
| 4.2.2.7.1 蛋白样品的制备 | 第65页 |
| 4.2.2.7.2 SDS-PAGE电泳 | 第65-66页 |
| 4.2.2.7.3 转膜 | 第66页 |
| 4.2.2.7.4 免疫反应 | 第66页 |
| 4.2.2.7.5 发光 | 第66-67页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第67-81页 |
| 4.3.1 细胞周期分析 | 第67-68页 |
| 4.3.2 细胞凋亡分析 | 第68-81页 |
| 4.3.2.1 荧光染色实验 | 第68-70页 |
| 4.3.2.1.1 Hoechest33258荧光染色检测对NCI-H460细胞凋亡的影响 | 第68-69页 |
| 4.3.2.1.2 吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)荧光染色检测对NCI-H460细胞早期凋亡的影响 | 第69-70页 |
| 4.3.2.2 Annexin V/PI双染流式细胞术对细胞凋亡定量分析 | 第70-71页 |
| 4.3.2.3 JC-1荧光染色检测对NCI-H460细胞的凋亡影响 | 第71-73页 |
| 4.3.2.4 活性氧ROS检测结果分析 | 第73-75页 |
| 4.3.2.5 细胞间钙离子水平检测结果分析 | 第75-77页 |
| 4.3.2.6 荧光定量PCR结果分析 | 第77-78页 |
| 4.3.2.7 caspase-3活性检测 | 第78-79页 |
| 4.3.2.8 Western blot蛋白印迹结果分析 | 第79-81页 |
| 4.4 本章小结 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-87页 |
| 第五章 结论与展望 | 第87-89页 |
| 附录 部分化合物NMR图和MS图 | 第89-122页 |
| 读研期间发表的论文目录 | 第122-123页 |
| 致谢 | 第123-124页 |
