摘要 | 第4-8页 |
Abstract | 第8-12页 |
1 引言 | 第15-16页 |
2 材料和方法 | 第16-29页 |
2.1 材料 | 第16-19页 |
2.1.1 实验用SD大鼠来源 | 第16页 |
2.1.2 主要试剂 | 第16-17页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第17-18页 |
2.1.4 常用试剂配制 | 第18-19页 |
2.2 实验方法 | 第19-29页 |
2.2.1 BMSCs的分离,培养和传代 | 第19页 |
2.2.2 实时定量基因扩增荧光(qPCR)检测相关基因表达水平 | 第19-22页 |
2.2.3 BCA法检测总蛋白浓度 | 第22页 |
2.2.4 酶联免疫吸附测定法检测ALP, Type I Collagen和OCN的含量 | 第22-23页 |
2.2.5 Western Blot检测PPARγ 和Runx2 蛋白表达水平 | 第23-27页 |
2.2.6 油红O染色检测脂肪细胞生成情况 | 第27页 |
2.2.7 电击穿孔转染 | 第27-28页 |
2.2.8 酶偶联比色试剂盒法检测甘油三酯的含量 | 第28页 |
2.2.9 统计学分析 | 第28-29页 |
3 实验结果 | 第29-46页 |
3.1 利用生物信息学数据库预测靶向PPARγ 的microRNAs | 第29-31页 |
3.1.1 TargetScan,microRNA.org预测miR-27a与PPARγ 的配对情况 | 第29页 |
3.1.2 荧光素酶实验 | 第29-31页 |
3.2 大鼠骨髓间充质干细胞体外培养的形态和特点 | 第31-33页 |
3.3 qPCR检测各组细胞microRNA-27a的表达水平 | 第33-35页 |
3.4 qPCR检测各组细胞PPARγ,和Runx2 mRNA的表达情况 | 第35-37页 |
3.4.1 qPCR检测PPARγ 的表达情况 | 第35-36页 |
3.4.2 qPCR检测Runx2 的表达情况 | 第36-37页 |
3.5 Western blot检测各组细胞PPARγ,Runx2 基因的表达情况 | 第37-39页 |
3.6 Elisa检测ALP, I型胶原,OCN的表达情况 | 第39-42页 |
3.6.1 Elisa检测ALP的表达情况 | 第39-40页 |
3.6.2 Elisa检测Type I型胶原蛋白的表达情况 | 第40-41页 |
3.6.3 Elisa检测OCN的表达情况 | 第41-42页 |
3.7 油红O脂肪染色检测BMSC成脂分化程度和脂肪生成状态 | 第42-45页 |
3.8 酶偶联比色试剂盒法检测细胞内 TG 含量差异 | 第45-46页 |
4 讨论 | 第46-50页 |
5 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-54页 |
综述 | 第54-73页 |
参考文献 | 第68-73页 |
中英文缩略词表 | 第73-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
个人简历 | 第75页 |