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miR-27a通过靶向调控PPARγ对酒精诱导大鼠BMSC分化的影响

摘要第4-8页
Abstract第8-12页
1 引言第15-16页
2 材料和方法第16-29页
    2.1 材料第16-19页
        2.1.1 实验用SD大鼠来源第16页
        2.1.2 主要试剂第16-17页
        2.1.3 主要仪器设备第17-18页
        2.1.4 常用试剂配制第18-19页
    2.2 实验方法第19-29页
        2.2.1 BMSCs的分离,培养和传代第19页
        2.2.2 实时定量基因扩增荧光(qPCR)检测相关基因表达水平第19-22页
        2.2.3 BCA法检测总蛋白浓度第22页
        2.2.4 酶联免疫吸附测定法检测ALP, Type I Collagen和OCN的含量第22-23页
        2.2.5 Western Blot检测PPARγ 和Runx2 蛋白表达水平第23-27页
        2.2.6 油红O染色检测脂肪细胞生成情况第27页
        2.2.7 电击穿孔转染第27-28页
        2.2.8 酶偶联比色试剂盒法检测甘油三酯的含量第28页
        2.2.9 统计学分析第28-29页
3 实验结果第29-46页
    3.1 利用生物信息学数据库预测靶向PPARγ 的microRNAs第29-31页
        3.1.1 TargetScan,microRNA.org预测miR-27a与PPARγ 的配对情况第29页
        3.1.2 荧光素酶实验第29-31页
    3.2 大鼠骨髓间充质干细胞体外培养的形态和特点第31-33页
    3.3 qPCR检测各组细胞microRNA-27a的表达水平第33-35页
    3.4 qPCR检测各组细胞PPARγ,和Runx2 mRNA的表达情况第35-37页
        3.4.1 qPCR检测PPARγ 的表达情况第35-36页
        3.4.2 qPCR检测Runx2 的表达情况第36-37页
    3.5 Western blot检测各组细胞PPARγ,Runx2 基因的表达情况第37-39页
    3.6 Elisa检测ALP, I型胶原,OCN的表达情况第39-42页
        3.6.1 Elisa检测ALP的表达情况第39-40页
        3.6.2 Elisa检测Type I型胶原蛋白的表达情况第40-41页
        3.6.3 Elisa检测OCN的表达情况第41-42页
    3.7 油红O脂肪染色检测BMSC成脂分化程度和脂肪生成状态第42-45页
    3.8 酶偶联比色试剂盒法检测细胞内 TG 含量差异第45-46页
4 讨论第46-50页
5 结论第50-51页
参考文献第51-54页
综述第54-73页
    参考文献第68-73页
中英文缩略词表第73-74页
致谢第74-75页
个人简历第75页

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